牛晨晨
- 作品数:10 被引量:18H指数:3
- 供职机构:首都医科大学更多>>
- 发文基金:北京市自然科学基金国家自然科学基金北京市教委科技发展计划更多>>
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- 重复性低氧增高小鼠脑组织内CREB的磷酸化水平
- 2006年
- 目的:初步探讨cAMP反应元件结合蛋白(C砌强)在小鼠脑低氧预适应形成过程中的作用。方法:用我室已建立的小鼠整体低氧预适应模型,应用SDS.PAGE和Westernblot等技术,并结合Gel Doc凝胶成像系统,定量检测小鼠脑组织内CREB的磷酸化水平和蛋白表达量。结果:①随低氧暴露次数(H1.H4)的增加,小鼠海马组织内CREB的磷酸化水平(激活程度)明显增高(*p<0.05;n=7);大脑皮层内CREB的磷酸化水平也随低氧暴露次数(H1.H4)的增加而明显增高,且在H1.H4组的变化具有显著的统计学意义(*p<O.05,n=7)。②随低氧暴露次数(H1.H4)的增加,CREB的蛋白表达量无论在小鼠海马还是皮层组织内均无明显改变。结论:CREB磷酸化水平的增高(激活)可能参与了脑低氧预适应的形成过程。
- 高亚南高歌龙彩瑕牛晨晨徐群渊李俊发
- 关键词:脑低氧预适应CREB磷酸化
- 重复性低氧对小鼠脑组织MMP-2及MMP-9含量与活性的影响被引量:2
- 2006年
- 目的:探讨重复性低氧对小鼠脑组织内MMP-2和MMP-9的蛋白表达量及活性的变化。方法:将BALA/C小鼠随机分成常氧对照组(I加)、急性低氧1、2、3、4次组(H1~H4)共5组。应用SDS-PAGE、Western—blot等生化技术,并结合Gel Doc凝胶成像系统,半定量检测5组小鼠大脑皮层和海马组织内MMP-2及MMP-9的蛋白表达量及其活性的变化。结果:①随着低氧次数的增加,小鼠海马组织内MMP-2的蛋白表达量呈现先增后降的趋势,其中H4组MMP-2蛋白表达量的降低显著(P〈0.05,n=6),而小鼠大脑皮层组织内MMP-2的蛋白表达量变化不明显。此外,在海马和大脑皮层组织内均未检测到MMP-2的活性组分;②海马组织内MMP-9的蛋白表达量随重复性低氧次数的增加,其含量也呈现先增后降的趋势,且H1组MMP-9表达量的增高和H4组MMP-9表达量的降低均具有显著意义(P〈0.05)。同样,海马组织内MMP-9活性组分的变化与其蛋白表达量变化趋势一致,与H0组相比.H1组MMP-9活性组分增高和H4组的降低均显著(P〈0.05)。大脑皮层组织内MMP-9表达量及其活性组分在脑低氧预处理过程中均无显著性变化。结论:MMP-2和MMP-9可能在脑低氧预处理过程中具有一定的作用.且提示其蛋白表达量及活性在大脑皮层和海马组织内的差异变化可能与大脑皮层和海马组织对低氧的选择易损性不同有关。
- 崔秀玉李俊发牛晨晨韩松
- 关键词:低氧预处理大脑皮层
- 持续性低氧环境下人神经母细胞瘤细胞内经典型蛋白激酶C各亚型的膜转位现象(英文)
- 2005年
- 背景:蛋白激酶C家族有3组,经典型蛋白激酶C及非典型蛋白激酶C和新奇型蛋白激酶C。一些实验证实在低氧环境中,蛋白激酶C家族在脑缺血低氧预刺激中发挥了重要作用。目的:建立细胞缺氧模型,观察在细胞水平上低氧激活经典型蛋白激酶C各亚型(α,βⅠ,βⅡ,γ)膜转位现象的影响。设计:以细胞为对象,随机区组设计。单位:首都医科大学基础医学院神经生物学系。材料:实验于2004-05在首都医科大学神经生物学系细胞培养室完成。由本实验室培养的传代细胞,具有神经元特性的人神经母细胞瘤细胞系。方法:应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和经典型蛋白激酶C蛋白印迹分析和免疫细胞化学等生化技术,观察培养的细胞经过0~24h不同时间段,低氧环境为体积分数0.01的氧气,体积分数0.05的二氧化碳,体积分数0.94的氮气,对人神经母细胞瘤细胞内经典型蛋白激酶C-α及βⅠ和βⅡ细胞膜转位水平的影响。主要观察指标:①观察持续低氧对人神经母细胞瘤细胞内经典型蛋白激酶C膜转位影响采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和经典型蛋白激酶C蛋白印迹分析检测。