潘宇
- 作品数:18 被引量:25H指数:3
- 供职机构:广东省人民医院(广东省医学科学院)更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 心脏干细胞可通过旁分泌exosome作用于心肌细胞
- 肖静潘宇李晓红吴岳恒姜霖杨翔宇余细勇
- 靶向干扰细胞周期检验点激酶2增强5-氟尿嘧啶对鼻咽癌细胞SUNE-1的毒性作用研究
- 2012年
- 目的探讨靶向抑制细胞周期检验点激酶2(Chk2)对5-氟尿嘧啶(5-FU)抗鼻咽癌鳞状上皮细胞SUNE-1的增敏作用。方法根据Chk2基因设计siRNA干扰序列,在mRNA和蛋白水平检测其干扰效果;通过细胞生长曲线观察Chk2siRNA对SUNE-1细胞增殖能力的影响;通过细胞毒性试验检测Chk2siRNA是否影响SUNE-1细胞对代谢类抗肿瘤药5-FU的敏感性;采用AnnexinV/PI双染方法检测细胞凋亡的变化情况。结果所采用的siRNA在mRNA和蛋白水平均显著降低SUNE-1细胞中Chk2表达,验证了该siRNA的干扰效果;Chk2siRNA对SUNE-1细胞增殖能力无显著影响,但能显著增强5-Fu的细胞毒作用(P〈0.05);细胞凋亡检测结果显示,Chk2siRNA显著增加5-FU引起的SUNE-1细胞凋亡水平。结论尽管Chk2对SUNE-1细胞生存和增殖不发挥关键作用,但在5-Fu引起的细胞损伤中对细胞起保护作用,该作用与其抑制5-FU引起的细胞凋亡有关,因此Chk2可成为在鼻咽癌治疗中增强5-FU的疗效的靶点。
- 潘宇蔡飒朱杰宁林秋熊余细勇
- 关键词:抗肿瘤药鼻咽癌5-氟尿嘧啶RNA干扰
- 孕期吸烟对SD大鼠胚胎心脏发育的影响被引量:1
- 2014年
- 目的探讨孕期吸烟对SD大鼠胚胎心脏发育的影响及分子机制。方法将24只怀孕SD母鼠随机分为4组:正常对照组、10支烟/d组、20支烟/d组、40支烟/d组,每组6只,并于孕期0.5 d(GD 0.5)后开始给予吸烟处理直至分娩。采用超声多普勒Vevo2000检测出生后1 d的新生乳鼠的左心结构及其心脏功能;采用Color-Doppler检测心室血流方向,以确认室间隔的发育是否异常。心功能检测完毕后,收集各组新生乳鼠心脏组织,采用Western-blot检测心肌特异转录因子GATA4的表达量。结果各组新生乳鼠心脏重量无明显差异,40支烟/d处理组乳鼠体重显著下降,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.001)。孕期持续给予40支烟/d被动吸烟处理能显著降低左心室重量、左心室舒张/收缩末期前壁厚度和左心室舒张/收缩末期后壁厚度,差异均有统计学意义(P<0.05)。孕期给予20支烟/d和40支烟/d处理后,新生乳鼠的GATA4蛋白表达呈剂量依赖性下调,40支烟/d组与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论母鼠在怀孕期间接受被动吸烟后,引发后代新生乳鼠的心功能受损,其机制可能与下调心肌特异转录因子GATA4表达相关。
- 叶力通江雪燕张梦珍潘宇林秋雄单志新姜霖陈瑶余细勇
- 关键词:孕期吸烟心脏发育GATA4
- 成年大鼠骨骼肌干细胞的制备与新型培养方法被引量:3
- 2013年
- 目的:建立高效分离和扩增成年大鼠骨骼肌干细胞的实验方法。方法:通过混合酶消化法从少量成年大鼠骨骼肌样品中分离出骨骼肌干细胞;采用悬浮培养法培养获得骨骼肌干细胞团,批量扩增骨骼肌干细胞;用qRT-PCR和免疫细胞化学染色检测干细胞标志物Nanog、Oct4和骨骼肌干细胞标志物肌源性因子5(myogenic factor 5,Myf5)、配对盒蛋白7(paired box protein 7,Pax7)的表达;成脂或成骨分化诱导培养基诱导检测骨骼肌干细胞的多功能性。结果:采用混合酶消化法可获得骨骼肌干细胞单细胞,在悬浮的培养条件下能快速克隆成骨骼肌细胞团,贴壁培养后能看到骨骼肌干细胞从细胞团中爬出来,和传统的差速贴壁方法相比悬浮培养法获得的骨骼肌干细胞纯度更高,细胞状态更好,干性因子Nanog、Oct 4和骨骼肌干细胞标志物Myf5、Pax 7的表达更高(P<0.05);在不同培养基的诱导下能向骨骼肌、成骨和脂肪细胞系分化。结论:悬浮培养法能获得大批量干性好、纯度高、具有多向分化潜能的骨骼肌干细胞,从而为肌肉相关疾病的细胞治疗提供优良的种子细胞。
