王盈盈
- 作品数:5 被引量:23H指数:2
- 供职机构:中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家重点实验室开放基金甘肃省科技支撑计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 猪伪狂犬病毒BarthaK61株TK缺失株的构建被引量:1
- 2013年
- 为构建猪伪狂犬病毒BarthaK61株TK缺失株,利用PCR法从猪伪狂犬病毒BarthaK61株基因组分别扩增出TK基因的左右2条臂TKR和TKL,并将TKR和TKL定向插入到pQCXIX载体中,构建pTK-转移质粒.进一步将EGFP基因插入到pTK-质粒中,构建pTK-/EGFP转移质粒.用pTK-/EGFP质粒与伪狂犬病毒BarthaK61株基因组共转染BHK-21细胞,通过挑取病变荧光蚀斑的方法获得了PRV/gE-/TK-/EGFP重组病毒.
- 何妍萍贾怀杰蔺国珍王盈盈白刚胡永浩景志忠
- 关键词:伪狂犬病毒
- 羊口疮病毒QH02株VEGF基因的克隆及其序列分析被引量:1
- 2013年
- 根据GenBank中登录的羊口疮病毒SA00株基因组序列,针对VEGF基因设计特异性引物,从感染OR-FV/QH02/2010的Hela细胞中提取病毒DNA作模板进行PCR,扩增VEGF基因并将其克隆入pEGM-T Easy载体,经鉴定且测序结果正确后对其序列进行分析。结果表明,该毒株VEGF基因的开放阅读框(ORF)大小为402bp,编码133个氨基酸,分子量为14.65ku。在氨基酸水平该毒株与国内ORFV各毒株VEGF序列的同源性为70.0%~97.8%,但与陕西株同源性较低(39.5%),与国外ORFV各毒株的同源性为38.8%~82.1%。对该基因的进化分析表明,其与VEGF-A、VEGF-B、VEGF-D型及NZ2株和PA11株的亲缘关系最近。
- 王盈盈贾怀杰白刚何妍萍岳城景志忠
- 关键词:羊口疮病毒VEGF克隆
- 伪狂犬病病毒载体及其应用的研究进展
- 2013年
- 随着对伪狂犬病病毒(PRV)基因组及其分子生物学特性研究的逐渐深入,人们应用基因工程原理与技术不断对PRV进行有目的的改造,从而研发了多种PRV载体疫苗。这种疫苗不仅可以提供对猪伪狂犬病的免疫预防,而且还能产生针对其他病原的保护性反应,具有非常大的潜在应用价值。本文对伪狂犬病病毒载体及其应用研究进行了综述,并对动物病毒基因工程疫苗今后的发展方向作了展望,以探讨更安全、高效新型疫苗的设计和创制。
- 何妍萍贾怀杰王盈盈刘太安景志忠
- 关键词:伪狂犬病病毒基因缺失疫苗
- 羊口疮病毒甘肃流行株的分离鉴定及其ORF059基因和ORF109基因的序列分析被引量:11
- 2013年
- 利用羊睾丸(lamp testicles,LT)细胞从采自甘肃省玉门市疑似羊口疮病羊的病料中分离病毒,并对其进行培养和PCR鉴定;结果,从疑似病料中成功分离到1株流行于我国甘肃省的羊口疮病毒,遂将其命名为ORFV/GSYM/2012/China。然后对分离株的ORF059基因(编码F1L蛋白)和ORF109基因(编码EEV糖蛋白)进行克隆、测序并进行遗传进化分析和编码蛋白的二级结构预测。序列分析表明,F1L基因长1 017bp,共编码338个氨基酸,与ORFV Jilin、Jilin-Nongan、Shanxi、GanS和NA1-11株的核苷酸同源性分别为97.9%、99.8%、96.2%、97.3%和99.9%。遗传进化分析结果表明,此分离株与我国Jilin-Nongan、GanS株,意大利Ov-7、Ov-C2株及新西兰NZ2分离株的亲缘性较近,表明不同地区分离毒株的F1L基因差异不大。该分离毒株ORF109基因长495bp,编码164个氨基酸。ORF109基因序列分析表明,此分离株与德国D1701株的相似性最高;经预测,ORF109蛋白的二级结构中含1个跨膜区,属于亲水性膜蛋白。
- 王盈盈贾怀杰白刚何妍萍景志忠
- 关键词:羊口疮病毒克隆
- 羊口疮病毒ORF129基因重组质粒的构建及其在BHK-21细胞中的表达被引量:10
- 2013年
- 为研究羊口疮病毒(ORFV)ORF129基因编码的锚蛋白调节宿主天然免疫应答的作用机制,利用PCR技术对ORFV/QH01/2010分离株ORF129基因进行扩增,并连接到pGEM-T easy载体,构建pGEM-ORF129重组质粒,双酶切后与pEGFP-N1真核表达载体连接,构建pEGFP-ORFV-ORF129真核表达质粒,经酶切、PCR鉴定及测序正确后转染BHK-21细胞,观察其在细胞中的表达情况.结果表明:ORFV ORF129基因在BHK-21细胞中获得稳定表达,并为进一步研究其编码蛋白在ORFV感染过程中的分子机制奠定了基础.
- 白刚贾怀杰何小兵王盈盈何妍萍吴润景志忠
- 关键词:羊口疮病毒BHK-21细胞