李铁民
- 作品数：28 被引量：72H指数：5
- 供职机构：中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 阻断ICOS对小鼠移植胰岛功能影响的实验研究被引量：2
- 2006年
- 目的:在小鼠胰岛移植模型基础上,通过阻断可诱导共刺激分子(ICOS),探讨ICOS单克隆抗体(ICOS mAb)对移植胰岛功能的影响。方法:供体为近交系昆明小鼠,受体为C57小鼠。受体小鼠随机分成5组,每组10只。假手术组:受体小鼠仅行开腹手术,不行胰岛移植;对照组:单纯胰岛移植,不给ICOS mAb;实验1、2、3组:分别于胰岛移植后1、3、5 d腹腔内注射ICOSmAb 50、100、200μg/kg。观察小鼠胰岛移植后移植物存活时间和移植胰岛病理改变,流式细胞仪检测ICOS在T淋巴细胞上的表达。结果:实验2组小鼠移植胰岛存活时间和实验3组相同,统计学分析无显著性差异,而较对照组及实验1组明显延长(P<0.05)I,COS在移植术后7 d受体小鼠T淋巴细胞上表达明显上调。结论I:COS分子在小鼠同种异体胰岛移植排斥反应中表达上调,参与了排斥反应的发生。ICOS mAb通过阻断ICOS共刺激信号途径,诱导小鼠同种异体胰岛移植免疫耐受,减轻排斥反应,延长移植胰岛有功能存活时间。ICOS mAb的最佳给药剂量为100μg/kg。
- 赵国华张佳林许国岩钟鑫平杨蕾李铁民程颖刘永锋
- 关键词：胰岛移植排斥反应共刺激信号
- PDGF-B基因转染骨髓间充质干细胞的研究
- 2006年
- 目的:探讨血小板源性生长因子B(PDGF-B)基因转染修饰大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)的可行性。方法:应用FAM标记重组真核表达载体系统(pcDNA3-PDGF-B),以脂质体法转染原代MSC,观察转染结果、表达情况及对靶细胞活力的影响。结果:MSC的基因转染成功,持续表达时间超过了8周,没有发现明显的细胞毒作用及对细胞活力的显著影响。结论:采用真核转染技术可以介导外源基因转染MSC,MSC是一种理想的基因载体细胞,可用于PDGF-B的基因治疗。
- 李铁民程颖胡新华刘程伟赵宁张佳林刘永锋
- 关键词：血小板源性生长因子B转染脂质体
- 真核表达载体血管内皮生长因子转染血管内皮细胞及对新生血管形成的影响被引量：2
- 2008年
- 背景:血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)能与存在内皮细胞表面的特异性受体结合,刺激体内新生血管形成,但在体内半衰期极短,在移植局部难以维持足够的浓度,限制了其临床应用。目的:观察VEGF与增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent,EGFP)共表达载体转染对大鼠血管内皮细胞形成新生血管的影响。设计、时间及地点:随机分组设计、对照动物实验,于2004-09/2005-01在中国医科大学附属第一医院器官移植实验室完成。材料:30只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为3组,每组10只。质粒pIRES2-EGFP/VEGF165由第四军医大学提供。方法:采用层析法大量提取pIRES2-EGFP/VEGF165质粒,采用阳性脂质体法进行转染,计数1×106血管内皮细胞植入雄性Wistar大鼠肾被膜下。实验组:植入转染质粒pIRES2-EGFP/VEGF165的内皮细胞;空白转染组:植入转染质粒pIRES2-EGFP的内皮细胞;对照组:植入正常大鼠血管内皮细胞。主要观察指标:①转染72h后观察EGFP及VEGF表达情况。②流式细胞仪检测转染效率。③植入后14d苏木精-伊红染色观察植入血管内皮细胞处组织形态学变化。结果:30只大鼠均进入结果分析。①荧光显微镜下实验组内皮细胞有特异性的EGFP表达。②流式细胞仪分析转染效率为13.06%。③实验组血管内皮细胞胞核和胞浆中均有VEGF表达。反转录-聚合酶链反应显示实验组大鼠血管内皮细胞中有人源化VEGF165基因在mRNA水平表达。④移植后14d,实验组大鼠肾被膜下可见成团的新生毛细血管网形成,而对照组及空白转染组虽血管内皮细胞仍存活,但未形成明显血窦。结论:转染VEGF基因是促进内皮细胞早期(14d内)形成新生血管的有效途径。
- 赵宁程颖刘永锋张佳林李铁民
- 关键词：血管内皮生长因子转染血管形成
- 一氧化氮在大鼠胰腺缺血/再灌注中的变化及作用被引量：4
- 2005年
