王瑞琴
- 作品数：9 被引量：36H指数：4
- 供职机构：东北农业大学动物科学技术学院动物营养研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省博士后基金黑龙江省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 重组鸡β-防御素6基因的表达和生物学特性的研究被引量：15
- 2009年
- 从鸡骨髓细胞中分离提取总RNA,经过RT-PCR扩增出鸡β-防御素-6(AvBD6)基因。经克隆测序表明扩增出的cDNA碱基数为204bp,编码68个氨基酸残基。根据已发现的禽β-防御素和鼠β-防御素-6的氨基酸序列构建系统进化树。发现鸡AvBD6氨基酸序列与鸡AvBD7氨基酸序列同源性最高,为62.7%。将该基因克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1上,进行原核表达。SDS-PAGE电泳表明,表达的重组鸡AvBD6融合蛋白分子量约为32ku。对该重组蛋白进行纯化与体外抗菌活性的测定。结果表明,重组鸡AvBD6融合蛋白对多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌有较高抗菌活性,对大肠杆菌的抗菌活性较弱,对猪霍乱沙门氏菌无抗菌活性。重组鸡AvBD6蛋白对上述细菌的最小抑菌浓度范围为31.25μg/mL～250μg/mL。此外,重组鸡AvBD6蛋白对温度和酸碱度有较高的稳定性。
- 韩宗玺廖文艳王瑞琴邵昱昊马得莹
- 关键词：遗传进化抗菌活性
- 鹌鹑β-防御素9重组蛋白的原核表达及其生物学特性的初步研究
- 本研究采用RT-PCR法,首次从鹌鹑肺脏和骨髓组织中扩增到一个新的鹌鹑β-防御素基因。经核苷酸序列测定,得到鹌鹑β-防御素cDNA的序列,由204个碱基组成,编码67个氨基酸残基,序列覆盖编码区全长,其中有8个带正电荷的...
- 王瑞琴蔺丽娟周财源韩宗玺邵昱昊刘胜旺马得莹
- 关键词：鹌鹑Β-防御素重组蛋白抗菌活性
- 文献传递
- 鹌鹑β- 防御素10基因的克隆与表达及其体内分布的检测被引量：3
- 2011年
- 为测定鹌鹑β-防御素10(AvBD10)体外抗菌活性及检测其在鹌鹑脏器组织的分布,本研究应用RT-PCR方法从鹌鹑肺脏组织中扩增到鹌鹑AvBD10,经序列同源性分析,鹌鹑AvBD10与鸡AvBD10的氨基酸序列同源性最高(83.8%)。将该基因亚克隆到表达载体pGEX-6p-1中进行原核表达,SDS-PAGE电泳表明,鹌鹑AvBD10重组蛋白分子量约为31ku。该重组蛋白经纯化后测定其体外抗菌活性,结果显示,鹌鹑AvBD10重组蛋白具有广谱的抗菌活性。采用定量RT-PCR法检测到AvBD10在鹌鹑脏器组织中广泛表达。
- 蔺利娟王瑞琴韩宗玺邵昱昊刘胜旺程宝晶孙黎李子瑞马得莹
- 关键词：鹌鹑重组蛋白抗菌活性
- 鹌鹑β-防御素10基因的克隆及其生物学作用的初步研究
- 本研究采用RT-PCR法,从80日龄鹌鹑肺脏组织中扩增到一个新的基因,经测序表明,该基因的cDNA片段为207bp,由68个氨基酸残基组成,分子内含有禽β-防御素的特征性氨基酸结构,经同源性分析,该基因与鸡β-防御素10...
