李良材 作品数:24 被引量:676 H指数:18 供职机构: 中国科学院遗传与发育生物学研究所 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 美国洛克菲勒基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
一对粳稻细胞质雄性不育系与恢复系的DNA限制性片段长度的多态性分析 被引量:9 1992年 通过对粳稻细胞质雄性不育系秀岭 A 和 C8411的染色体限制性片段长度的多态性分析,定量地评估了它们的 F_1杂种基因组的杂合性。在评估时,总共检测了12对染色体上的122个位点,使用9种不同的限制性内切酶,结果发现,在26%的位点中有等位的差异,而且呈现多态性的位点不是随机或均匀地分布在不同的染色体上的。根据揭示多态性的限制性内切酶的数量,可将秀岭 A 和 C8411间的多态性分为二大类。本文还讨论了进一步用限制性片段长度多态性的分析技术研究杂种优势与基因组杂合性的途径。 朱立煌 徐吉臣 胡乃璧 李良材 杨振玉关键词:RFLP 三系配套 恢复系 用基因枪法获得抗白粉病转芪合酶基因小麦 被引量:48 1999年 芪类物质是一种植保素 ,它在植物抵抗真菌和细菌感染时起重要作用 .用基因枪法将来源于葡萄中的芪合酶基因 (Vst1 )转入普通春小麦品种京红 5号 ,并获转基因植株 .从轰击的 2 0 1 4块幼胚盾片中 ,获得了 5个转化植株 (T0 代 ) ,并从其中 2株的T3 代单株中鉴定出 1个对白粉病免疫植株和 3个对白粉病中抗植株 . 梁辉 郑近 段霞瑜 盛宝钦 贾双娥 李义文 唐顺学 欧阳俊闻 李家洋 李良材 田文忠 贾旭关键词:小麦 白粉病 基因枪法 转基因植株 玉米单染色体的分离和体外扩增 被引量:40 1998年 建立了玉米单染色体的分离及体外扩增的方法。取95%乙醇固定后经果胶酶和纤维酶酶解的根尖制备染色体标本,用自制的微细玻璃针在倒置显微镜下挑取目的染色体。染色体DNA经Sau3A酶切后与人工合成的Sau3A连接接头连接,经两次PCR扩增获得足以用于构建单染色体DNA文库的扩增产物。片段大小为0.3~5kb,多数为0.5~3.5kb.与前人研究方法相比,所需底物量少(只需1条染色体),扩增片段大,为植物中小型染色体分离、体外扩增进而进行单染色体DNA文库构建奠定了基础。 胡赞民 党本元 周奕华 崔丽华 王兰岚 张铁汉 李良材 陈正华关键词:玉米 染色体 DNA扩增 抑制衰老的嵌合基因在水稻中的转化 被引量:54 1998年 利用基因枪法把带有特异衰老基因SAG12 启动子的IPT基因导入水稻 ,经PCR、点杂交以及Southern杂交分析 ,证明外源基因已整合到水稻基因组中 .通过GUS活性、细胞分裂素含量的分析以及T1代转基因植株成熟期的形态观察 ,证明此抑制衰老的自我调节系统在部分转基因水稻中表达 。 付永彩 丁月云 刘新仿 孙传清 曹守云 王东江 何锶洁 王象坤 李良材 田文忠关键词:水稻 基因枪转化 叶片 嵌合基因 王百合单染色体DNA文库的构建 被引量:30 1998年 以王百合为模式植物建立了简单快速分离植物单染色体及扩增和克隆其DNA的方法 ,即显微操作分离单个染色体并放入Eppendorf管中 ,经Sau 3A酶切后在染色体DNA片段两端加上Sau 3A寡核苷酸人工接头 ,然后以寡核苷酸人工接头中的一条链为引物进行两轮PCR扩增 .PCR产物为 30 0~ 2 50 0bp ,多数为10 0 0bp左右 ,经Southern杂交证实PCR产物来自王百合基因组DNA .