杨庆强 作品数:24 被引量:154 H指数:6 供职机构: 泸州医学院附属医院 更多>> 发文基金: 四川省卫生厅科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
低氧对人结肠癌细胞HT-29体外侵袭转移潜能的影响 被引量:1 2007年 目的探讨低氧与人结肠癌细胞HT-29恶性转化的关系,检测骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、细胞核内核转录因子(NF-κB/p65)表达和MMP-2、MMP-9活性变化,以探索其恶性转化的潜在机制。方法参照体内肿瘤的氧分压,建立低氧模型。MTT比色试验测定HT-29细胞的异质性黏附能力,Transwell侵袭试验判定其侵袭游走能力;将HT-29细胞低氧处理0、6、12、24、48h,明胶酶谱分析检测分泌的MMP-2、MMP-9活性变化,RT-PCR和Western blot检测OPN mRNA和蛋白表达,提取细胞核蛋白,Western blot检测细胞核内NF-κB/p65蛋白表达。结果低氧诱导24h后,HT-29细胞的异质性黏附能力、侵袭游走能力显著增加。低氧下6h,MMP-2、MMP-9活性无明显变化,随着低氧时间的延长,其活性逐渐显著上调,24h达顶峰,48h与24h无显著性差异。HT-29细胞在低氧的诱导下,其OPN mRNA和蛋白以及细胞核内NF-κB/p65蛋白的表达趋势与MMP-2、MMP-9活性变化趋势类同。结论低氧能诱导HT-29细胞异质性黏附能力、侵袭游走能力显著增加,MMP-2、MMP-9活性上调而促使其向恶性表型转化。OPN-NF-κB可能是低氧下继HIF-1之外的另一重要调节途径,该途径与低氧诱导的恶性表型有密切关系。 杨庆强 张才全 唐华关键词:低氧 骨桥蛋白 核转录因子 恶性转化 腹腔镜手术在老年直肠癌患者的应用入围手术期护理 本文通过总结2008年12月至2011年2月收治的60岁以上行腹腔镜和传统开腹手术的78例直肠癌患者的临床及护理资料,旨在总结腹腔镜手术在老年直肠癌患者的应用经验和围手术期护理要点。腹腔镜手术只是微创外科在腹部外科的应用... 李显蓉 杨庆强 徐林霞关键词:直肠癌 腹腔镜手术 临床护理 骨桥蛋白反义寡核苷酸对微缺氧下人结肠癌细胞HT-29增殖活性及侵袭力的影响 2010年 目的观察靶向骨桥蛋白(OPN)的反义寡核苷酸(ASODN)对微缺氧下HT-29细胞增殖活性、侵袭转移潜能等的影响,探讨OPN与微缺氧诱导的肿瘤恶性表型的关系。方法合成ASODN,以Lipofectamine为载体,将其转染入微缺氧下高表达OPN的HT-29细胞。用RT-PCR和Western blot法分别检测转染细胞微缺氧下OPN mRNA和蛋白的表达,MTT检测转染的HT-29细胞微缺氧下的增殖活性,MTT比色试验测定HT-29细胞的异质性黏附能力,明胶酶谱分析检测分泌的MMP-2/9活性变化。结果微缺氧诱导的OPN mRNA和蛋白表达被靶向OPN的ASODN特异性地抑制,表达量分别是对照组的31.5%和35.4%。ASODN组HT-29细胞的吸光度值(A570)明显低于各对照组(P<0.01),生长抑制率(IR)达(41.6±1.2)%。ASODN组HT-29细胞在各时限点的黏附率均明显降低,明胶酶活性下降71%,与各对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论靶向OPN的ASODN明显抑制微缺氧诱导的OPN mRNA和蛋白表达,显著拮抗微缺氧诱导的细胞增殖、异质性黏附,并显著下调微缺氧诱导的细胞分泌MMP2/9的活性。OPN在微缺氧促进肿瘤向恶性表型转化中起着重要作用。 杨庆强 唐春燕关键词:微缺氧 反义寡核苷酸 骨桥蛋白 恶性表型 微缺氧对人结肠癌细胞HT-29血管生成能力及分泌基质金属蛋白酶2/9活性的影响 被引量:1 2011年 目的观察HT-29细胞在微缺氧下的血管生成能力,检测OPN的表达和MMP-2/MMP-9的活性变化,以探讨其向恶性表型转化的潜在机制。