沈斌
- 作品数：22 被引量：52H指数：4
- 供职机构：四川大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 猪囊虫TS21抗原DNA接种小鼠的免疫应答被引量：1
- 2003年
- 将 4 0只BALB/c小鼠随机分为 2组 ,A组以VR10 2 0免疫作为对照 ,B组以TS2 1抗原基因的真核表达型质粒VTS2 1免疫。用ELISA检测免疫小鼠IgG总量和特异性抗体水平 ,MTT比色法检测小鼠脾淋巴细胞伴刀豆蛋白A(ConA)刺激的增殖反应及IL 2的诱生活性 ,常规法检测外周血免疫细胞数量的动态变化。结果显示 ,VTS2 1免疫小鼠血清的IgG含量和特异性抗体效价显著高于对照组小鼠 ;免疫小鼠脾淋巴细胞ConA刺激增殖反应和IL 2诱生活性均比对照组小鼠显著增强 ;免疫小鼠的淋巴细胞、巨噬细胞等免疫细胞的数量也显著超过对照组。免疫小鼠的细胞和体液免疫反应显著增强 ,表明VTS2 1具有很强的免疫激活作用 。
- 巫雪艳高荣沈斌孟民杰沈翼李江凌武梅唐漫书郑勇刘崑魏竹波王克非刘世贵
- 关键词：小鼠免疫应答MTT比色法猪带绦虫囊虫
- 不同融合基因修饰的黑色素瘤细胞体外目的基因表达及体内致瘤性的研究
- 目的:观察人白介素2(IL-2)和人共刺激因子137-1融合的基因(IB)及人集落刺激因子(GM-CSF)和B7-1融合的基因(GB)修饰的黑色素瘤B16细胞体外目的基因的表达及体内致瘤性的变化。方法:通过pVIVO真核...
- 林治荣沈斌冉胤威杜俊蓉王卫华郑士杰
- 文献传递
- 猪囊尾蚴抗原基因Ts11的克隆及其在大肠杆菌的表达被引量：5
- 2001年
- PCR扩增重组噬菌体λTs11克隆的cDNA片段 ,与pUC18连接 ,得到的重组子用以测序 ,并进行同源性比较分析 ;将该片段克隆到原核表达载体pGEX 1λT中 ,免疫印迹筛选得到能正确表达该片段的重组子 ;制备该重组子在大肠杆菌中的表达产物 ,进行浓度梯度SDS PAGE和West ernblotting分析。结果表明Ts11cDNA片段为 52 2bp ,编码含 139个氨基酸残基的多肽 ,在Gen Bank和EMBL数据库均未发现同源序列。重组质粒在大肠杆菌中表达的融合蛋白分子量为 4 1KD ,能与兔抗猪囊尾蚴囊液血清产生很强的免疫反应。这些结果证实分离到一个新的编码具较强免疫原性猪囊尾蚴抗原的cDNA克隆。
- 沈斌高荣孟民杰王克非魏竹波刘世贵
- 关键词：囊尾蚴克隆核酸疫苗
- 基于中间件的气象情报子系统设计与实现
- 本文从空管系统的一个子系统开发作为切入点，尝试应用先进的开发方法进行分析设计，采用设计模式和中间件技术来进行软件体系架构和实现，希望给这些开发方法在空管系统软件开发的全面应用奠定坚实的基础。
本文首先介绍了空管系统...
