沈宓
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
- 供职机构：南通医学院神经科学研究所江苏省神经再生重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 地高辛标记的大鼠NGF RNA探针的制备和应用
- 2005年
- 制备用地高辛标记的神经生长因子(NGF)的RNA探针并用其研究NGF在海马组织中的表达。设计NGF引物,构建NGF/pGEMT重组质粒,分别用ApaⅠ和SacⅠ进行酶切得到线性化DNA片段,以Sp6和T7聚合酶转录合成酶合成地高辛标记的(dig)正、反义RNA探针。运用点膜杂交的方法检测探针的敏感度;运用该探针的原位杂交法分析NGF在海马中的表达。本研究成功地构建了NGF/pGEMT质粒,获得了正、反义digNGFRNA探针,并应用该探针在海马中观察到NGFmRNA的表达。本研究的结果为深入探讨NGF在海马发育和损伤过程中的表达奠定了基础。
- 沈宓丁斐
- 关键词：地高辛标记RNA探针神经生长因子海马原位分子杂交
- 神经生长因子高亲和力受体互补核糖核酸探针的研究
- 2003年
- 目的 制备用地高辛标记的神经生长因子高亲和力受体 (TrkA)正、反义互补核糖核酸 (cRNA)探针的研究。方法 设计TrkA引物 ,构建pGEM TEasy TrkA重组质粒 ,分别用ApaⅠ和SacⅠ进行酶切得到线性DNA片段 ,以SP6和T7RNA聚合酶转录合成带有地高辛标记的高比活度的正、反义单链cRNA探针。结果 经斑点杂交证实 ,该探针敏感性高、特异性强。TrkA ApaⅠ探针稀释 12 5 0 0倍后的浓度为 40ng μl;TrkA SacⅠ稀释 1∶2 5 0 0倍后的浓度为 8ng μl;。 结论 成功制备了地高辛标记的TrkAcRNA探针 ,为毒理学中有关TrkAmRNA在组织。
- 姜声扬丁斐沈爱国严美娟沈宓
- 关键词：神经生长因子受体NGF地高辛
- 实验性铅中毒对大鼠海马p75基因表达的影响被引量：2
- 2003年
- 目的 探讨铅对海马 p75基因表达的影响。方法 采用RT PCR方法 ,半定量分析铅对大鼠海马组织NGFmRNA表达的变化。以地高辛标记的p75cDNA为探针 ,采用原位杂交方法观察铅对大鼠海马 p75mRNA表达的影响。结果 与对照组相比 ,大鼠以 1%醋酸铅经口染毒 8周 ,海马组织 p75mRNA的表达量明显下降 (P <0 0 1)。结论 铅可影响海马 p75基因的表达。
- 沈宓丁斐
- 关键词：铅海马中毒
- 地高辛标记的大鼠p75RNA探针的制备和应用
- 2005年
- 目的:制备用地高辛标记的神经生长因子低亲和力受体(p75)的RNA探针。研究p75在海马组织中的表达。方法:设计p75引物,构建p75/pGEM-T重组质粒,分别用ApaⅠ和SacⅠ进行酶切得到线性化DNA片段,以Sp6和T7聚合酶转录合成酶合成地高辛标记的(dig-)正反义RNA探针。运用点膜杂交的方法检验探针的敏感度,运用该探针,通过原位杂交分析p75在海马中的表达。结果:构建了p75/pGEM-T质粒,获得高效价的正、反义dig-p75RNA探针,应用该探针发现p75mRNA在海马中的表达。结论:成功制备了地高辛标记的p75RNA探针,为进一步研究p75在海马中发育和损伤过程中的表达打下基础。
- 沈宓丁斐
- 关键词：原位杂交
- 实验性铅中毒对大鼠海马p75基因表达的影响
- 2003年
- 目的 :探讨铅对海马 p75基因表达的影响。 方法 :采用RT -PCR方法 ,半定量分析铅对大鼠海马组织NGFmRNA表达的变化。以地高辛标记的 p75cDNA为探针 ,采用原位杂交方法观察铅对大鼠海马 p75mRNA表达的影响。 结果 :与对照组相比 ,大鼠以 1%醋酸铅经口染毒 8周 ,海马组织p75mRNA的表达量明显下降 (P <0 .0 1)。结论
- 沈宓丁斐
- 关键词：实验性铅中毒海马基因表达RT-PCR原位杂交法
