王冰晶
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 供职机构：北京大学临床肿瘤学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Snail/GST融合蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备被引量：2
- 2006年
- 张儒英云昆仑乔惠珍王冰晶张志谦
- 关键词：SNAIL融合蛋白多克隆抗体
- α-catenin/GST融合蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备被引量：2
- 2001年
- 目的 制备α catenin多克隆抗体 ,为深入研究其功能和探讨其与肿瘤等疾病的相关性提供工具。方法 PCR扩增编码人α cateninC 端 45 5个氨基酸的DNA片段 ,DNA重组入原核表达质粒pGEX 4T 3,转化大肠杆菌JM10 9菌株 ,异丙基 β D硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导产生GST α catenin融合蛋白。GST Sepharose亲和层析纯化可溶性融合蛋白 ,免疫新西兰白兔 ,制备抗血清。通过ELISA、免疫荧光细胞化学和SP免疫组织化学法鉴定血清特异性和效价。 结果 成功地构建了pGEX 4T 3 α Cat表达载体 ,转化JM10 9后可高效表达融合蛋白GST α catenin(α Cat)。免疫兔产生的α Cat多抗可特异检测人体组织和细胞中α Cat表达及定位情况。 结论 α catenin抗体效价高 ,特异性强 ,适合免疫组织化学。
- 马忠良王冰晶林仲翔林本耀张志谦
- 关键词：Α-CATENIN融合蛋白多克隆抗体GST
- GST-snail融合蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备
- 2006年
- 目的制备snail多克隆抗体,为深入研究其功能和探讨其与肿瘤等疾病的相关性提供工具。方法PCR扩增编码人snail 264个氨基酸的cDNA全长片段,DNA重组入原核表达质粒pGEX-4T-1,转化大肠杆菌BL21菌株,异丙基--βD-硫代半糖苷(IPTG)诱导表达GST/Snail融合蛋白。经电泳纯化的融合蛋白免疫新西兰白兔,制备抗血清。通过ELISA、免疫荧光和免疫印迹法鉴定血清特异性和效价。结果成功构建了pGEX-4T-1/snail原核表达载体,转化BL21后可高效表达融合蛋白GST-snail,免疫产生的snail多抗可特异检测snail真核表达载体转染COS-7细胞后snail的表达及定位情况。结论获得了效价和特异性都良好的snail抗体,适合对snail的检测应用。
- 王冰晶张志谦
- 关键词：SNAIL融合蛋白多克隆抗体免疫荧光染色免疫印迹法
- 自发永生性转化人胚肺上皮细胞系HLEC的建立及鉴定被引量：1
- 2005年
- 目的 对源自人胚肺组织原代培养、形态似上皮类型的细胞系———人肺上皮细胞(HLEC)的生物学特 性进行鉴定,为相关研究和应用提供模型和依据。 方法 分别采用相差显微镜下观察、细胞计数、β 半乳糖苷酶 染色、免疫荧光细胞化学。人Alu序列PCR扩增、染色体计数、软琼脂集落形成实验和裸鼠致瘤实验对HLEC的形 态学特征、生长特性、衰老状态、上皮细胞标志物、来源、细胞遗传学特点和恶性转化等生物学特性进行研究鉴定。 结果 HLEC角蛋白和上皮型细胞间黏附分子钙黏着素E cadherin免疫荧光染色阳性,染色体众数在41～44,人 Alu序列PCR扩增结果阳性,β 半乳糖苷酶阳性细胞的比例未见随细胞代数的增加而升高,软琼脂和裸鼠体内均不 生长,微丝及黏着斑结构正常。 结论 HLEC细胞具有永生化细胞特征、属相对正常人肺上皮亚二倍体细胞,可 用于肺癌癌变机理研究和癌细胞的相对正常对照。
- 张志谦胡颖王冰晶赵威林仲翔
- 关键词：人肺上皮细胞角蛋白
