王华茂
- 作品数：27 被引量：18H指数：3
- 供职机构：上海市肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划上海市科学技术委员会资助项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 抗EGFRvⅢ/EGFR单抗9B9的制备和鉴定
- 2009年
- 目的:制备抗EGFRvⅢ/EGFR单克隆抗体,并探讨其对人肝癌细胞株Huh7-EGFRvⅢ和表皮癌细胞系A431裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法:将稳转细胞株3T3-EGFRvⅢ免疫BALB/c小鼠,免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,ELISA法筛选出EGFRvⅢ阳性的克隆株并命名为9B9。Western blotting和免疫荧光鉴定9B9抗体与EGFRvⅢ/EGFR抗原结合的特性。建立裸鼠人肝细胞癌和表皮细胞癌移植瘤模型,分别腹腔注射PBS、西妥昔单抗和9B9抗体,比较它们对各移植瘤模型的抑瘤效果。结果:通过杂交瘤制备单克隆抗体技术筛选获得一株单抗9B9,Western blotting和免疫荧光结果显示其既能识别EGFRvⅢ又能识别EGFR。9B9抗体和西妥昔单抗对人肝癌细胞Huh7-EGFRvⅢ移植瘤的抑瘤率分别46%和42%,对人表皮细胞癌移植瘤的抑瘤率分别为86%和85%。结论:制备获得的单克隆抗体9B9可显著抑制裸鼠人肝细胞癌以及表皮细胞癌移植瘤的生长,具有与西妥昔单抗相似的抑瘤效果。
- 高慧萍蒋华王华茂李宗海
- 关键词：表皮生长因子受体单克隆抗体肝肿瘤表皮肿瘤
- Hpd3cell、制备方法及其用于构建丝状噬菌体单链抗体库的用途
- 本发明提供了一种Hpd3cell细胞、制备方法和用途。Hpd3cell为含有缺乏基因III的辅助噬菌体基因组的F因子阳性细菌，菌种保藏编号为CGMCC2057。将编码scFv－pIII融合蛋白的噬菌粒转化Hpd3cell...
- 李宗海顾健人杨胜利石必枝王华茂蒋华
- 文献传递
- 免疫效应细胞及其应用
- 一种基因工程化的细胞，所述细胞表达结合抗原的外源性受体，并且表达提高的水平的RUNX3或者外源性的RUNX3。还提供所述细胞的用途以及治疗肿瘤的方法。
- 蒋华王华茂李宗海
- 文献传递
- 抗上皮细胞粘附分子和T细胞抗原的双特异性抗体
- 一种双特异性抗体，其包含(1)结合EpCAM的第一功能域，(2)结合CD3的第二功能域，以及(3)连接所述第一和第二功能域的接头，所述第一功能域包含至少一个轻链可变区和至少一个重链可变区，所述轻链可变区包含如下三个互补决...
- 李宗海张鹏飞石必枝王华茂高慧萍
- 文献传递
- 表皮生长因子受体变体Ⅲ(EGFRvⅢ)单克隆抗体的制备及用于肿瘤活体成像与肿瘤治疗
- 目的:制备抗EGFRvⅢ单克隆抗体,并探讨EGFRvⅢ单克隆抗体4H9在肿瘤活体荧光成像系统以及靶向肿瘤治疗中的运用。方法:建立EGFR高表达稳转NIH -3T3细胞系,做为抗原免疫小鼠,应用杂交瘤技术获得EGFR特异抗...