- 目的:探讨一氧化氮(NO)在大鼠胰腺缺血/再灌注损伤中的变化及作用。方法:雄性W istar大鼠随机分成3组:A、B组胰腺缺血30 m in后,再灌注2,4,6,12,24 h。B组再灌注前使用诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂,A组仅给与生理盐水。C组仅行假手术。进行大鼠血清中NO水平和淀粉酶活性检测,胰腺组织形态学观察和免疫组化分析。结果:再灌注4 h后,A组iNOS表达于胰腺组织,B组无表达。此时A组NO水平达到高峰,淀粉酶活性开始升高,均高于B组(P<0.01)。再灌注6 h后,A组显微镜下观察到胰腺损伤的表现,B组未见。C组无iNOS表达,血清NO水平和淀粉酶活性均在正常范围。结论:随着再灌注时间的延长,iNOS表达于胰腺组织,NO在大鼠胰腺缺血/再灌注损伤中的有害作用占主导地位。
- 李柏峰刘永锋程颖成东华王晓东李铁民
- 关键词：胰腺一氧化氮诱导型一氧化氮合酶
- 抑制核因子-κB减轻腹主动脉瘤破裂所致多脏器损伤的实验研究被引量：10
- 2006年
- 目的研究抑制核因子-κB(NF-κB)激活对大鼠破裂腹主动脉瘤(RAAA)模型多脏器损伤的影响。方法Wistar大鼠45只,随机分为假手术组、实验组和吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)组(每组15只)。实验组和PDTC组均通过大鼠模型模拟腹主动脉瘤破裂的病理生理过程包括失血性休克期1h、腹主动脉阻断45min、再灌注2h。实验组和PDTC组在失血休克期分别静脉给予生理盐水或PDTC50mg/kg。取肺、小肠组织,观察组织形态学改变,测定肺组织湿/干重比、髓过氧化物酶(MPO)及小肠微循环血流量的变化。逆转录多聚酶链反应检测肺、小肠NF-κB p65和细胞间黏附分子(ICAM)-1的mRNA表达,免疫组织化学和Western印迹检测NF-κB p65、ICAM-1的蛋白产物表达。结果实验组中,肺PMN计数(39个±8个)/HP,湿/干重比(7.6±1.2),与假手术组(11个±3个/HP,3.3±0.8)比较差异均有统计学意义(P<0.01);小肠微循环血流量显著减少与假手术组(0.71ml.min-1.g-1±0.11ml.min-1.g-1)比较差异有统计学意义(P<0.01);实验组肺及小肠NF-κB p65和ICAM-1的mRNA及蛋白产物表达均明显增强;应用PDTC干预后,小肠微循环血流量(0.64ml.min-1.g-1±0.06ml.min-1.g-1)与实验组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论抑制NF-κB激活可以减轻大鼠RAAA模型多脏器功能损伤,其作用机制可能是通过抑制ICAM-1基因及其蛋白产物的表达,减少中性粒细胞的作用而实现的。
- 杨军胡新华刘程伟张志深李铁民杨德华张强
- 关键词：多脏器功能衰竭黏附分子-1
- 联合阻断CD28和可诱导共刺激分子对小鼠同种异体胰岛移植物急性排斥反应的影响被引量：6
- 2007年
- 目的在小鼠同种异体胰岛移植模型上,通过联合阻断CD28和可诱导共刺激分子(ICOS),观察CTLA-4Ig及ICOS单克隆抗体(ICOSmAb)对胰岛移植物功能的影响。方法将小鼠随机分成4组,每组10只。联合阻断组:分别于移植后0、2、4 d和1、3、5 d腹腔内注射CTLA-4Ig 50μg/ kg和ICOSmAb 100μg/kg体重组。ICOS组:移植后1、3、5 d腹腔内注射ICOSmAb 100μg/kg体重组。CTLA4组:移植后0、2,4d腹腔内注射CTLA-4Ig 50μg/kg体重组。对照组:单纯胰岛移植,不做CT- LA-4Ig和ICOSmAb处理组。观察术后移植物存活时间和病理改变,RT-PCR检测移植组织中IL-2、IL-10mRNA表达,流式细胞仪检测CD4^+、CD8^+T淋巴细胞表达。结果联合阻断组小鼠移植物存活时间平均为(31.00±6.57)d,较其他3组延长,差异有统计学意义(P<0.05);IL-2和IL-10 mRNA表达水平分别为(44.23±6.24)和(65.23±11.02),与其他3组比较,IL-2 mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05),而IL-10mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05);CD4^+、CD8^+T淋巴细胞荧光阳性百分率分别为(13.73±0.49)%和(14.56±0.31)%,表达上调均不明显;移植胰岛光镜检查接近正常。结论应用CTLA-4Ig和ICOSmAb联合阻断CD28和ICOS,可以明显抑制胰岛移植物排斥反应。
- 赵国华张佳林许国岩钟鑫平李铁民赵宁刘永锋
- 关键词：胰岛排斥反应
- 老年心脏病及糖尿病病人勃起功能障碍的临床影响因子及早期干预被引量：5
