您的位置： 专家智库 > >

杨化强

作品数：7 被引量：10H指数：3
供职机构：华南理工大学生物科学与工程学院更多>>
发文基金：国家自然科学基金国家科技基础条件平台建设计划更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 6篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 5篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 6篇疫苗
  • 5篇DNA疫苗
  • 3篇细胞
  • 3篇抗原
  • 3篇肝炎
  • 3篇表位
  • 2篇多表位
  • 2篇多表位抗原
  • 2篇真核
  • 2篇真核表达
  • 2篇核表达
  • 2篇SIRNA
  • 2篇丙型
  • 2篇丙型肝炎
  • 1篇多克隆
  • 1篇乙肝
  • 1篇乙型
  • 1篇乙型肝炎
  • 1篇英文
  • 1篇真核表达质粒

机构

  • 7篇华南理工大学

作者

  • 7篇杨化强
  • 6篇曹以诚
  • 4篇杜正平
  • 3篇张珍武
  • 2篇卓敏
  • 2篇李新建
  • 2篇黄镜贤
  • 1篇郭旭
  • 1篇程春明
  • 1篇方翔
  • 1篇石川

传媒

  • 3篇中国生物工程...
  • 1篇细胞与分子免...
  • 1篇中南药学
  • 1篇河南工业大学...