②观察持续低氧对人神经母细胞瘤细胞内经典型蛋白激酶C膜转位影响采用免疫细胞化学方法检测。结果:①经典型蛋白激酶C-α及βⅠ和βⅡ细胞膜转位水平均随持续性低氧时间的延长而明显增高(P<0.05),尤以经典型蛋白激酶C-βⅠ亚型在持续性低氧4h后的增高最为显著(P<0.001)。②无论在常氧还是在持续性低氧状态下,在人神经母细胞瘤细胞内均未检测到经典型蛋白激酶C-γ亚型的蛋白表达。应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和经典型蛋白激酶C蛋白印迹分析和免疫细胞化学实验检测的结果均一致。结论:①在持续低氧的条件下存在于人神经母细胞瘤细胞内经典型蛋白激酶C-α及βⅠ和βⅡ亚�
- 祖鹏宇李俊发韩松曲彦明李华牛晨晨徐群渊
- 关键词:低氧蛋白激酶C
- 重复性低氧增高小鼠脑组织内CREB的磷酸化水平
- 2006年
- 为探讨cAMP反应元件结合蛋白(CREB)在小鼠脑低氧预适应形成过程中的作用,本研究应用Westernblot技术结合GelDoc凝胶成像系统,半定量检测了整体低氧预适应模型小鼠脑组织内CREB的磷酸化水平和非磷酸化水平的表达水平。结果显示:(1)随低氧暴露次数(H1H4)的增加,小鼠海马组织内CREB的磷酸化水平(激活程度)明显增高(P<0.05;n=7);同样,大脑皮层内CREB的磷酸化水平也随低氧暴露次数(H1H4)的增加而明显增高(P<0.05,n=7);(2)随低氧暴露次数(H1H4)的增加,CREB的蛋白表达量无论在小鼠海马组织还是皮层组织内均无明显变化。以上结果提示CREB磷酸化水平的增高(激活)可能参与了脑低氧预适应的形成过程。
- 高亚南高歌龙彩瑕牛晨晨徐群渊李俊发
- 关键词:脑低氧预适应CREB磷酸化大脑皮层
- 重复低氧对小鼠脑内cPKCα和γ膜转位及蛋白表达的影响被引量:6
- 2005年
- 探讨cPKCs特定亚型在脑低氧预适应形成过程中的作用 ,借助已建立的小鼠整体低氧预适应模型 ,应用SDS PAGE和Westernblot等生化技术 ,并结合GelDoc成像系统 ,半定量检测脑组织内cPKCα和γ的膜转位水平和蛋白表达量。结果发现 ,随低氧暴露次数 (低氧 2~ 4次 )增加 ,在小鼠海马和皮层组织内cPKCγ膜转位水平增高显著(P <0.0 5 ,n =6 ) ;然而 ,cPKCα的膜转位水平和cPKCγ及γ的蛋白表达量的变化均不显著。提示 。
- 牛晨晨李俊发徐群渊
- 关键词:PKCΓ蛋白表达小鼠脑内转位
- 低氧预适应升高小鼠脑内JNK磷酸化水平和蛋白表达被引量:4
- 2006年
- 目的探讨C-JUN氨基末端激酶或应激激活蛋白激酶(JNKs/SAPKs)在脑低氧预适应发生、发展过程中的作用。方法将小鼠整体低氧预适应模型中BALB/C小鼠随机分为正常对照(H0)、早期(H1-H4组)和延迟性(H5-H6组)低氧预适应等7组。应用SDS-PAGE和Western bolt方法,并结合GelDoc凝胶成像系统,半定量检测大脑皮层和海马组织内JNK1和JNK2/3的磷酸化水平及其蛋白表达量的变化。结果在早期低氧预适应形成过程中,随低氧次数的增加,小鼠大脑皮层和海马组织内JNK1的磷酸化水平(未检测到磷酸化的JNK2/3)逐渐升高,且以皮层内(H1和H2组)和海马组织内(H1—H4组)的增高明显(P〈0.05,n=6);而JNK1和JNK2/3只在延迟性低氧预适应(H5-H6组)发展过程中明显上调(P〈0.05,n=6)。结论JNK1的激活以及JNK1和JNK2/3蛋白表达量的增高可能分别参与了脑早期低氧预适应和晚期延迟性低氧预适应的发生和发展。
- 高歌龙彩瑕高亚南牛晨晨徐群渊李俊发
- 关键词:脑低氧预适应JNK蛋白表达量
- 重复性低氧对小鼠脑组织内cPKC亚型特异性膜转位和蛋白表达量的影响
- 本文在小鼠整体低氧预适应模型上系统地研究了经典型PKC(cPKCs)α、βⅠ、βⅡ和γ等四个亚型在脑I/HPC发生发展过程中膜转位水平(激活程度)、蛋白表达量和神经细胞内分布情况的变化.旨在对cPKC特定亚型在脑I/HP...