- 2006年
- 目的分析老年心脏病及糖尿病勃起功能障碍(ED)病人的临床影响因子并进行干预。方法以问卷调查方法,根据患者的自我评价诊断ED,根据国际勃起功能指数(IIEF)评分,将患者分为功能正常组(IIEF≥12)及勃起功能轻、中、重度异常组(IIEF<12)。100例60岁以上ED病人,同期40岁以下ED病人40例作为对照,分别比较两组患者的ED患病率、认知率、治疗率及对整体生活满意的比例,以及年龄、吸烟、疾病、治疗对ED患病率及严重程度的影响。两组患者常见危险因子、体质指数及勃起功能(EF)积分的差异。结果60岁以上组与对照组相比,以器质性ED为主81%对54%,病程为(13.28±0.77)年对(382±0.46)年,伴常见危险因子者为91%对12%,体重质指数为(28.56±0.46)对(23.38±0.45),IIEF积分为(9.98±0.48)分对(12.56±0.46)分。两组病因组成、病程、常见危险因子伴随者比例及EF积分有显著差异(P<0.01)。结论老年ED病人以器质性ED为主,伴随常见危险因子增多,病程延长,ED加重。干预适于早期。
- 陈思娇杨野李铁民李廷富
- 关键词：勃起功能障碍
- 表皮生长因子介导的NF-κB促进胰腺癌细胞MMP-9表达及侵袭的实验研究被引量：6
- 2009年
- 目的观察表皮生长因子(EGF)对胰腺癌细胞增殖、黏附及侵袭力的影响及其对核因子-κB(NF-κB)和细胞基质金属蛋白酶(MMPs)表达的影响,探讨EGF促进胰腺癌侵袭的相关机理。方法通过细胞增殖、黏附及侵袭实验,观察在EGF影响下胰腺癌细胞黏附、增殖及侵袭能力变化;通过RT-PCR、MMPs明胶酶谱分析、Western blot及EMSA,检测胰腺癌细胞的MMP-2和MMP-9 mRNA及其蛋白表达以及NF-κB活性变化;并观察NF-κB抑制物吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对EGF诱导的胰腺癌细胞NF-κB活性、MMP-9 mRNA及其蛋白表达以及肿瘤细胞侵袭力的变化。结果EGF能够增强胰腺癌细胞的侵袭能力,具有剂量依赖性(P<0.05)。EGF对胰腺癌细胞的黏附力及增殖力无明显影响。EGF处理后,肿瘤细胞的MMP-9蛋白和mRNA表达明显升高,EGF浓度为50 ng/ml时,肿瘤细胞的MMP-9表达最强,但对MMP-2蛋白和mRNA的表达则无影响。随着EGF浓度的增加,NF-κB活性增强,具有浓度依赖性(P<0.05)。与EGF单独处理相比,经PDTC和EGF共同处理后的胰腺癌细胞NF-κB活性与MMP-9蛋白和mRNA表达均降低;PDTC和EGF共同处理后的胰腺癌细胞侵袭力较EGF单独处理和对照均减弱(P<0.05)。结论EGF通过激活NF-κB的活性,诱导MMP-9表达,促进胰腺癌细胞的侵袭,而这一过程可以被PDTC抑制。
- 刘宇张浩杨野王欣李铁民郭仁宣
- 关键词：表皮生长因子胰腺癌核因子-ΚB
- 腺苷对大鼠胰腺缺血再灌注损伤的保护作用
- 2007年
- 随着胰肾联合移植在临床的广泛应用和重症胰腺炎治疗的进展，胰腺的再灌注损伤（I／R）逐渐受到重视。现在认为I／R是一个多因素互相影响的网络化的病理生理过程。腺苷（ADO）在组织的I／R中起着重要的作用。本实验研究外源性腺苷在大鼠胰腺I／R的作用和机制。
- 王晓东刘永锋程颖李柏峰成东华李铁民赵宁
- 关键词：胰腺缺血再灌注损伤外源性腺苷大鼠胰腺胰肾联合移植病理生理过程胰腺炎治疗
- 氨基胍对大鼠胰腺移植保护作用的实验研究被引量：1
- 2008年
- 目的探讨诱导型一氧化氮合酶抑制剂氨基胍对大鼠移植胰腺的保护作用。方法糖尿病大鼠模型30只随机分成3组:(1)空白对照组(n=6),仅开腹手术,不作移植;(2)移植对照组(n=6),仅作胰腺移植;(3)氨基胍处理组(n=18),移植胰腺恢复血运前经阴茎背静脉注入盐酸氨基胍(AG)溶液,剂量分别为60,80,100mg/kg。再灌注4h后检测血清一氧化氮(NO)水平,血糖以及淀粉酶活性,定量分析胰腺组织中的结构型一氧化氮合酶(cNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性,并对胰腺进行组织形态学和组织化学检查。结果与移植对照组比较,氨基胍处理组血NO水平及淀粉酶活性明显降低,胰腺病理损害较轻,其中以AG80mg/kg亚组效果更显著(P<0.01),且该亚组血糖及iNOS活性与表达也明显低于移植对照组(P<0.01)。结论诱导型一氧化氮合酶选择性抑制剂氨基胍在大鼠胰腺移植中起到保护作用。其作用机制可能与抑制NO的过量产生,减轻其作为自由基的细胞毒性有关。
- 李柏峰张克忠刘永锋程颖成东华李铁民
- 关键词：胰腺移植缺血再灌注氨基胍
