杨红菊
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：重庆医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 钙敏感受体通过ERK信号通路参与低氧诱导的人气道上皮细胞黏液高分泌被引量：3
- 2014年
- 目的探究钙敏感受体(Ca SR)在低氧诱导的气道黏液高分泌中的信号通路。方法低氧培养箱(37℃,94%N2-1%O2-5%CO2)培养人气道上皮细胞16HBE复制细胞低氧模型。分为对照组、低氧组、Ca SR特异性激动剂Ca Cl2+低氧组、对照siRNA+低氧组、Ca SR-siRNA+低氧组、细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路特异性抑制剂U0126+低氧组。RT-PCR检测黏蛋白(MUC)5AC的转录水平,Western blot检测Ca SR、ERK1/2及磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)的蛋白相对含量,ELISA检测MUC5AC的分泌水平,四甲基偶氮唑盐法(MTT)测定细胞的活性。结果Ca SR表达于人气道上皮细胞,转染特异性的Ca SR-siRNA明显抑制Ca SR的表达。低氧组p-ERK1/2、MUC5AC mRNA和MUC5AC蛋白的相对含量分别为(0.63±0.11、0.51±0.03、0.56±0.07)较对照组(0.27±0.04、0.18±0.04、0.25±0.06)显著增加(P<0.05)。Ca SR的激动剂Ca Cl2可进一步增强低氧引起的上述作用(P<0.05),而转染Ca SR-siRNA及给予ERK信号通路特异性抑制剂U0126可抑制低氧引起的上述效应(P<0.05)。结论 Ca SR可通过MEK/ERK1/2信号通路参与低氧诱导的气道黏液高分泌。
- 杨红菊尤列.皮尔曼维克多.科罗索夫周向东
- 关键词：钙敏感受体黏蛋白
- 钙敏感受体在缺氧诱导气道黏液高分泌中的作用被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨钙敏感受体（CaSR）在缺氧诱导的气道黏液高分泌中的作用.方法 通过缺氧培养箱（94％ N2、1％ O2、5％ CO2、37℃）培养人气道上皮细胞HBE16的方法复制细胞缺氧模型.转染CaSR的小干扰RNA （siRNA）及预先给予CaSR特异性激动剂CaCl2、磷脂酶C信号通路不同的抑制剂：Gαq/11蛋白特异性抑制剂（YM-254890）,磷脂酶C特异性抑制剂（U73122）,三磷酸肌醇受体（IP3R）特异性抑制剂（2-APB）及细胞内Ca2＋螯合剂（BAPTA-AM）后,各组细胞再施以缺氧处理.采用反转录-PCR检测黏蛋白（MUC）5AC mRNA的转录水平,Western印迹法检测CaSR蛋白的表达水平,酶联免疫吸附（ELISA）法检测MUC5AC蛋白的相对含量,共聚焦显微镜观察细胞内Ca2＋浓度的变化.结果 缺氧组CaSR蛋白相对表达水平（0.423 ±0.028）显著高于对照组（0.185 ±0.036）（t=12.75,P＜0.001）;细胞内Ca2＋浓度、MUC5AC蛋白相对含量及MUC5AC mRNA相对表达水平[（154.2±11.4） nmol/L、（0.624±0.063） μg/L、0.736±0.045]也显著高于对照组[（67.5±2.8）nmol/L、（0.257 ±0.051）tμg/L、0.321±0.034]（t=18.04、11.06、18.05,均JP＜0.001）.CaCl2能上调缺氧引起的上述作用,转染CaSR siRNA能够下调缺氧引起的上述效应（均P＜0.001）.预先给予YM-254890、U73122、2-APB、BAPTA-AM处理细胞,细胞内Ca2＋浓度、MUC5AC蛋白相对含量及MUC5AC mRNA相对表达水平均显著低于单纯缺氧组（均P＜0.05）.结论 CaSR可通过Gαq/11/磷脂酶C/三磷酸肌醇/细胞内Ca2＋信号通路参与缺氧诱导的气道黏液高分泌.
- 杨红菊尤列·皮尔曼维克多·科罗索夫周向东
- 关键词：黏蛋白类缺氧
