李恒 作品数:6 被引量:21 H指数:2 供职机构: 四川大学华西基础医学与法医学院 更多>> 发文基金: 美国中华医学基金会项目 国家自然科学基金 美国中华医学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
兔胸腺HMGN2的分离纯化鉴定 被引量:1 2008年 目的:分离纯化鉴定兔高迁移率非组蛋白N2(High mobility group chromosomal protein N2,HMGN2)。方法:利用液氮研磨和5%高氯酸从新鲜兔胸腺组织获得酸溶性萃取物,经反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离得到HMGN2,经过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western-blotting对HMGN2进行分子量测定和特异性鉴定。并利用琼脂糖弥散抑菌实验对其杀菌活性进行鉴定。结果:利用上述方法分离纯化出高纯度的兔HMGN2。对大肠埃希菌临床分离株54080、大肠埃希菌ATCC25922有明显杀菌活性。结论:建立简单分离高纯度的HMGN2的方法。 石艳娥 李恒 彭媛媛 邓璐霞 周新娥 赵媛 黄宁关键词:HMGN2 HMGN2分离制备及其趋化性研究 2006年 目的:建立分离天然HMGN2的方法并研究其抗菌性与对中性粒细胞的趋化活性。方法:5%高氯酸对子宫纤维囊腺瘤组织进行萃取,萃取物通过反相高效液相色谱(RP-HPLC)直接进行分离,Tricine-SDS-PAGE,AU-PAGE和Western-Blot对蛋白分子进行鉴定,采用Transwell实验检测HMGN2对中性粒细胞的趋化性。结果:分离出高纯度的HMGN2,HMGN2对大肠杆菌有杀菌活性但HMGN2在体外不能趋化中性粒细胞运动。结论:建立简单、直接分离高纯度的天然HMGN2的方法,有助于对其进一步研究,我们发现HMGN2对大肠杆菌有杀菌活性但它不能通过趋化中性粒细胞发挥作用。 李恒 周新娥 史恺 路会侠 黄宁 王伯瑶关键词:抗菌活性 趋化性 高氯酸 HMGN2的重组表达质粒的构建及其抗菌功能研究 被引量:7 2005年 目的:构建HMGN2重组表达载体,探讨HMGN2分子抗菌作用。方法:用基因克隆的方法构建pET-32 a-c(+)-HMGN2重组表达质粒,经IPTG诱导表达后,用亲和层析的方法纯化H is-HMGN2融合蛋白,Tric ine-SDS-PAGE电泳鉴定其分子量,行琼脂糖弥散法检测其抗菌功能。结果:成功构建了pET-32 a-c(+)-HMG17重组表达质粒,其表达的融合蛋白对致病性大肠杆菌54080,54299以及金黄色葡萄球菌ATCC25923均有抗菌活性。结论:HMGN2是一种抗菌分子,可能参与了体内的天然免疫防御作用。 马懿 冯云 李恒 黄宁 吴琦 王伯瑶关键词:HMGN2 重组表达质粒 抗菌功能 抗菌作用 SDS-PAGE电泳 致病性大肠杆菌 人血红蛋白及其片段体内外抗菌活性研究 被引量:11 2008年 目的分离人血红蛋白及其片段,进行体外抗菌活性分析和比较,并对血红蛋白体内抗菌活性进行初步探讨。方法利用阳离子交换及分子筛分离人血红蛋白α、β链;溴化氰法裂解α/β链,反相高效液相色谱技术纯化其片段;琼脂糖弥散法抑菌实验检测抗菌活性;构建大鼠大肠埃希菌阴道感染模型,设立实验组(血红蛋白组)和对照组,观察各组大鼠阴道组织形态学变化。结果体外抑菌实验示:血红蛋白、α/β链及其片段有抑菌作用,但其主要针对的是革兰阴性菌大肠埃希菌;而且除α1~32的抑菌作用较弱外,血红蛋白、α/β链及其片段三者抑菌活性比较,其效能基本相似。大鼠体内抗菌实验示:与基质对照组(感染后不治疗)比,血红蛋白组阴道复层扁平上皮表层较平滑,固有层内炎细胞浸润明显减少,且组织内充血明显减轻。结论人血红蛋白及其片段具有体外抑菌活性,而且血红蛋白在大鼠体内能减轻大肠埃希菌阴道感染炎症程度。 周新娥 欧阳运薇 潘小玲 何跃东 李恒 邓璐霞 石艳娥 彭媛媛 赵媛 黄宁关键词:人血红蛋白 片段 抑菌 用CM Sepharose FF柱分离人血红蛋白α、β链 2006年 目的:建立分离纯化血红蛋白α、β链方法。方法:对二氯汞苯甲酸(CPMB)处理的血红蛋白经CM Sepharose FF柱分离出结合有CPMB的α、β链,然后分别过Bio-gel p6柱除去α、β链上结合的CPMB。Tricine SDS-PAGE检测蛋白分子量、纯度,采用琼脂糖弥散法监测抑菌效应。结果:该法成功分离出具较高纯度的血红蛋白α、β链,二者均具有杀大肠杆菌活性。结论:本分离程序简单、经济,可得到高纯度的天然α、β链,有助于对其后续的进一步研究。 周新娥 李恒 熊文碧 邓璐霞 黄宁 王伯瑶血红蛋白抗大鼠大肠埃希菌阴道感染研究 被引量:2 2010年 目的:探讨血红蛋白在大鼠体内是否具有抗菌抑炎作用。方法:构建大鼠阴道感染模型后随机设立实验组和对照组,阴道给予血红蛋白后观察子宫宫颈阴道脏器指数,并采用组织病理切片检测血红蛋白治疗前后各组指标变化。结果:子宫宫颈阴道脏器指数经统计学分析示血红蛋白组、模型对照组间无差异(P>0.05),基质对照组与前两组比均有显著性差异(P<0.05),基质对照组的脏器指数增加明显。结论:血红蛋白能减轻大鼠大肠埃希菌阴道感染炎症病变程度。 周新娥 欧阳运薇 潘小玲 何跃东 李恒 邓璐霞 黄宁 吴琦关键词:血红蛋白