王苏燕
- 作品数：11 被引量：108H指数：7
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金云南省烟草公司项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 小球藻病毒的分离被引量：14
- 1996年
- 真核藻类作为一类重要的淡水和海洋水生生物与人类和环境有密切关系。在生态学上,藻类作为普通食物链中的原初生产者,在水环境中显得尤为重要,可作为许多水生生物的食物,也可使水域在一定范围内自净。藻类还极有希望成为人类新的食物来源和能源。但藻类的过量繁殖可引起严重的水污染。因此,搞清真核藻类与其寄生物—真核藻类病毒的关系,对维持藻类的生态平衡,控制利用藻类资源意义重大。对真核藻类病毒的深入研究已揭示出这类病毒在自然界的广泛存在。到目前为止,已报道发现的真核藻类病毒或病毒状颗粒(Virus—like particle)至少有44种,但多数仅限于电镜观察。直到病毒裂解性小球藻的发现,才使得对真核藻类病毒的研究提高到一个新水平,也使该领域的研究越来越受到人们的关注,国际上已开展真核藻类病毒研究的国家有美国、日本,德国等,我国在该领域的研究尚属空白。在国内开展真核藻类病毒的研究,首先要深入地调查我国的真核藻类病毒资源,同时可阐明一类新的病毒——寄主关系的分子生物学基础,了解诸如病毒基因组在寄主细胞中的表达调控,为研究高等植物基因的表达调控提供一个适宜的模型。另外,由于已知的真核藻类病毒具有相当大的基因组,可预见其基因产物的数目和功能具有多样性,例如病毒编码的甲?
- 张远征王苏燕盛刚叶寅田波
- 关键词：病毒小球藻病毒
- 抗水稻矮缩病毒的反义核酶及复制酶部分序列的合成、克隆及其水稻表达载体的构建被引量：3
- 1996年
- 采用反转录－聚合酶链式反应方法（ＲＴＰ－ＣＲ），在人工合成的引物引导下，扩增出水稻矮缩病毒基因组第一片段（Ｓ１）全长序列及第五片段的部分序列（ＳＳⅢ）．将扩增的片段分别克隆到克隆载体ｐＧＥＭ７Ｚｆ（＋）及ｐＵＣ１９的ｓｍａｌ位点上，并进行了序列测定。在此基础上，利用ｐＣＲ引入的方法将核酶序列引入到Ｓ５Ⅲ片段反义链上以构成反义核酶基因Ｓ５ⅢＲ，将Ｓ１片段５＇端部分序列（Ｓ１－１）及Ｓ５ⅢＲ基因克隆到植物表达载体ｐＲＯＫⅡ上，构建成水稻转化载体ｐＲＯＫ－Ｓ１－１＇及ｐＲＯＫ－Ｓ５ⅢＲ。
- 王苏燕盛刚刘伟平叶寅田波
- 关键词：水稻矮缩病毒植物病毒
- 转基因油菜中核酶介导的对花椰菜花叶病毒的高度抗病性被引量：13
- 1997年
- 设计了特异切割花椰菜花叶病毒(CaMV,ds DNA病毒)35S RNA的锤头型核酶基因(Rz);同时将核酶保守区内的一个G碱基以U代替构成核酶突变体(mRz)作为对照.体外切割实验表明.Rz可按设计要求高效特异地切割355 RNA,而mRz则完全没有切割活性.将Rz和mRz克隆到pROK2构建成植物表达载体pROK2-Rz和pROK2-mRz.采用转化下胚轴法转化油菜,通过筛选获得转Rz和mRz基因油菜植株、攻毒实验证明Rz当代转化植株表现出对CaMV的高度抗病性,75%的植株不表现任何症状,也测不出CaMV的存在,其抗病植株的T_1后代的抗病性按孟德尔定律3:1分离.mRz当代转化植株及其T_1后代植株只具有极其微弱的减轻症状的作用.
- 王苏燕叶寅赵淑珍田波
- 关键词：油菜转基因油菜花椰菜花叶病毒抗病性
- 抗烟草花叶病毒（TMV）转基因烟草的初步选育
- 1995年
- 抗烟草花叶病毒（ＴＭＶ）转基因烟草的初步选育ＧｅｎｅｔｉｃＴｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆＹｕｎｎａｎＣｏｍｍｅｒｃｉａｌＴｏｂａｃｃｏＣｕｌｔｉｖａｒｗｉｔｈＴＭＶ５４ｋＤｇｅｎｅａｎｄＲｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆＴｒａｎｓｇｅｎｉｃＰｌａｎｔｓｔｏＴ...
