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弓形虫表面抗原SAG2基因的克隆表达纯化及鉴定被引量：1: 2015年; 目的构建弓形虫表面抗原2(SAG2)基因重组质粒并在大肠埃希菌中表达。方法根据SAG2基因序列设计并合成引物,用PCR法从弓形虫基因组DNA中扩增SAG2基因片段,再克隆到p GEX-4T载体中,构建重组质粒。重组质粒经酶切鉴定并测序后,在大肠埃希菌BL21中诱导表达,产物经SDS-PAGE分析并纯化,以Western blotting分析其反应原性。结果 SAG2基因PCR产物大小约为561 bp,与预期相符。重组质粒经酶切及PCR鉴定构建成功,测序结果与已知序列吻合。重组质粒转化菌经IPTG诱导后表达的SAG2融合蛋白分子量约为47 ku,该蛋白可被GST标签抗体识别。结论成功重组了弓形虫SAG2基因,表达蛋白具有反应原性。; 王卫艳李瑾魏庆宽贾凤菊肖婷徐超尹昆黄炳成; 关键词：刚地弓形虫基因克隆融合蛋白蛋白纯化

隧道L2TP技术在INTERNET网中的应用被引量：1: 2011年; 文章介绍了虚拟专用网VPN,着重对L2TP隧道技术及其在网络中的应用作了详细的讲解。; 王卫艳; 关键词：虚拟专用网VPN 隧道技术 L2TP

弓形虫SAG2、GRA6、GRA7基因的重组表达及应用研究: 研究背景与目的：弓形虫(Toxopasma gondii)是严重影响健康的机会致病原虫。能在人类与家畜之间传播，呈世界性分布。它可侵犯除健康成熟红细胞以外的有核细胞，引起多器官组织的病变。对于正常人群，机体免疫力正常，则...; 王卫艳; 关键词：弓形虫病抗原分子融合蛋白免疫学诊断 ELISA检测

刚地弓形虫致密颗粒蛋白GRA7基因的重组、表达及鉴定被引量：7: 2014年; 目的构建弓形虫致密颗粒蛋白7(GRA7)基因重组质粒并在大肠埃希菌中进行表达。方法根据GRA7基因序列设计合成引物,用PCR方法从弓形虫基因组DNA中扩增GRA7基因片段,再克隆到pGEX-4T载体中,重组质粒经酶切、PCR鉴定并测序;重组质粒在大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达,表达产物经SDS-PAGE分析并纯化,Western blot分析其反应原性。结果 GRA7基因PCR产物大小约为714bp,与预期相符;重组质粒经酶切及PCR鉴定构建成功,测序结果与已知序列吻合;重组质粒转化菌经IPTG诱导后表达的GRA7融合蛋白分子质量单位约为53ku,该蛋白可被His标签抗体识别。结论成功重组了弓形虫GRA7基因,表达蛋白具有反应原性,为弓形虫诊断抗原试剂盒的制备奠定了基础。; 张成芳李瑾张海国魏庆宽王卫艳肖婷徐超贾凤菊黄炳成; 关键词：弓形虫融合蛋白蛋白纯化

华为交换机号码变换的灵活应用: 2017年; CC08交换机是固定电话交换机中功能强大而完善的一种交换机,其中很多原理和应用在软交换中仍然延续。随着业务的发展,可通过号码变换改变号码显示方式和位数、改变计费方式、改变话单显示号码等,以满足电信网络灵活组网的要求和特殊用户的特定需求。日常维护中,交换机通过号码准备、主叫号码分析、号首处理、中继承载等实现号码变换。由于不同号码变换方法原理不同,对网络产生了不同程度的影响。如何灵活应用和掌握这些功能,是交换维护人员必备的条件。文章从号码变换原理、步骤、实例方面,全面阐述了号码变换的应用。; 王卫艳; 关键词：号码变换

应用重组抗原诊断弓形虫病的研究进展被引量：2: 2014年; 随着分子生物学的发展，对弓形虫重组抗原的研究取得了一系列的进展，多种弓形虫抗原基因通过基因工程手段得以表达并应用于弓形虫防治研究，这些抗原包括膜表面抗原（surface antigen，SAGs）、致密颗粒蛋白（dense granule proteins，GRAs）、棒状颗粒蛋白（rhoptry proteins，ROPs）、微线体蛋白（microneme proteins，MICs）以及基质抗原等。; 王卫艳黄炳成; 关键词：弓形虫病抗原诊断重组抗原致密颗粒蛋白分子生物学

弓形虫GRA6基因的重组、表达及鉴定被引量：3: 2015年; 目的构建弓形虫致密颗粒蛋白6(GRA6)基因重组质粒并在大肠埃希菌中进行表达。方法根据弓形虫GRA6基因序列设计并合成引物,用PCR方法从弓形虫基因组DNA中扩增GRA6基因片段,扩增产物经1.0%琼脂糖凝胶电泳鉴定后,再克隆到pGEX-4T载体中,重组质粒经限制性内切酶BamHI、EcoRI酶切鉴定并测序后,将重组质粒转化大肠埃希菌BL21后并用IPTG诱导表达,产物经SDS-PAGE分析并纯化,以Western blot分析其反应原性。结果以弓形虫DNA为模板扩增GRA6基因片段,经1%琼脂糖凝胶电泳鉴定扩增产物大小为693bp,与理论值相符;重组质粒经酶切鉴定构建成功,测序结果与GenBank上弓形虫RH株GRA6序列AF239283.1同源性100%;重组质粒转化菌经IPTG诱导后表达的GRA6融合蛋白分子质量单位约为52ku,与GST-GRA6的理论分子质量相符,该融合蛋白可被GST标签抗体识别。结论成功重组了弓形虫GRA6基因,表达蛋白具有反应原性,为弓形虫诊断抗原试剂盒的制备奠定了基础。; 李瑾魏庆宽贾凤菊徐超肖婷王卫艳尹昆刘功振黄炳成; 关键词：弓形虫基因克隆融合蛋白蛋白纯化

弓形虫联合重组诊断抗原的克隆与表达: 目的刚地弓形虫是一种世界性分布的感染率很高的专性胞内寄生虫,对于免疫力正常的人一般为隐性感染,而妊娠初期或免疫能力低下者,往往表现严重的弓形虫病。弓形虫的诊断对于控制弓形虫感染有重要意义,而其免疫学诊断的敏感性和特异性主...; 李瑾魏庆宽肖婷王卫艳徐超刘功振黄炳成; 关键词：弓形虫重组抗原克隆; 文献传递

巢式PCR技术在输入性卵形疟诊断中的应用研究被引量：12: 2015年; 目的应用巢式PCR扩增小亚单位核糖体核糖核酸(18S r RNA)基因确诊卵形疟原虫感染。方法采集2012-2013年山东省疟疾患者全血和滤纸血样,吉氏染色镜检观察血膜疟原虫形态并鉴定虫种。提取血样中DNA,根据疟原虫18S r RNA基因以属和种特异性引物进行巢式PCR扩增,筛查卵形疟阳性标本并进行测序验证。结果2012和2013年山东省共筛查到7例输入性卵形疟原虫感染病例。巢式PCR扩增7份血样均在800 bp处出现卵形疟原虫特异性单一条带,Blast比对表明产物序列与Gen Bank卵形疟参考序列一致。结论经巢式PCR方法确诊了2012和2013年山东省7例输入性卵形疟病例。; 黄炳成徐超李瑾肖婷尹昆刘功振王卫艳赵桂华魏艳彬王用斌赵长磊魏庆宽; 关键词：巢式PCR 输入性疟疾

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王卫艳