李晓伟
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金第三军医大学西南医院临床创新基金贵州省优秀科技教育人才省长资金项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同抗原识别方式对同种异体抗原特异性Treg免疫特性的影响
- 2010年
- 目的探讨不同抗原识别方式对同种异型Treg免疫学特性的影响,求证间接识别方式在特异性Treg的生成中是否存在关键作用。方法取移植前受者PMBC,通过磁珠分离获得CD4+CD25-T细胞。同时取供者PB-MC于含rhGM-CSF75ng/ml、rhIL-425ng/ml和雷帕霉素(20ng/ml)的完全培养基中常规培养5d。收集培养4d后的树突状细胞并加入供者PBMC裂解液以使扩增的DC负载供者抗原共培养3d。再将分离纯化的CD4+CD25-T细胞和负载供者抗原的受者树突状细胞共培养5d;同时加入IL-2(10ng/ml)、雷帕霉素(20ng/ml)促进细胞增殖并诱导Treg1生成。同时在Treg诱导生成时不加入负载供者抗原的受者树突状细胞,而直接采用供者PBMC作为APC,通过直接抗原识别方式生成Treg2。并比较2种方式生成的Treg的免疫特性。结果通过间接抗原识别方式生成的Treg1其增殖抑制率为63.5%,优于45.8%的直接抗原识别方式生成的Treg2。结论与直接抗原识别方式相比,间接抗原识别机制可产生更过量、特异性免疫抑制作用更强的Treg,天然Treg不能满足移植术后诱导免疫耐受的需要。
- 李晓伟刘宏吴雄飞徐述雄
- 关键词：抗原识别TREG树突状细胞
- IL-15通过Bcl-xl抑制CD4^+CD25^+调节性T细胞凋亡被引量：5
- 2010年
- 目的探讨IL-15抑制CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)凋亡的作用及机制,为临床应用IL-15提供理论依据。方法采用免疫磁性细胞分离法分离人外周血中的Tregs,流式细胞仪检测该细胞纯度。将Tregs细胞培养液中加入Dynabeads CD3/CD28T cell expander,依据是否加入细胞因子分为三组:对照组(不加入任何细胞因子);IL-2组(100U/ml)和IL-15组(50ng/ml)。流式细胞仪检测细胞凋亡率,3H-TdR掺入法检测细胞因子存在下Tregs抑制CD4+CD25-效应T细胞(Teff)增殖的免疫功能,Western-blot法检测细胞内Bcl-2、Bcl-xl及p-Bad(ser112)的变化。结果分选后Tregs纯度为95.2%,胞内因子染色Foxp3在Tregs中的表达率为94.2%。IL-2组和IL-15组的细胞凋亡率(即凋亡细胞与细胞总数之比)分别为(11.32±0.43)%和(9.89±5.38)%,二者之间无显著性差异,但均显著低于对照组(87.12±1.43)%,P<0.001。在细胞因子存在的情况下,IL-2组活化的Teff增殖较对照组和IL-15组显著性强,P<0.001;此时Tregs抑制Teff增殖的功能较对照组和IL-15组下降,P<0.001;而在IL-15存在的情况下,IL-15组活化的Teff增殖与对照组比较,无显著性差异,P>0.05,并且IL-15组Tregs对Teff增殖的抑制作用与对照组比较无显著性差异,P>0.05。Western-Blot显示三组TregsBcl-2表达水平相当;但是IL-2组和IL-15组的Bcl-xl和p-Bad(ser112)表达较对照组显著性上调。结论 IL-15能抑制Tregs凋亡,其作用与IL-2相当,其机制可能是通过上调Bcl-xl的表达和Bad(ser112)的磷酸化,而且IL-15存在的情况下,Tregs抑制功能明显比IL-2存在时强。
- 徐述雄李晓伟孙兆林何坚陈丽萍吴雄飞刘宏
- 关键词：白介素15凋亡调节性T细胞
- 不同抗原识别方式对同种异体抗原特异性Treg免疫特性的影响
- 目的: 探讨不同抗原识别方式对同种异型Treg免疫学特性的影响，求证间接识别方式在特异性Treg的生成中是否存在关键作用。
方法: 取移植前受者PMBC，通过磁珠分离获得CD4+CD25-Tcell。同时取供者...
- 李晓伟刘宏吴雄飞徐述雄
- 关键词：免疫学特性
- 文献传递
- IL-15诱导CD4^+CD25^- T细胞向CD4^+CD25^+调节性T细胞转化的机制探讨被引量：4
- 2010年
- 目的初步探讨IL-15诱导CD4+CD25-T细胞向CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)转化的机制。方法采用免疫磁性细胞分离法分离人外周血中的CD4+CD25-T细胞,依据加入细胞因子不同分为4组:对照组、IL-15组、拮抗1组、拮抗2组,其中后3组均于培养的第1天加入IL-15,而拮抗1组和拮抗2组分别于培养第1、3天加入STAT5a封闭性肽。流式细胞仪检测细胞表型变化,3H-TdR掺入法检测IL-15诱导产生的Tregs抑制CD4+CD25-效应T细胞(Teff)增殖的免疫功能,Western blot法检测细胞内p-STAT5的变化。结果与对照组比较,IL-15能诱导CD4+CD25-T细胞中CD25和Foxp3表达上调,IL-15诱导生成的Tregs具有较天然Tregs稍弱的免疫抑制功能。Western blot检测结果显示,IL-15组p-STAT5表达较对照组明显上调。加入STAT5a封闭性肽后,拮抗1组和拮抗2组中CD4+CD25-T细胞中CD25和Foxp3表达下调,但拮抗2组[细胞表型分别为(47.9±6.0)%、(20.7±3.4)%]改变较拮抗1组[细胞表型分别为(30.7±8.5)%、(9.2±2.2)%]改变轻微。结论IL-15能诱导CD4+CD25-T细胞向Tregs转化,其机制可能是上调p-STAT5的表达。
- 徐述雄傅晓岚孙兆林李晓伟陈丽萍刘宏吴雄飞
- 关键词：白介素-15调节性T细胞T细胞