- 黄郁凯李晓红潘宇林秋雄朱杰宁江雪燕叶力通余细勇
- 关键词:成年大鼠骨骼肌干细胞
- 通过调控表观遗传修饰以提高细胞再程序化效率的研究进展
- 2015年
- 机体发育过程中,干细胞通过程序性分化过程产生具有特定形态和功能的体细胞.细胞再程序化是通过外源性导入转录因子等方法,使之重新获得分化前的多能性(即去分化)或改变其特性进而转变为另一种组织细胞(即转分化)[1].通过转染4种转录因子(Oct4、Sox2、c-Myc和Klf4,OSKM),可诱导成纤维细胞再程序化为具有胚胎干细胞特性的诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)[2].
- 谢欣彤吴漫茵林瑶蔡飒潘宇付小兵
- 关键词:表观遗传修饰体细胞多能干细胞分化过程C-MYC
- 干细胞:许旺细胞的新来源被引量:1
- 2012年
- 背景:许旺细胞对神经系统损伤的修复与再生有着重要作用。然而,许旺细胞不易直接获取,使其在临床上的应用受到限制。目的:综述神经损伤及修复过程、许旺细胞的作用以及各种干细胞分化为许旺细胞的潜能。方法:使用计算机检索Pubmed数据库2000/2011有关许旺细胞参与神经损伤的修复、干细胞分化为许旺细胞验证及应用的文献,检索词为"Schwann cells,nervous system,stem cells"。排除重复性研究,对资料进行初审,并查看每篇文献及其引文。根据纳入标准,收集到29篇相关文献。结果与结论:许旺细胞通过分泌各种细胞因子和营养因子为受损的神经营造了适于修复与再生的微环境,从而促进轴突再生;同时通过增殖及分化等机制围绕新生轴突形成髓鞘。神经修复需要大量许旺细胞的参与,而许旺细胞不易直接获取。研究表明,各种干细胞,包括胚胎干细胞、间充质干细胞、神经嵴干细胞和嗅鞘细胞,能在一定诱导条件下分化为许旺细胞样细胞,为神经系统损伤的治疗带来了新的希望。其中,间充质干细胞的研究备受关注。
- 赵安东蔡飒吕艳思潘宇林慧婷
- 关键词:许旺细胞神经系统干细胞
- 聚乙烯亚胺-蛋白纳米复合体转染蛋白进入骨髓间充质干细胞的应用研究被引量:3
- 2015年
- 目的:探索纳米材料聚乙烯亚胺(PEI)携载不同分子量的蛋白质转染进人骨髓间充质干细胞(h BMSCs)的作用及优化其最佳配比条件。方法:利用物理化学作用构建6组PEI-DNase I(DNA酶I)复合体,运用激光散射技术初步摸索其最佳摩尔比,用透射电镜直观复原纳米-蛋白复合体外貌;同时,原代分离培养健康人的骨髓间充质干细胞并进行体外扩增,通过构建成功的4组PEI-GFP(绿色荧光蛋白)纳米蛋白复合体对h BMSCs进行转染,共聚焦荧光显微镜下观察荧光表达情况,再通过MTT法检测该复合体对细胞增殖的毒性影响,并用β-半乳糖苷酶实验验证其转入蛋白的活性表现。结果:当PEI与蛋白质的摩尔比为4∶1时,形成的复合体转染效率最高,β-半乳糖苷酶实验细胞染色变蓝。结论:PEI能与蛋白质形成纳米复合体,并能转染多种蛋白质进入人骨髓间充质干细胞,所转染的蛋白质分子仍具有活性,为细胞重编程技术提供了新途径。
- 姜霖吴岳恒李晓红潘宇肖静杨翔宇冯媛余细勇
- 关键词:聚乙烯亚胺骨髓间充质干细胞
- 碱性成纤维细胞生长因子对成年大鼠骨骼肌干细胞增殖和迁移的作用
- 目的:骨骼肌干细胞也称骨骼肌卫星细胞,主要存在于肌纤维的肌膜层与基底膜之间,具有自我更新、多向分化的能力,在骨骼肌的损伤修复中起着重要的作用,并在心肌疾病的自身修复中显示了良好的临床应用前景。本文旨在探索碱性成纤维细胞生...