- 蔺丽娟王瑞琴周财源韩宗玺邵昱昊刘胜旺马得莹
- 关键词：重组蛋白抗菌活性
- 文献传递
- 鸭β-防御素2基因的克隆、表达和表达产物的生物学特性分析被引量：12
- 2009年
- 【目的】从鸭组织中克隆鸭β-防御素(AvBD)2基因,在大肠杆菌中高效表达,检测重组鸭AvBD2蛋白的生物学特性。【方法】应用RT-PCR技术从鸭胰腺组织中扩增鸭AvBD2基因,根据已发现的禽β-防御素和部分哺乳类动物β-防御素-2的氨基酸序列构建系统进化树,将该基因克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1上进行原核表达,对该重组蛋白进行纯化,测定体外抗菌活性与理化特性。【结果】鸭胰腺组织中克隆出鸭AvBD2基因的cDNA大小为195bp,编码64个氨基酸。同源性分析表明,鸭AvBD2与其它物种AvBD2同源性较高。凝胶电泳结果显示重组鸭AvBD2蛋白在原核高效表达(分子量约为32kD),对多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌有较高抗菌活性,对大肠杆菌与猪霍乱沙门氏菌的抗菌活性较弱。重组鸭AvBD2蛋白对上述细菌的最小抑菌浓度为15.25～125μg·ml-1,对猪霍乱沙门氏菌最小抑菌浓度大于400μg·ml-1。重组鸭AvBD2蛋白在-20～100℃或pH3～12条件下处理30min后仍有抗金黄色葡萄球菌作用。【结论】克隆并表达了鸭AvBD2基因,表达产物具有抗菌活性,对温度和酸碱度有较高的稳定性。
- 王瑞琴廖文艳马得莹韩宗玺刘胜旺
- 关键词：遗传进化重组蛋白抗菌活性
- 天然抗菌剂鸭β－防御素2重组蛋白的制备方法
- 本发明提供了一种天然抗菌剂鸭β－防御素2重组蛋白的制备方法。本发明用分子生物学技术，从鸭体内克隆到鸭β－防御素(AvBD)2基因，选用合适的表达宿主在体外表达鸭AvBD2重组蛋白。进一步研究发现，鸭AvBD 2重组蛋白具...
- 马得莹王瑞琴刘胜旺廖文燕韩宗玺
- 文献传递
- 维生素抗冷应激的作用机制被引量：9
- 2009年
- 在寒冷气候条件下,动物容易产生冷应激反应,导致其生产性能、繁殖性能、饲料消化率、免疫功能及抗氧化功能等下降,增加饲养成本,降低养殖业的经济效益。维生素具有免疫促进与抗氧化作用,能提高动物的免疫功能与抗氧化功能,调节动物自身的防御机能,改善冷应激下动物的抗氧化功能及肉品质量,提高抗应激能力,减轻冷应激的危害,使动物处于良好的生理状态,发挥最大的生产潜能。
- 王瑞琴马得莹
- 关键词：冷应激维生素动物
- 鸭β-防御素10基因的克隆、遗传进化分析及其生物学特性的初步研究被引量：9
- 2009年
- 旨在从鸭肝脏组织中克隆鸭β-防御素10(AvBD10)基因,并在原核表达重组鸭AvBD10蛋白,研究重组鸭AvBD10蛋白的体外抗菌活性与理化特性。试验采用RT-PCR法,从鸭肝脏组织中扩增鸭AvBD10基因,测定该基因在鸭各组织器官中的分布;将鸭AvBD10基因克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1上,构建重组表达质粒pGEX-duck AvBD10,将重组质粒转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导表达;亲和层析纯化蛋白,利用薄层平皿琼脂糖孔穴扩散法测定重组鸭AvBD10蛋白的体外抗菌活性与理化特性。结果表明,鸭AvBD10 cDNA大小为169bp,编码55个氨基酸残基,与鸡AvBD10氨基酸同源性为85.5%。该基因仅在不同日龄鸭肝脏与肾脏组织中大量表达。重组鸭AvBD10融合蛋白的分子量约为30 ku,重组蛋白占菌体总蛋白的34%。重组鸭AvBD10蛋白对多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌有抗菌活性。结果,从鸭肝脏组织中扩增了鸭AvBD10基因,该基因仅在不同日龄鸭肝脏与肾脏组织中大量表达。重组鸭AvBD10融合蛋白具有广谱抗菌活性,该重组蛋白对温度和酸碱度有很高的稳定性。
- 廖文艳马得莹王瑞琴韩宗玺邵昙昊李慧昕刘胜旺
- 关键词：重组蛋白抗菌活性
- 鹌鹑β-防御素9重组蛋白的原核表达及其生物学特性的初步研究
- 王瑞琴
- 关键词：鹌鹑Β-防御素重组蛋白抗菌活性