- 沈斌
- 关键词：空中交通管制中间件UML设计模式
- 文献传递
- 猪囊尾蚴抗原基因TS11的真核表达研究被引量：2
- 2003年
- 将猪囊尾蚴抗原基因 TS11亚克隆至 VR10 2 0真核表达载体中 ,用菌落原位杂交法筛选重组质粒 ,将其转染 COS7细胞 ,以 Northern Blotting检测插入片段的转录 ;用 EL ISA检查其翻译表达产物。结果表明 :VTS11在真核细胞中能够转录TS11基因的 m RNA;其蛋白表达产物能为兔抗猪囊虫高免血清所识别 ,在转染真核细胞 2 4 h后 ,即可检测到正确表达的猪囊尾蚴抗原蛋白。这些为深入研制猪囊虫的 DNA疫苗奠定了可靠的基础。
- 沈翼高荣沈斌武梅孟民杰唐漫书李江凌郑勇刘崑魏竹波王克非刘世贵
- 关键词：猪囊尾蚴抗原基因真核表达人畜共患病
- 猪白细胞介素-6基因的原核表达及其活性研究被引量：11
- 2002年
- 用DNA重组技术 ,将已克隆的猪IL - 6cDNA片段插入pGEX 1λT质粒 ,转化大肠杆菌 ,以BamHI和PstI酶切鉴定重组子 ,以IPTG诱导融合蛋白表达 ,并作RT PCR及SDS PAGE分析表达情况 ,从聚丙烯酰胺制备凝胶中回收融合蛋白 ,用MTT法测定重组蛋白刺激小鼠脾淋巴母细胞增殖反应的活性 ,并免疫家兔制备高免血清 ,得到高效表达猪IL 6的质粒pGPIL 6 ,RT PCR确证 pGPIL 6在大肠杆菌中能正确转录 ,经SDS PAGE分析表达蛋白分子量为 4 9kD ,融合蛋白具有较高的促小鼠淋巴细胞增殖反应活性 ,以此免疫家兔 ,可制备滴度为 1∶12 80 0
- 唐漫书高荣孟民杰武梅李江凌龙章富沈翼沈斌刘世贵
- 关键词：原核表达DNA重组基因表达融合蛋白
- 不同融合基因修饰的黑色素瘤细胞体外目的基因表达及体内致瘤性的研究
- 目的:观察人白介素2(IL-2)和人共刺激因子B7-1融合的基因(IB)及人集落刺激因子(GM-CSF)和B7-1融合的基因(GB)修饰的黑色素瘤B16细胞体外目的基因的表达及体内致瘤性的变化。方法:通过pVIVO真核表...
- 林治荣沈斌冉胤威杜俊蓉王卫华郑士杰
- 文献传递
- 猪囊虫病DNA疫苗研究
- 沈斌
- 关键词：猪带绦虫抗原基因DNA疫苗家畜免疫学
- 猪囊尾蚴cDNA表达文库构建及抗原基因筛选被引量：14
- 1999年
- 采用Ｑｕｉｃｋ Ｐｒｅｐ ｍ ＲＮＡ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ 试剂盒提取猪囊尾蚴ｍ ＲＮＡ；Ｔｉｍ ｅ－ Ｓａｖｅｒ ｃＤＮＡ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ试剂盒反转录合成双链ｃＤＮＡ，并在末端加上ＥｃｏＲＩ／ＮｏｔＩａｄａｐｔｏｒ，修饰后的ｃＤＮＡ 与λｇｔｌｌＥｃｏＲＩ臂连接，体外包装为λ噬菌体颗粒；感染Ｅ．ｃｏｌｉＹ１０９０ 构建成功库容量为２×１０６、重组率为８０％ 的ｃＤＮＡ表达文库。利用兔抗猪囊尾蚴虫体抗原和囊液抗原血清分别对一部分文库进行免疫印迹筛选，分别获得８ 个阳性克隆。提取阳性克隆ＤＮＡ，利用ＰＣＲ法从重组噬菌体ＤＮＡ中扩增出ｃＤＮＡ片段，长度自４００—９００ｂｐ。本文工作为研制猪囊尾蚴核酸疫苗打下了基础。
- 沈斌高荣朱锦魏竹波刘世贵
- 关键词：猪囊尾蚴CDNA表达文库抗原基因
- 小鼠对猪囊虫抗原基因TS76的免疫应答被引量：3
- 2002年
- 将猪囊虫抗原基因 TS76的真核表达型质粒 VTS76单独或与 p UC18联合肌肉免疫注射于 BAL B/ c小鼠 ,以MTT比色法检测小鼠脾淋巴细胞 Con A刺激的增殖反应及 IL - 2的诱生活性 ,EL ISA方法检测免疫小鼠 Ig G总量和特异性抗体水平 ,常规法检测外周血免疫细胞数量的动态变化。结果发现 ,VTS76免疫小鼠各项细胞和体液免疫应答反应指数均比空白对照组小鼠显著提高 ;联合免疫组小鼠的细胞免疫应答和体液免疫应答反应指数均比 VTS76小鼠提高。由此可见 ,以 VTS76免疫小鼠可诱导其特异性细胞和体液免疫反应 ,而 p UC18又明显提高了 VTS76免疫小鼠的免疫应答水平 。
- 孟民杰高荣沈斌魏竹波唐漫书沈翼王克非刘世贵
- 关键词：囊虫病抗原基因免疫应答DNA疫苗小鼠
