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同型半胱氨酸对人外周血内皮祖细胞功能的影响被引量：3: 2014年; 【目的】探讨同型半胱氨酸(Hcy)对外周血内皮祖细胞(EPC)迁移、粘附能力的影响。【方法】密度梯度离心法获取单个核细胞,接种于铺有人纤维连接蛋白包被的培养皿,培养7 d后免疫荧光鉴定EPC。实验分对照组(Control,CT)、50μmol/L腺苷(adenosine,Ade)组(A50)、50μmol/L Hcy组(H50)、50μmol/L Hcy+50μmol/L Ade组(A50+H50)和50μmol/L Hcy+50μmol/L Ade+10 ng/mL血管内皮生长因子(VEGF)组(A50+H50+VEGF),不同给药组处理后检测内皮祖细胞迁移、粘附功能。各项实验都至少重复3次。【结果】Dil-acLDL(红色)和FITC-lectin(绿色)染色双阳性的细胞可鉴定为EPC。与CT组相比,Hcy、Ade可抑制EPC细胞的迁移(P<0.05);Hcy、Ade还可抑制EPC细胞粘附到纤维连接蛋白及脐静脉内皮细胞(HUVEC)(P<0.05)。与Hcy、Ade组相比,Hcy联合Ade可进一步显著抑制EPC细胞的迁移和粘附功能(P<0.05)。加入VEGF可显著增加EPC细胞的迁移及粘附功能(P<0.05)。【结论】Hcy可显著抑制EPC的迁移粘附能力,加入VEGF后可明显改善这种抑制效应。; 娄晓盈张泉曹露牟娜娜谭红梅; 关键词：同型半胱氨酸内皮祖细胞细胞迁移细胞粘附

叶酸抑制同型半胱氨酸诱导的人肾脏系膜细胞增殖被引量：6: 2013年; 目的观察叶酸对同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)诱导的人肾脏系膜细胞增殖作用的影响及其可能机制。方法人肾脏系膜细胞采用含5%胎牛血清的RPMI1640培养,采用不同浓度Hcy(200、400、600、800、1 000μmol/L)处理细胞,MTT法观察Hcy对人肾脏系膜细胞增殖的影响。选取理想的Hcy浓度,加入不同浓度叶酸(50、100、200、400μmol/L)处理细胞,观察叶酸对细胞增殖的干预作用。相同方法处理细胞后提取总蛋白,Western blot检测转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)和细胞外调节蛋白激酶(extracellularregulated protein kinases,ERK)表达。结果 Hcy能诱导人肾脏系膜细胞的增殖,促进TGF-β和ERK蛋白表达,呈现剂量依赖性。叶酸干预后能抑制Hcy诱导的细胞增殖,下调TGF-β和ERK蛋白表达。结论叶酸能抑制Hcy诱导的人肾脏系膜细胞增殖,可能与抑制TGF-β和ERK蛋白表达有关。; 曹露娄晓盈牟娜娜张泉谭红梅; 关键词：同型半胱氨酸叶酸转化生长因子-Β 细胞外调节蛋白激酶

LPS激活巨噬细胞NLRP3炎性小体的作用研究被引量：9: 2015年; 目的探讨脂多糖(LPS)激活巨噬细胞NLRP3炎性小体的作用。方法用佛波酯诱导人单核细胞(THP-1)分化为巨噬细胞。实验分为对照组、LPS组、LPS+NLRP3 si RNA组、LPS+Scrambled si RNA组。采用免疫荧光染色检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族pyrin结构域蛋白3(NLRP3)和凋亡相关斑点样蛋白ASC的共定位、Western blotting检测NLRP3蛋白的表达、ELISA检测细胞培养上清白介素1β(IL-1β)的浓度。结果与对照组相比,NLRP3和ASC蛋白的共定位明显增多,LPS组NLRP3蛋白的表达增强。LPS还能使细胞培养上清IL-1β的浓度显著升高,NLRP3 si RNA干扰后细胞培养上清IL-1β的浓度显著降低。结论LPS可以促进炎性小体成分NLRP3、ASC的表达,激活NLRP3炎性小体,刺激巨噬细胞分泌炎症因子IL-1β。; 牟娜娜娄晓盈王仁庆谭红梅; 关键词：脂多糖巨噬细胞 NLRP3 IL-1Β

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牟娜娜