- 王华茂蒋华李宗海
- 关键词：单克隆抗体
- 文献传递
- Tie2介导的基因导入系统转导p53基因对肺癌的抑制作用被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨Tie2介导的基因导入系统体内靶向转导p53基因治疗肺癌的效果。方法:应用双功能交联剂SMCC将Tie2配体寡肽GA3与PEI连接构建靶向Tie2的基因载体。体外试验将GA3-PEI/luciferase导入Tie2表达阳性的SPC-A1肺癌细胞与Tie2表达阴性的SMMC7721肝癌细胞中,24 h后检测luciferase活性。体内导入试验将GA3-PEI/β-gal复合物注射SPC-A1细胞裸鼠种植瘤周围皮下,同时设立PEI/β-gal组为对照;24 h后牺牲裸鼠,检测心、肝、脾、肺、肾和瘤体的β-gal表达。另外将另一批四周龄SPC-A1肺癌种植瘤裸鼠随机分为5组:(1)NS;(2)GA3;(3)p53;(4)PEI/p53;(5)GA3-PEI/p53;每组6只;皮下注射GA3-PEI/p53基因复合物,隔2天1次,并测量肿瘤长短径,计算瘤体积及抑瘤率。结果:GA3-PEI/luciferase组的luciferase活性在SPC-A1细胞中明显高于SMMC7721细胞(P<0.05)。在种植瘤中可见较多蓝染细胞,心、肝、脾、肾组织中几乎不见篮染,肺支气管黏膜除外。与对照组比较,GA3-PEI/p53治疗组对肿瘤生长有明显抑制作用(P<0.05),其抑瘤率为61.29%。结论:GA3基因导入系统靶向转导p53基因,显著抑制肿瘤生长。
- 吴向华李宗海王华茂李锦军姚明陈宪莲曲淑敏徐宇虹顾健人
- 关键词：基因疗法基因P53TIE-2
- 抗GRP78单克隆抗体的制备及初步鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的:原核表达GRP78并制备抗GRP78的特异性单克隆抗体(mAb),并初步鉴定相应mAb的特性。方法:从肺癌患者组织中抽提总RNA,RT-PCR获得grp78全长基因,并通过原核重组表达GRP78蛋白;以纯化的GRP78蛋白免疫BALB/c小鼠,成功免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤Sp2/0细胞融合,筛选得到分泌特异性抗GRP78的mAb的杂交瘤细胞株;并通过Western blot及免疫组化初步鉴定其特异性。结果:成功构建重组表达质粒PET-28a-grp78并由大肠杆菌表达获得GRP78蛋白,被该蛋白免疫的BALB/c小鼠与Sp2/0细胞融合、筛选,获得3株稳定分泌抗GRP78抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2A1、4B8和4A12。采用其中1株4A12 mAb对3个肺癌患者组织样本进行Western blot检测以及免疫组化分析,结果均显示4A12 mAb能够特异识别肺癌组织表达的GRP78。结论:成功制备了抗GRP78的mAb,并能够特异识别肺癌组织表达的GRP78,为进一步研究GRP78在肿瘤治疗中的作用提供基础。
- 高慧萍俞菁余君铭孔洁张翠珍王华茂龚波
- 关键词：GRP78杂交瘤单克隆抗体
- 酪氨酸蛋白激酶受体EphA2及其配体EFNA1在23种肿瘤细胞系中的表达及其意义被引量：6
- 2007年
- 背景与目的:酪氨酸蛋白激酶受体EphA2及其配体EFNA1可能在肿瘤的发生发展过程中起着重要的作用。本研究探讨EphA2/EFNA1在不同肿瘤细胞中的表达及其意义。方法:用RT-PCR方法,检测了23种人类肿瘤细胞系中EphA2/EFNA1在mRNA水平上的表达。并用Western blot方法检测了EphA2蛋白在不同肿瘤细胞系中的表达水平。结果:RT-PCR结果显示,除白血病细胞K562和HL60,以及视网膜母细胞瘤RB几乎检测不到EphA2/EFNA1外,EphA2/EFNA1高表达于肝癌、肺癌、卵巢癌、宫颈癌、前列腺癌、胃腺癌、脑胶质瘤、膀胱癌、成骨肉瘤及恶性黑色素瘤等20种细胞系中。Western blot结果显示,除K562外,EphA2蛋白在不同肿瘤细胞系中均有表达。结论:EphA2/EFNA1高表达于人类多种肿瘤细胞中,并且EFNA1的表达水平相对低于EphA2的表达。E-phA2/EFNA1可作为一个较为广谱的肿瘤标记,并有可能成为肿瘤治疗的靶点。
- 赵瑞皎吴向华石必枝王华茂李宗海
- 关键词：肿瘤标记肿瘤细胞系
- 表达IL-21R结合蛋白的免疫效应细胞
- 本发明涉及一种细胞，其中所述细胞表达特异性结合靶抗原的外源性受体和外源性IL‑21R结合蛋白，所述外源性IL‑21R结合蛋白能特异性结合IL‑21R且增强IL‑21R的活性，所述靶抗原包括肿瘤抗原或病原体抗原。
- 蒋华王华茂李宗海
- 文献传递
- 表皮生长因子受体模拟表位肽及其应用
- 本发明涉及表皮生长因子受体模拟表位肽及其应用，所述的模拟表位肽能够竞争性地结合抗EGFR的抗体，显示了模拟表位在生物学及结构上同自然表位相近。本发明的模拟表位肽有利于在动物体内大量产生特异性抗体，克服了天然肽表位免疫原性...
- 李宗海杨麟王华茂王海蒋华石必枝
- 文献传递