年份

  • 2篇2008
  • 2篇2007
  • 3篇2006
共 7 条 记 录，以下是 1-7
全选 清除 导出
排序方式：
共表达siRNA和hIL-12的新型乙肝多表位DNA疫苗的研究被引量：3
2008年
目的:构建含有靶向乙肝表面抗原(HBsAg)基因的siRNA、乙肝复合多表位抗原基因和hIL-12共质粒表达的新型DNA疫苗,并在HepG2细胞中检测siRNA的效果以及各基因的表达。方法:设计并合成复合多表位HBV抗原基因,将其与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因融合克隆进真核表达载体pVAX1的多克隆位点中,同时将带CMV启动子的完整hIL-12表达单元克隆进载体的BspHI位点之间,再设计并合成乙肝siRNA表达单元,将其克隆进载体的MluI位点之间,得到真核三元共表达重组质粒pVAX1-siHB-HB-EGFP-hIL12。以该重组质粒瞬时转染人肝癌细胞系HepG2,通过EGFP的荧光标记观察多表位抗原的表达,以ELISA测定培养细胞上清中hIL-12的表达,以rtPCR检测siRNA对HBsAg基因的沉默效果。结果:经酶切鉴定和测序证实共表达siRNA、hIL-12的HBV多表位DNA疫苗构建成功。转染细胞中检测到绿色荧光,证实抗原表达;转染后48hhIL-12的检出量为1289pg/ml细胞上清,72h检出量为1712pg/ml细胞上清;转染后HBsAg表达量明显降低,证实siRNA效果良好。结论:成功构建乙肝复合多表位抗原基因与siRNA、hIL-12共质粒表达的DNA疫苗,并能在真核细胞中有效表达抗原与hIL-12基因,而且siRNA对HBsAg显示出明显的沉默效果,为进一步研究该复合型DNA疫苗抗HBV的治疗效果打下基础。
黄镜贤曹以诚杜正平陶嫦立杨化强
关键词：乙型肝炎DNA疫苗多表位抗原SIRNA
结合RNAi技术的三重表达HCV DNA疫苗的构建及其在HepG2细胞中的表达被引量：1
2008年
目的:构建多表位抗原基因、hIL-12、小分子干扰RNA(siRNA)共质粒表达的新型复合丙型肝炎DNA疫苗并在HepG2细胞中表达。方法:设计并合成复合多表位丙肝抗原基因,将其与加强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因融合克隆进真核表达载体pVAX1的多克隆位点中;利用pVAX1载体上卡那霉素抗性基因与复制起始位点之间的非功能区域,将带CMV启动子的hIL-12表达单元克隆进该区域的BspH I位点中;同时将8组针对丙肝的siRNA表达单元分别克隆进载体复制起始位点下游非功能区域的MluI位点上,构建三重表达的HCV DNA疫苗pVAX1-HC-EGFP-hIL12-siRNA。以该重组质粒转染人肝癌细胞系HepG2,通过EGFP的荧光标记观察多表位抗原的表达;以靶向EGFP的siRNA做为对照验证siRNA的表达及其干扰效果;ELISA测定培养细胞上清中hIL-12的表达。结果:经酶切鉴定和测序证实三重表达的复合HCV DNA疫苗构建成功。在转染细胞中检测到绿色荧光,证实抗原表达;靶向EGFP的siRNA亦能显著抑制EGFP的表达;转染后48 h hIL-12的检出量为1 289 ng/L细胞上清,72 h检出量为1 712 ng/L细胞上清。结论:成功地构建多表位抗原基因、hIL-12和siRNA共质粒表达的丙肝DNA疫苗,并能在真核细胞中有效表达抗原基因、hIL-12并介导RNA干扰效应。为进一步研究该DNA疫苗抗HCV的免疫治疗和基因治疗效果打下基础。
杨化强曹以诚杜正平卓敏黄镜贤李新建石川张珍武
关键词：DNA疫苗多表位抗原SIRNA
结核分枝杆菌融合抗原Ag85B-ESAT6真核表达载体的构建及鉴定被引量：1
2006年
以结核分枝杆菌H37Rv株的基因组作为模板,将Ag85B和ESAT6编码基因进行PCR扩增,然后采用基因剪接重叠扩增PCR法(gene SOEing)将其通过疏水甘氨酸接头(GGIGIAPG)连接融合,定向克隆至质粒Pvax1中,构建结核分枝杆菌Ag85B-ESAT6融合抗原的真核表达质粒Pvax1/AE.经单双限制性内切酶图谱、PCR产物及DNA测序分析等多种方法鉴定,证实Pvax1/AE真核表达质粒构建成功.为进一步研究其结核核酸疫苗原型的免疫保护效果奠定了基础.
程春明曹以诚杜正平杨化强郭旭方翔张珍武
关键词：AG85BESAT6融合基因核酸疫苗
新型真核表达质粒pcDNA6/myc-his-EGFP B的构建及其在重组基因表达中的应用(英文)被引量：3
2006年
增强型绿色荧光蛋白(EGFP, enhanced green fluorescent protein)、myc抗原和6×His已在众多真核表达载体中用作重组蛋白的表达标记,EGFP能发出的绿色荧光,myc抗原能用相应的抗体检测,6×His能被相应的树脂特异吸附。但目前为止,没有一个质粒表达载体能够同时整合三者的功能。本研究构建了一个能够同时整合EGFP、myc抗原和6×His功能的新型真核质粒表达载体,我们将其命名为pcDNA6/myc-his-EGFP B。值得注意的是,为确保目的基因与EGFP基因融合表达后,融合表达产物各组成部分能够保持原有的生物活性,我们运用LINKER程序在EGFP基因的5’端设计了一段编码八肽的连接DNA序列。将一段含有人白细胞介素2(IL-2, humaninterleukin 2)信号肽编码序列的基因亚克隆进pcDNA6/myc-his-EGFP B的多克隆位点中,使之与EGFP、myc抗原和6×His融合表达,构建成质粒pMHES。用pcDNA6/myc-his-EGFP B和pMHES转染2.2.15细胞,48h后成功观察到绿色荧光;用pcDNA6/myc-his-EGFP B尾静脉注射Balb/c小鼠,8h后在小鼠肝脏冰冻切片中同样观察到绿色荧光。用同源建模软件Modeller8V2模拟IL-2与EGFP、myc抗原和6×His融合表达产物的三维结构,结果表明:IL-2、EGFP、myc和6×His各部分互不干扰,连接八肽具有一定的柔性。以上结果表明pcDNA6/myc-his-EGFP B可望作为外源基因在哺乳动物细胞中表达研究和基因治疗的新型载体。
李新建曹以诚杜正平杨化强张珍武卓敏
关键词：真核表达质粒EGFPMYC
丙型肝炎病毒多表位DNA疫苗的研究进展被引量：3
2007年
丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是非甲非乙型肝炎的主要病原,目前还没有有效的预防和治疗手段。多表位DNA疫苗(multi-epitope DNA vaccine,minigenes/epigenes)是指通过筛选与组合优势抗原表位(包括T细胞、B细胞表位)基因,以能产生高效细胞、体液免疫应答进而清除HCV病毒为目的的新型核酸疫苗。其优势在于通过选择最具免疫保护潜力的表位以覆盖尽量多的病毒亚型和诱导全面的机体抗病毒免疫应答,并尽量减少无关、干扰和抑制序列可能产生的负面影响。介绍了近年来国内外在丙型肝炎多表位DNA疫苗方面的研究进展,并展望了其发展方向。
杨化强曹以诚
关键词：丙型肝炎病毒表位DNA疫苗
细胞因子和趋化因子作为DNA疫苗基因佐剂的研究进展被引量：1
2006年
杨化强曹以诚
关键词：细胞因子趋化因子DNA疫苗基因佐剂
新型三重表达丙型肝炎DNA疫苗的研究
丙型肝炎病毒是慢性肝病的主要病原，目前全球约有1.7亿HCV感染患者，由于缺乏有效的治疗办法，70％以上的感染者将发展成慢性感染，部分发展成肝硬化或肝癌，因此丙肝疫苗一直是近年来的研究热点。 本研究基于对DNA...
杨化强
关键词：疫苗多克隆细胞水平卡那霉素抗性基因人肝癌细胞系
文献传递
全选 清除 导出
共1页<1>
聚类工具0