方法参照体内肿瘤的氧分压,建立微缺氧模型。内皮细胞小管形成试验检测体外促进新生血管形成的能力。将HT-29细胞微缺氧处理0、6、12、24和48 h,明胶酶谱分析检测分泌的MMP-2/MMP-9活性变化,RT-PCR和Western blot检测OPN的mRNA和蛋白表达。结果微缺氧组内皮细胞形成的管状结构数为(28.5±3.6),明显多于对照组(12.4±2.8),其差异具有显著性(P<0.01)。微缺氧6 h,MMP-2/MMP-9活性无明显变化,随着微缺氧时间的延长,其活性逐渐上调,24 h达顶峰,48 h与24 h差异无显著性。HT-29细胞在微缺氧的诱导下,其OPN mRNA和蛋白的表达趋势与MMP-2/9活性变化趋势类同。结论微缺氧能诱导HT-29细胞促进新生血管形成,上调MMP-2/MMP-9活性而促进其向恶性表型转化。该实验检测到在微缺氧下OPN和MMP-2/MMP-9普遍上调,且时限同步。因此,笔者推测:OPN可能是微缺氧下继HIF-1α之外的另一重要调控因子,该调控因子与微缺氧诱导的恶性表型密切相关。 杨庆强 唐春燕关键词:微缺氧 骨桥蛋白 恶性表型 反义寡核苷酸对微缺氧下人结肠癌细胞HT-29骨桥蛋白表达的影响 被引量:2 2011年 目的观察靶向骨桥蛋白(OPN)的反义寡核苷酸(ASODN)对微缺氧下HT-29细胞骨桥蛋白表达的影响,为探讨OPN与微缺氧诱导的肿瘤恶性表型的关系奠定基础。方法合成ASODN,以Lipofectamine为载体,将其转染入微缺氧下高表达OPN的HT-29细胞。Western blot行OPN ASODN抑制OPN蛋白表达的量效关系和特异性分析。RT-PCR检测转染细胞微缺氧下OPNmRNA的表达。结果 ASODN组OPN蛋白表达较各对照组明显下调(P<0.01),其下调的幅度随OPN ASODN浓度升高而增强,但这种增强趋势在浓度为10umol/L和20umol/L之间已不明显(P>0.05)。微缺氧诱导的OPN蛋白和mRNA表达被靶向OPN的ASODN特异性地抑制,表达量分别是对照组的35.4%和31.5%。结论靶向OPN的ASODN明显抑制微缺氧诱导的OPNmRNA和蛋白表达。 杨庆强 唐春燕关键词:反义寡核苷酸 骨桥蛋白 结肠癌 腹腔镜直肠癌根治术疗效分析 被引量:7 2014年 目的评价腹腔镜手术与传统开腹手术治疗直肠癌的疗效。方法 2009年9月~2010年9月泸州医学院附属医院共实施腹腔镜直肠癌手术128例,选取同一时期行传统开腹直肠癌手术126例,回顾性比较两组根治性、手术时间、术中及术后并发症、术后肠道功能恢复时间、30 d病死率、1年总存活率及无病存活率等情况。结果腹腔镜组与开腹组比较,在手术时间、术中出血、术后肠道功能恢复时间、术后住院时间等差异有显著性。而术中及术后并发症、淋巴结清扫数目、30 d病死率、1年总存活率及无病存活率比较差异无显著性。结论腹腔镜手术是一种适宜的方式,可获得与传统开腹手术相同的根治效果。尽管腹腔镜手术时间较长,但在术中出血、术后肠道功能恢复时间及术后住院时间方面体现了优势。腹腔镜手术的长期预后尚需随访。 杨庆强 唐春燕 徐亮关键词:腹腔镜手术 直肠癌 短期疗效 结直肠癌手术中不置胃管的临床意义 被引量:11 2012年 目的探讨应用快速康复外科(FTS)理念,在结直肠癌根治术术前不留置胃管及术后早期进食的安全性及可行性。方法对该院胃肠外科进入快速康复的结直肠癌手术患者115例,按术前是否常规安置胃管分为观察组(55例)及对照组(60例),比较两组患者吻合口瘘、肺部感染的发生率以及恶心呕吐、咽喉疼痛、肛门排气时间及术后住院时间。结果所有患者均成功完成手术,两组患者在吻合口瘘发生率及住院时间等指标方面比较差异无统计学意义(P>0.05),观察组肛门排气时间缩短、咽喉疼痛、恶心呕吐及肺部感染的发生率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论应用FTS的理念,对结直肠癌根治术患者不留置胃管及术后早期进食是安全可行的,可以减少患者不适感并有利于患者早日康复。 