- Anxa11调控小鼠肝癌Hca-P细胞恶性行为及分子机制研究
- 背景：肝癌细胞淋巴道转移和耐药性是影响肝癌患者预后和生存的重要因素，其相应机制的研究可为其临床诊断和治疗提供依据。膜联蛋白A11（AnnexinA11，Anxa11）为膜联蛋白家族成员之一，是Ca2+依赖性磷脂结合蛋白。...
- 王嘉盛
- 关键词：淋巴道转移耐药性C-JUN
- 文献传递
- ANXA11表达稳定下调小鼠肝癌Hca-F细胞株的构建
- 2014年
- 目的:构建膜联蛋白A11(annexin A11,ANXA11)稳定下调的小鼠肝癌高淋巴转移力细胞株Hca-F。方法:合成2条针对ANXA11的发夹RNA(short-hairpin RNA,shRNA)序列shRNA1和shRNA2,连接到pGPU6/GFP/Neo质粒中,并转染到Hca-F细胞,获得了稳定转染的pGPU6/GFP/Neo-ANXA11-Hca-F细胞株。通过有限稀释法筛选单克隆细胞,并利用RT-PCR和蛋白质印迹法验证ANXA11的表达变化。结果:成功构建了pGPU6/GFP/Neo-ANXA11重组表达质粒,并筛选出单克隆细胞;RT-PCR及蛋白质印迹法检测结果表明,与空白对照组比较,重组质粒pGPU6/GFP/Neo-A11-Hca-F-1和2在mRNA水平,对ANXA11干扰率分别为(27.3±5.9)%和(58.3±12.4)%,P=0.001;在蛋白质水平,对ANXA11的下调率分别为(57.4±0.9)%和(87.1±6.1)%,P<0.001;shRNA-2对ANXA11的表达抑制效果更为显著,P<0.001。结论:成功建立了ANXA11表达稳定下调的小鼠肝癌Hca-F细胞株,为进一步研究ANXA11在淋巴转移中的作用奠定前期基础。
- 王嘉盛郭春梅刘淑清孙明忠唐建武
- 关键词：肿瘤淋巴转移HCA-FRNA干扰
- Anxall调控小鼠肝癌Hca-P细胞恶性行为及分子机制研究
- 背景:肝癌细胞淋巴道转移和耐药性是影响肝癌患者预后和生存的重要因素，其相应机制的研究可为其临床诊断和治疗提供依据。膜联蛋白A11(AnnexinA11，Anxa11)为膜联蛋白家族成员之一，是Ca2+依赖性磷脂结合蛋白。...
- 王嘉盛
- 关键词：淋巴道转移耐药性肝癌恶性行为分子机制
- 文献传递
- ANXA11表达稳定下调的肝癌Hca-P细胞株的建立
- 2013年
- 目的构建针对膜联蛋白A11(Annexin A11,ANXA11)的shRNA(small hairpin RNA),稳定转染小鼠低淋巴道转移力肝癌Hca-P细胞,筛选ANXA11稳定下调的单克隆细胞株,为后续研究奠定基础。方法合成2条ANXA11的shRNA序列(shRNA-1和-2),与真核表达载体pGPU6/GFP/Neo连接,构建pGPU6/GFP/Neo-shR-NA-ANXA11表达载体并转染Hca-P细胞,通过G418筛选及有限稀释法获得单克隆细胞株,Western blot检测Hca-P细胞ANXA11蛋白表达,并与空载体转染及对照组比较。结果成功构建了pGPU6/GFP/Neo-shRNA-ANXA11重组表达质粒,并获得pGPU6/GFP/Neo-shRNA-ANXA11-Hca-P单克隆细胞株;shRNA-1重组质粒的抑制效果在mRNA和蛋白水平对ANXA11抑制率分别为80.2%和77.7%,P<0.01。结论通过RNA干扰和基因转染技术成功建立了ANXA11表达稳定下调的Hca-P细胞株,得到了其单克隆细胞株,为进一步研究ANXA11在恶性肿瘤淋巴道转移中的作用及机制打下了基础。
- 王嘉盛刘淑清郭春梅孙明忠
- 关键词：淋巴道转移RNA干扰