- 牛晨晨
- 关键词:脑低氧预适应膜转位蛋白表达量脑组织
- 文献传递
- 延迟性低氧预适应降低小鼠脑皮质cPKCγ蛋白表达被引量:1
- 2006年
- 目的探讨cPKCα和γ膜转位水平及蛋白表达量在延迟性脑低氧预适应形成过程中的变化。方法应用SDS-PAGE和Western bolt等技术,并结合Gel Doc凝胶成像系统,半定量检测延迟性脑低氧预适应小鼠(H5和H6组)脑组织内cPKCα和γ的膜转位水平及蛋白表达量。结果延迟性低氧预适应(H5和H6组)明显降低小鼠脑皮质组织内cPKCγ蛋白表达量(P<0.05),而膜转位(活性)水平变化不显著。对海马cPKCγ、大脑皮质和海马cPKCα蛋白表达量及膜转位水平的影响均不显著。结论大脑皮质cPKCγ蛋白表达量的改变可能参与延迟性脑低氧预适应形成,且可能与皮质和海马低氧选择易损性的差异有关。
- 韩松牛晨晨李俊发
- 关键词:脑低氧预适应膜转位蛋白表达量
- 低氧预适应小鼠脑内ERK1/2磷酸化水平和蛋白表达量的改变被引量:5
- 2006年
- 目的:初步探讨细胞外信号调节激酶(Extracellularsignal-regulatedkinases,ERK1/2)在脑低氧预适应发生发展过程中的作用。方法:按已建小鼠整体低氧预适应模型,将BALB/C小鼠(18~22g,雌雄不限)随机分为正常对照(H0)、早期(H1-H4)和延迟性(H5-H6)低氧预适应等7组(每组至少6只动物)。应用SDS-PAGE和Westernblot等生化技术,并结合GelDoc凝胶成像系统,半定量检测小鼠脑组织内ERK1/2的磷酸化水平和蛋白表达量。结果:①早期低氧预适应形成过程中,随低氧暴露次数的增加(H1-H4),小鼠海马和皮层组织内ERK1/2磷酸化水平显著降低(P<0.05,n=6),而ERK1/2蛋白表达量并无显著变化;②延迟性低氧预适应中(H5-H6),小鼠大脑皮层和海马组织内ERK1/2的蛋白表达量显著降低(P<0.05,n=6)。结论:ERK1/2的活性降低(磷酸化水平降低),以及ERK1/2蛋白表达量下调可能分别参与了脑早期低氧预适应和晚期延迟性低氧预适应的发生发展过程。
- 龙彩瑕高亚南高歌牛晨晨徐群渊李俊发
- 关键词:脑低氧预适应ERK1/2磷酸化水平蛋白表达量
- 重复性低氧增高小鼠脑组织内CREB的磷酸化水平
- 目的:初步探讨cAMP反应元件结合蛋白(CREB)在小鼠脑低氧预适应形成过程中的作用。方法:用我室已建立的小鼠整体低氧预适应模型,应用SDS-PAGE和Western blot等技术,并结合Gel Doc凝胶成像系统,定...
- 高亚南高歌龙彩瑕牛晨晨徐群渊李俊发
- 关键词:脑低氧预适应CREB磷酸化蛋白表达量脑组织
- 文献传递