李显蓉 杨庆强 修鹏关键词:快速康复外科 留置胃管 术后早期进食 结直肠癌 缺氧与肿瘤恶性演进的关系及其机制探讨 被引量:6 2015年 目的观察HT-29细胞在低氧下分泌的基质金属蛋白酶2/9(MMP-2/9)活性,检测核转录因子-κB(NF-κB)的蛋白表达,初步探讨低氧与肿瘤恶性演进的关系。方法参照体内肿瘤的氧分压,建立低氧模型。将HT-29细胞低氧处理不同时段,明胶酶谱分析检测其分泌的MMP-2/9活性变化;提取细胞核蛋白,Western blot测定胞核内NF-κB的表达。结果低氧12h,HT-29细胞分泌的MMP-2/9活性逐渐上调,24h达顶峰。在低氧的诱导下,HT-29细胞核内NF-κB的表达趋势与MMP-2/9活性变化趋势基本一致。结论低氧能诱导HT-29细胞分泌高活性的MMP-2/9而促进其向恶性演进,可能与细胞核内NF-κB的表达上调有关。 杨庆强 唐春燕关键词:缺氧 肿瘤 NF-ΚB 一项简单易行的预测Dukes C期大肠癌切除术后肝转移的生物学指标 2007年 目的:本研究旨在探讨瘤芽在不同大肠癌病例的分布特征以及骨桥蛋白(OPN)等在原发癌灶和瘤芽的表达,以评价其可否作为简单易行的预测大肠癌术后肝转移的生物学指标。方法:将Dukes C期以上病例分成3组:A组为同时性肝转移组,B组为异时性肝转移组,C组为无肝转移组。HE染色后,重点观察位于大肠癌侵袭前沿的瘤芽的分布特征,并准确计数。应用免疫组化法分别检测OPN、NF-κB在原发癌灶和瘤芽的表达。结果:瘤芽位于肿瘤侵袭前沿,是失去极性的去分化癌细胞,呈孤立或不规则小梁状分布。瘤芽程度和OPN在大肠癌原发癌灶的强阳性表达在A与C组间的差异具有显著性(P<0.01)。OPN在瘤芽的阳性表达在A和C组以及B和C组的差异均具有显著性(P<0.01)。各组间NF-κB在原发癌灶、瘤芽的表达无显著差别。结论:瘤芽BD(+)、OPN在原发癌灶的强阳性表达均提示大肠癌发生肝转移的可能性较大。如将瘤芽分布特征结合OPN在瘤芽的表达,则可提高预测的准确性,可以考虑作为预测大肠癌术后肝转移的生物学指标。 杨庆强 张才全关键词:肝转移 骨桥蛋白 骨桥蛋白反义寡核苷酸对体外微缺氧诱导的肿瘤新生血管的影响 被引量:1 2011年 目的观察靶向骨桥蛋白(O PN)的反义寡核苷酸(ASO D N)对微缺氧下H T-29细胞体外促进新生血管形成能力的影响,探讨O PN与微缺氧诱导的肿瘤新生血管的关系。方法合成靶向O PN的ASO D N,以Lipofectam ine为载体,将其转染入微缺氧下高表达O PN的H T-29细胞。R T-PC R和W estern blot分别检测转染细胞微缺氧下O PN m R N A和蛋白的表达;明胶酶谱分析检测分泌的M M P-2/M M P-9活性变化;内皮细胞小管形成试验检测体外促进新生血管形成的能力。提取胞核蛋白,W estern blot检测胞核内N F-κB/p65蛋白表达。结果微缺氧诱导的O PN m R N A和蛋白表达被靶向O PN的ASO D N特异性地抑制,表达量分别是对照组的35.4%和31.5%。ASO D N组H T-29细胞明胶酶活性下降71.0%,内皮细胞形成管状结构的数仅为(12.4±1.8);胞核内的N F-κB/p65蛋白表达下调了61.2%。与各对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论靶向O PN的ASO D N明显抑制微缺氧诱导的O PN m R N A和蛋白表达,显著下调微缺氧诱导的H T-29细胞分泌M M P-2/M M P-9的活性,显著拮抗新生血管形成。阻抑O PN的表达,胞核内N F-κB/p65表达、M M P-2/M M P-9的活性随之下调,提示N F-κB和M M P-2/M M P-9也可能参与微缺氧诱导的恶性转化,并且是O PN的下游调控基因。 杨庆强 唐春燕关键词:微缺氧 反义寡核苷酸 骨桥蛋白