- 吕华飞何云昆张仲凯赵淑珍王苏燕
- 关键词：烟草花叶病毒转基因烟草抗病性抗性育种
- 水稻条纹叶枯病毒基因组含vRNA_2 ORF片段的克隆、序列分析及其在原核中的表达被引量：12
- 1997年
- 水稻条纹叶枯病毒(rice stripe virus,RSV)是柔丝病毒组的典型代表,其基因组由4种ss-RNA及相应低含量的4种dsRNA组成,其中,RNA1为负链性质,编码RNA多聚酶;RNA2～4均为双义编码性质(ambisense-coding strategy)。为研究该病毒RNA非编码区等调控元件在病毒基因组双义表达过程中的功能,采用反转录-聚合酶链式反应方法(RT-PCR),扩增出覆盖RSV RNA2 5′末端非编码区、vRNA2OrFT区、基因间非编码区及vcRNA2 ORF部分区域的REPI片段(1 159bp)。将此扩增产物克隆于载体pGEM-7Zf(+)的Sma Ⅰ位点上并进行了核苷酸序列测定。结果表明,中国分离物与日本分离物的REPI片段具极高的序列同源性。
- 王晓红叶寅王苏燕田波
- 关键词：水稻条纹叶枯病毒核苷酸无性系
- 表达反义核酶RNA的转基因水稻对矮缩病毒复制和症状的抑制作用被引量：10
- 1996年
- 用基因枪法将含有ＲＤＶ第五片段反义核酶序列基因的植物表达载体ｐＲＯＫＩＩ转化水稻幼胚，在Ｇ４１８存在的条件下，约２～３个月可筛选出抗性愈伤，转入分化培养基中培养可分化出幼苗。经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交法检测为阳性的水稻幼苗进行抗病性测定显示，转ＲＤＶ反义核酶基因的水稻植株对ＲＤＶ的复制和症状有显著抑制作用。转基因植株发病较轻，并能部分结实，而对照植株则明显矮化且大多不能抽穗。
- 杨文定吴祖建王苏燕刘伟平叶寅谢联辉田波
- 关键词：水稻矮缩病毒转基因水稻RNA
- 高抗病毒多基因转化烟草新品系的快速繁育被引量：2
- 1994年
- 高抗病毒多基因转化烟草新品系的快速繁育ＦａｓｔＢｒｅｅｄｉｎｇｏｆＨｉｇｈＲｅｓｉｓｔａｎｃｅｔｏＣｕｃｕｍｂｅｒＭｏｓａｉｃＶｉｒｕｓＣｏｎｆｅｒｒｅｄｂｙＭｕｔｉｐｌｅＧｅｎｅｓｉｎＴｒａｎｓｇｅｎｉｃＣｏｍｍｅｒｃｉａｌＴｏｂａｃｃｏＣｕｔｉｖ...
- 王苏燕叶寅
- 关键词：烟草多基因
- 番茄曲叶病及其血清学和PCR测定被引量：26
- 1995年
- 我国曾报道的番茄病毒病有多种,其中最常见的是黄瓜花叶病毒(CMV)和烟草花叶病毒(TMV)引起的花叶病。柯冲等(1964)在大陆首次报道烟粉虱(Bemisia tabaci)传播的番茄病毒病——番茄黄顶病,此病在50～60年代曾在广州市郊流行,造成大面积减产。Green等(1984)报道台湾发生番茄黄曲叶病,此病与日本的番茄黄矮病(Tomato yellow dwarf)相似,并且与烟草曲叶病毒(TLCV)有血清学关系。印度、委内瑞拉等国也曾报道发生由烟粉虱传播的番茄曲叶病和番茄黄曲叶病。1991和1992年秋,在广西南宁市郊发现一种症状表现为植株矮缩,叶片向上向内卷曲,叶背面产生耳状或杯状增生物,对光看有时可见叶脉呈墨绿色,不结果或少结果的番茄病害。1992年秋广西农业科学院的番茄试验地发病率高达6.8％,对当地秋番茄生产构成了威胁。作者对病害症状、传播、血清学反应及PCR分析等方面与烟草曲叶病毒进行了比较研究,证实了该病的病原与烟草曲叶病毒有很高的同源性。现将研究结果简报如下。
- 蔡健和王苏燕王小凤田波
- 关键词：番茄曲叶病病毒病血清学聚合酶链反应
- 快速选育抗黄瓜花叶病毒的转基因烟草纯合品系被引量：10
- 1994年
- 以来源于烟草推广品种ＮＣ８９花药的单倍体苗为转化受体，同时导入了黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）的外壳蛋白（ＣＰ）基因和卫星ＲＮＡ（Ｓａｔ—ＲＮＡ）基因，在获得的共１１２株转化植株中，有３株在人工接种浓度高达２００μｇ／ｍｌ的ＣＭＶ时仍不发病。通过０．４％秋水仙素处理使之加倍并收获种子，而后连续两代在大田条件下鉴定其ＣＭＶ抗性及综合农艺性状，并与单独导入了ＣＭＶＣＰ基因或ＣＭＶＳａｔ—ＲＮＡ基因的转基因ＮＣ８９品系及未转化的对照ＮＣ８９进行了比较。结果表明，同时表达ＣＭＶ外壳蛋白和卫星ＲＮＡ的双单倍体转基因植株，在Ｒ—１代即表现出一致的可稳定遗传的ＣＭＶ抗性，抗性水平较单独表达ＣＰ或Ｓａｔ—ＲＮＡ的转基因ＮＣ８９提高１倍左右。
- 吴中心张同庆姚根怀郭芳阳宋少堂王苏燕叶寅田波江付恩张国申玉亭晓周瑞宽
- 关键词：转基因纯合烟草选育
- 质粒DNA的酚-氯仿一步抽提法被引量：18
- 1993年
- 本文介绍了一种极快速提取质粒DNA的方法。该法是对Serghini等发表的方法的改进,全过程只需用酚-氯仿混合液抽提一次,用时少,操作简便,适用于大规模筛选重组克隆子,也可直接用作转化、酶切及DNA序列测定。
- 魏征宇王苏燕叶寅刘玉乐田波
- 关键词：质粒DNA微生物