- 黄郁凯李晓红潘宇林秋雄朱杰宁江雪燕叶力通林曙光余细勇
- 关键词:骨骼肌干细胞成年大鼠碱性成纤维细胞生长因子
- 成年大鼠骨骼肌干细胞的制备与新型培养方法
- 目的建立高效分离和扩增成年大鼠骨骼肌干细胞的实验方法。方法通过混合酶消化法从少量成年骨骼肌样品中分离出骨骼肌干细胞;采用悬浮培养法培养获得骨骼肌干细胞团批量扩增骨骼肌干细胞;用quantitative real-time...
- 黄郁凯李晓红潘宇林秋雄朱杰宁江雪燕叶力通余细勇
- 衰老对缺氧刺激下心脏干细胞生物学功能的影响
- 2015年
- 目的 探讨衰老对缺氧损伤刺激下心脏干细胞(CSC)生物学功能的影响.方法 原代分离小鼠干细胞抗原1 (Sca1)+ CSC,培养6代后采用衰老β半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色鉴定细胞衰老情况.比较正常培养和缺氧培养第1代和第6代Sca1+ CSC增殖速度,血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)-A、PDGF-B mRNA水平,及VEGF和PDGF-BB分泌水平.将12只青年小鼠和12只老年小鼠各均分为心肌缺血组和假手术组,心肌缺血组采用冠状动脉前降支结扎法建立心肌缺血模型,术后3d取心脏分离细胞,采用流式细胞仪检测Sca1+ CSC水平.结果 第6代Sca1+ CSC与第1代Sca1+ CSC比较体积明显增大,SA-β-Gal蓝染,第1代Sca1+ CSC未见SA-3-Gal蓝染细胞.第6代Sca1+ CSC增殖率明显低于第1代Sca1+ CSC[(18±5)%比(103±27)%](P<0.01).缺氧培养后,第1代Sca1+ CSC增殖率[(58±11)%]明显降低(P<0.05),第6代Sca1+ CSC增殖率[(26±8)%]无明显改变(P>0.05).缺氧培养与正常培养比较,第1代CSC中VEGF、PDGF-A和PDGF-B mRNA水平明显增加,第6代Sca1+ CSC中VEGF、PDGF-A和PDGF-B mRNA水平无明显变化,第1代Sca1+ CSC中VEGF和PDGF-BB分泌水平明显增加[(150±37) μg/L比(18±6)μg/L、(288±37) μg/L比(35±6)μg/L],差异有统计学意义(均P<0.01),第6代Sca1+ CSC中VEGF和PDGF-BB分泌水平无明显变化,差异无统计学意义(均P>0.05).心肌缺血组老年和青年小鼠Sca1+ CSC水平均明显高于假手术组[(13.2±4.2)%比(1.5±0.4)%、(31.7±6.5)%比(5.0±0.6)%](P<0.05),2组老年小鼠Sca1+ CSC水平均明显低于青年小鼠(P<0.05).结论 衰老可致缺氧损伤刺激下Sca1+ CSC增殖能力、分泌能力以及损伤后的动员能力下降.
- 潘宇肖静李晓红蔡飒余细勇
- 关键词:衰老心脏干细胞缺氧