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赭曲霉毒素A模拟抗原表位及噬菌体展示酶联免疫吸附分析法的建立被引量：7: 2015年; 以驴抗鼠二抗包被微孔板,以捕获方式包被抗赭曲霉毒素A（OTA）单克隆抗体,利用噬菌体随机七肽库筛选OTA模拟抗原表位,并以其替代检测抗原,建立了基于噬菌体展示技术的酶联免疫吸附分析（Phage ELISA）检测OTA的方法。结果表明,筛选获得的模拟OTA抗原表位七肽氨基酸序列为GMSWMMA。基于模拟表位噬菌体建立的Phage ELISA方法半数抑制浓度（IC50值）为（0.15±0.02）ng/m L,检测OTA的线性范围为0.03~0.50 ng/m L,OTA的检出限为0.03 ng/m L,且Phage ELISA与其它4种常见真菌毒素（黄曲霉毒素B1、伏马毒素B1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇及玉米赤霉烯酮）无交叉反应。大米样品OTA加标实验表明,批內加标回收率为97.0%~115.2%,批间加标回收率为107.2%~123.1%,与ELISA试剂盒检测结果比较,无显著性差异。; 王吕熊斯诚邹旭强陈超超邵辉锋陈雪岚; 关键词：赭曲霉毒素A 噬菌体展示肽库模拟表位酶联免疫吸附法

水体中苯并芘检测试剂盒研制及效果评价被引量：6: 2016年; 目的研制间接竞争酶联免疫吸附法（ELISA）检测苯并芘试剂盒。方法采用棋盘滴定法确定抗原抗体的最佳用量;采用间接ELISA分析法确定苯并芘检测的最适条件,包括p H值、盐离子浓度及甲醇浓度。结果抗原最佳包被浓度为10μg/m L,单克隆抗体稀释倍数为1：5 000;在最优p H值为7.4、盐离子浓度为0.01 mol/L及甲醇浓度为10%的条件下,检测方法在5~50 ng/m L范围内线性相关,线性方程为y=-28.105 Ln（x）＋123.66,R2=0.9937,IC50为13.74 ng/m L,苯并芘的最低检出限为3.3 ng/m L;在水样中的加标回收率为94.8%~112.3%;变异系数为4.38%~9.72%。结论该方法适用于水体中苯并芘的检测,可用于大批量样品的快速筛查。; 陈超超邵辉峰王吕陈雪岚; 关键词：抗原抗体

钝齿棒杆菌FarR对精氨酸生物合成基因簇转录水平的影响及其与ArgR的关系被引量：2: 2014年; 【目的】FarR蛋白可参与棒杆菌精氨酸生物合成途径中相关基因的调控,但具体机制不清楚。本研究通过比较钝齿棒杆菌farR、argR单敲除株和farR与argR双敲除株Arg生物合成途径中相关基因转录水平的变化来揭示FarR蛋白功能及其与ArgR的内在关联性。【方法】采用无痕敲除方法构建了钝齿棒杆菌farR单敲除株和farR与argR双敲除株;采用荧光定量PCR方法分析了farR、argR敲除及其组合敲除后精氨酸生物合成途径相关基因在转录水平的变化。【结果】在ArgR蛋白缺失的情况下,FarR可能发挥正调控功能;在ArgR存在时,敲除farR,目标基因的转录水平改变存在不一致性,表现出上调、下调或无影响。【结论】钝齿棒杆菌中FarR和ArgR在精氨酸生物合成途径的调控中存在关联性。; 邵辉峰张斌王吕焦海涛汤立陈雪岚; 关键词：钝齿棒杆菌精氨酸荧光定量PCR

赭曲霉毒素模拟抗原表位及phageELISA的建立: 本研究以驴抗鼠二抗包被微孔板，然后进一步包被抗赭曲霉毒素A（OTA）单克隆抗体，利用噬菌体随机七肽库筛选赭曲霉毒素A模拟抗原表位，并以其替代检测抗原建立了phage ELISA检测OTA方法。实验结果显示筛选获得的OTA...; 王吕; 关键词：赭曲霉毒素A 噬菌体展示肽库模拟表位; 文献传递

人工抗原苯并芘的化学合成与分析被引量：3: 2014年; 以苯并芘(benzo(a)pyrene,BaP)为起始反应物,通过碘代、Heck偶联两步化学反应合成苯并芘的羰基衍生物,再经肟化反应将羰基羧基化,采用活化酯法将羧基化半抗原与载体蛋白(牛血清蛋白)进行偶联,制备苯并芘的人工抗原。采用红外光谱(infrared spectroscopy,IR)、核磁共振波谱(nuclear magnetic resonance spectrum,NMR)和质谱(mass spectrometer,MS)对苯并芘中间产物进行表征,并用紫外扫描的方法对人工抗原进行鉴定。本实验成功羧化了苯并芘,并成功构建人工抗原,苯并芘与载体蛋白的偶联比为28:1。; 王吕邵辉峰张斌陈雪岚; 关键词：半抗原人工抗原

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王吕