对单染色体第二轮PCR产物进行克隆 ,构建单染色体DNA文库 ,得到约 10 0 0 0 0个重组子 .对其中 84个重组子进行分析 ,插入片段为 30 0~180 0bp ,平均为 780bp .与以往方法相比 ,此方法避免了在纳升体积内酶解、连接等操作 ,扩增底物只需一条染色体而不是以往的几十条 ,而且克隆片段 (平均 780bp)大于以往的报道 (平均 6 50bp) . 党本元 胡赞民 周奕华 崔丽华 王兰岚 李良材 陈正华关键词:单染色体 DNA文库 遗传育种 虎尾草条纹花叶病毒DNA克隆对小麦的农杆菌侵染 1992年 虎尾草条纹花叶病毒(CSMV)属于双生病毒,其基因组为单链环状DNA。但在被侵染的植物中可形成复制型的病毒双链DNA。寄主植物为单子叶植物的双生病毒有CSMV、玉米线条病毒(MSV)、玉米矮缩病毒(MDV)和马唐线条病毒(DSV)等。本研究的目的是企图用这类病毒对单子叶植物的侵染性构建禾谷类植物的基因转移载体。 邱并生 刘玉乐 田波 田文中 李良材 李小兵 朱立煌关键词:DNA克隆 农杆菌侵染 小麦 水稻花粉植株的产生、特性与应用的基础研究 1999年 陈英 田文忠 李良材 何平 朱立煌关键词:花粉植株 水稻花药培养 加倍单倍体 小孢子 数量性状 抗性突变体 植物抗毒素转化水稻和转基因植株的生物鉴定(英文) 被引量:59 1998年 用基因枪法转化了水稻(OryzasativaL.)6个材料的未成熟胚、成熟胚及胚性愈伤组织。质粒pSSVst1和pVE5+是由葡萄中分离出的编码芪类合成酶的植物抗毒素基因与35S或它自己的启动子组成。G418(100~150mg/L)或潮霉素(50mg/L)筛选后,经PCR、Southernblot或Dotblot分析证明的转基因植株共54株。对转基因植株及其后代进行了稻瘟病和白叶枯病的抗性鉴定。初步结果表明,芪类合成酶基因可以提高转基因植株及后代的抗性。 田文忠 丁力 曹守云 戴顺洪 叶松青 李良材关键词:水稻转化 白叶枯病抗性 提高小麦基因枪法转化频率的研究 被引量:31 1999年 用基因枪法将带Bar-GUS双标记基因的质粒(pAHC25)转入普通春小麦品种中─60634的幼胚盾片,并获转基因植株。在轰击的经预培养3~4天的342块幼胚盾片再经筛选再生的植株中,经PCR和Southern分析表明,外源基因已稳定整合到小麦基因组中,转化率为0.88%。此外发现,幼胚培养基中用2mg/Ldicamba代替2mg/L2,4-D,可提高愈伤组织的再生能力。同时,为了保持小麦幼胚愈伤组织的分化能力,在诱导愈伤组织阶段5mg/Lbialaphos的筛选时间以不超过1个月为宜,及早转入3mg/Lbialaphos分化及壮苗培养基筛选转基因植株。 梁辉 唐顺学 张弛 赵铁汉 李良材 欧阳俊闻 田文忠 王道文 贾旭关键词:小麦 DICAMBA 基因枪法 转基因工程 抗菌肽B基因导入水稻及转基因植株的鉴定 被引量:111 1997年 构建了一个适合在水稻中表达的含有抗菌肽B基因的转化载体(pCB1),应用基因枪转化法将其导入水稻未成熟胚,获得了一些转基因水和植株.Basta抗性鉴定,抗菌肽B基因PCR扩增分析,点渍印迹和Southern印迹分析结果表明,选择标记基因(bar)和抗菌肽B基因都已整合入转化水稻基因组中,Northern印迹分析证实了抗菌肽B基因在RNA水平上的表达.转基因水稻植株增强了对水稻白叶枯病和细条病的抗性. 黄大年 朱冰 杨炜 薛锐 肖晗 田文忠 李良材 戴顺洪关键词:水稻 转基因植株