梅林
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金国家自然科学基金重庆市卫生局医学科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 卡氏肺孢子菌主要表面糖蛋白上游保守序列基因microRNA表达载体的构建和鉴定被引量：2
- 2010年
- 目的:构建和鉴定卡氏肺孢子菌(Pneumocystis carinii,PC)主要表面糖蛋白(Major surface glycoprotein,MSG)表达调控基因上游保守序列(Upstream conserved sequence,UCS)的microRNA表达载体,并在体外转染到PC中观察其对PC的抑制作用。方法:设计并人工合成针对PC MSG-UCS基因的1对microRNA序列并定向克隆到表达载体pcDNA^(TM)6.2-GW/EmGFPmiR上,序列正确的载体用脂质体转染PC细胞,RT-PCR检测其对PC MSG-UCS基因的抑制作用,扫描电镜观察PC的超微结构变化。结果:凝胶电泳和测序鉴定得到的产物与预期的目的基因一致,其在mRNA水平能明显抑制PC的表达并能破坏PC的超微结构。结论:PC MSG-UCS基因的microRNA表达载体pPC-UCSm构建成功,并能在体外抑制PC的表达。
- 梅林姚云清朱艳玲骆晓练李文桂陈雅棠
- 关键词：卡氏肺孢子菌MICRORNA
- siRNA治疗大鼠卡氏肺孢子菌肺炎的实验研究被引量：2
- 2011年
- 目的:观察靶向卡氏肺孢子菌(Pneumocystis carinii,PC)主要表面糖蛋白(Major surface glycoprotein,MSG)DNA上游保守序列(Upstream conserved sequence,UCS)基因的siRNA对实验大鼠卡氏肺孢子菌肺炎(Pneumocystis carinii pneumonia,PCP)的治疗效果。方法:地塞米松皮下注射大鼠8周建立PCP动物模型,分为4组:A组,pPC-UCS组;B组,磺胺组;C组,感染对照组;D组,pTZU6+1对照组。大鼠存活率、体重、肺组织病理学变化、肺印片PC包囊数、扫描电镜下PC表面结构变化、ELISA检测大鼠血清IL-8、TNF-α水平作为疗效指标。结果:①各组大鼠均存活,存活率比较无意义。②A组与B组大鼠体重分别增长(13.16±3.97)g与(14.21±3.90)g,明显高于C组(4.32±2.06)g与D组(5.38±1.19)g,P<0.05。③与C组和D组比较,A组和B组大鼠肺组织炎症明显减轻。④A组与B组每视野包囊均数分别为(3.61±0.40)个与(3.17±0.28)个,明显低于C组(8.34±0.55)个与D组(8.74±0.57)个,P<0.05。⑤扫描电镜下,C组与D组PC表面结构完整,有密集的微绒毛结构;A组与B组PC表面微绒毛脱落,表膜出现深大缺损。⑥大鼠血清IL-8水平:A组与B组分别为(232.50±36.27)pg/ml与(201.15±34.52)pg/ml,明显低于C组(596.85±61.72)pg/ml与D组(555.10±54.31)pg/ml,P<0.05;大鼠血清TNF-α水平:A组与B组分别为(145.20±80.72)pg/ml与(172.65±76.27)pg/ml,明显高于C组(31.58±8.47)pg/ml与D组(39.49±12.03)pg/ml,P<0.05。结论:靶向PC MSG-UCS基因的siRNA对大鼠PCP有治疗作用。
- 骆晓练姚云清谭燕梅林龚锐
- 关键词：SIRNA
- microRNA沉默卡氏肺孢子菌主要表面糖蛋白基因对大鼠卡氏肺孢子菌肺炎的治疗作用被引量：3
- 2012年
- 目的探讨靶向卡氏肺孢子菌(Pneumocystis carinii,PC)主要表面糖蛋白基因(Major surface glycoprotein gene,MSG)上游保守序列(Upstream conserved sequence,UCS)的microRNA重组质粒对大鼠卡氏肺孢子菌肺炎(Pneumocystis cariniipneumonia,PCP)的治疗作用。方法将SD大鼠经腹股沟皮下注射地塞米松磷酸钠7周,制备大鼠PCP感染模型。将模型大鼠随机分为5组:microRNA重组质粒治疗组(M组)、磺胺药物治疗组(H组)、生理盐水对照组(C1组)、空载体质粒对照组(C2组)和模型对照组(C3组),其中M组和C1、C2组经尾静脉分别注射含microRNA重组质粒pPC-UCS、生理盐水和空载体,H组用磺胺药物灌胃治疗,C3组不做处理,每日1次,疗程为7 d。1周后吉姆萨染色,油镜下计数大鼠肺组织液印片中PC包囊数;HE染色,光镜观察肺组织病理改变;ELISA法检测大鼠血清中IL-10和IFNγ的表达水平;RT-PCR法检测肺组织中PC MSG-UCSmRNA的表达水平;电镜观察PC的超微结构。结果与C1、C2和C3组相比,M组和H组大鼠肺组织PC包囊数均明显减少(P<0.05),肺组织炎症较轻,大鼠血清IL-10的表达水平均显著降低(P<0.05),而IFNγ的表达水平显著升高(P<0.05),大鼠肺组织PC MSG-UCS mRNA的表达水平均显著降低(P<0.05);电镜观察显示,M组和H组PC包囊表面均出现破损,C1、C2、C3组未发现破损。结论 microRNA重组质粒pPC-UCS对大鼠PCP有明显的治疗作用,为治疗PCP提供了新的思路。
- 龚锐姚云清梅林骆晓练谭燕李文桂陈雅棠
- 关键词：卡氏肺孢子菌肺炎
