李德军
- 作品数:82 被引量:159H指数:6
- 供职机构:中国热带农业科学院橡胶研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中国热带农业科学院橡胶研究所基本科研业务费专项项目海南省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 一种辅助筛选籼稻和粳稻的方法及其专用引物
- 本发明公开了一种辅助筛选籼稻和粳稻的方法及其专用引物。该方法,是检测待测水稻基因组中编码序列表中序列4所示蛋白的基因中是否缺失如下a)或b)所示片段,若缺失,则所述待测水稻为候选籼稻,若不缺失,则所述待测水稻为候选粳稻:...
- 李德军朱立煌李晓兵
- 文献传递
- 巴西橡胶树Profilin基因克隆及生物信息学分析被引量:2
- 2011年
- 为了研究橡胶树中Profilin蛋白的功能,利用橡胶树Profilin基因部分已知序列设计引物,采用3′-RACE技术获得Profilin基因完整开放阅读框,该基因编码131个氨基酸,含有一个保守的PROF结构域。在HbPro1蛋白中没有预测到跨膜区和信号肽,二级结构分析表明HbPro1属于混合型蛋白。对25个Profilin蛋白系统进化分析表明,HbPro1在进化上具有保守性,属植物类Profilin蛋白家族。HbPro1基因的克隆和生物信息学分析为深入研究其功能奠定了基础。
- 李德军刘向红邓治
- 关键词:巴西橡胶树基因克隆
- 橡胶树胞质型谷胱甘肽还原酶基因的克隆与表达分析被引量:4
- 2014年
- 根据橡胶树GR1基因(Hb GR1)部分序列设计特异引物,运用RACE和RT-PCR技术克隆Hb GR1全长c DNA序列;运用DNAMAN、MEGA 6.06、Prot Param及Signal P 4.1 Server等生物信息学软件对Hb GR1序列、GR1系统进化关系及Hb GR1的基本理化性质和亚细胞定位等进行分析;利用实时荧光定量PCR技术研究Hb GR1的表达模式;构建原核表达载体p EASYE1-Hb GR1,并将其转入大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导融合蛋白原核表达。获得2 082 bp的Hb GR1全长c DNA,其中5′非编码区293 bp,3′非编码区298 bp,开放阅读框长1 491 bp,共编码496个氨基酸,其编码的蛋白分子质量约为53.68 k Da,理论等电点p I为6.18。序列分析发现Hb GR1无信号肽,在氨基酸水平上与其他植物GR1具有很高的同源性,包含植物GR典型的NADH结合结构域、二聚体结构域和高度保守的GGTCV[I/L]RGCVPKK[I/L]LVY基序。对植物GR进行系统进化分析表明,Hb GR1属于双子叶植物GR分枝,与同属大戟科的蓖麻亲缘关系最近。实时荧光定量PCR结果表明Hb GR1在橡胶树胶乳、叶片、树皮和花中均表达;Hb GR1表达受死皮、乙烯、茉莉酸、过氧化氢和伤害调控。SDS-PAGE电泳结果表明重组质粒p EASY-E1-Hb GR1在大肠杆菌BL21(DE3)中有效表达一个分子量约为55 k Da的融合蛋白。
- 邓治刘辉王岳坤李德军
- 关键词:橡胶树氧化胁迫原核表达
- 来源于橡胶树具有抗氧化功能的蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种来源于橡胶树具有抗氧化功能的蛋白及其编码基因与应用。本发明所提供的具有抗氧化功能的蛋白是如下(a)或(b):(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(b)将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基...
- 邓治聂智毅李德军
- 文献传递
- 巴西橡胶树TIM23-1基因克隆、进化及表达分析被引量:2
- 2015年
- 本研究采用RACE技术,从巴西橡胶树中鉴定出一个线粒体内膜转位因子TIM23基因。该基因全长c DNA为898 bp,最长开放阅读框567 bp,预测编码蛋白包含188个氨基酸;序列比对分析发现,该基因编码蛋白具有转膜区和PRAT结构域,与拟南芥TIM23-1蛋白具有较高的相似性,将该基因命名为Hb TIM23-1。实时定量RT-PCR分析结果表明,Hb TIM23-1在巴西橡胶树胶乳、叶片、树皮、雄花、雌花、花药中均有表达。在橡胶树叶片不同发育时期,Hb TIM23-1表达存在变化。与健康橡胶树相比,死皮橡胶树胶乳中Hb TIM23-1表达量明显下降。研究发现Hb TIM23-1表达受干旱和低温处理调控,表明HbTIM23-1可能在巴西橡胶树干旱和低温胁迫应答及死皮中发挥作用。
- 陈江淑邓治刘辉范玉龙姜达夏立琼夏志辉李德军
- 关键词:巴西橡胶树死皮基因克隆
- 一种橡胶树HCN快速检测方法及其应用
- 本发明提供一种橡胶树HCN快速检测方法,包括以下步骤:(1)取N,N,N',N'‑四甲基‑4,4'‑二氨基二苯甲烷和乙酰乙酸乙酯铜,混合均匀,加入氯仿溶解,制得显色液;(2)将滤纸加入显色液浸泡,取出,晾干,滤纸表面喷施...
- 杨洪李德军代龙军王立丰赵溪竹
- 巴西橡胶树伤害诱导蛋白基因的克隆及表达分析被引量:1
- 2012年
- 为了研究橡胶树在逆境胁迫下的分子机制,根据巴西橡胶树抑制消减(SSH)文库和NCBI数据库中的伤害诱导蛋白基因拼接序列设计嵌套引物,通过RACE技术获得基因的完整开放阅读框,命名为HbWUN1。序列分析表明HbWUN1长872bp,含有390bp的开放阅读框,编码129个氨基酸。生物信息学分析结果表明HbWUN1不含信号肽和跨膜结构,为亲水性蛋白。进化分析结果显示,橡胶树HbWUN1与拟南芥NP_974279.1聚成一类。RT-PCR分析结果表明HbWUN1表达无组织特异性,在胶乳中表达量最高。在叶片不同发育时期HbWUN1表达存在变化,在衰老期最高。此外,低温、伤害、高盐、乙烯和茉莉酸处理均调控HbWUN1表达,推测其可能在橡胶树逆境反应中发挥作用。
- 刘向红邓治李德军
- 关键词:橡胶树基因
- 一种用于检测橡胶树HCN的检测试剂及制备方法
- 本发明提供一种用于检测橡胶树HCN的检测试剂,以氯仿为溶剂,每20~25mL氯仿含有4,4'‑二氨基二苯甲烷10~15g、乙酰乙酸乙酯铜10~15g、海藻酸钠聚合物2~5g和聚乙烯吡咯烷酮5~8g。本发明制备的检测试剂可...
- 杨洪李德军代龙军王立丰赵溪竹
- 一种杜仲良种种苗快速繁育方法
- 本发明属植物栽培技术领域,涉及一种杜仲良种种苗快速繁育方法,是选择杜仲良种苗木作为母株,定干后将母株带土挖出,然后装入苗木袋中置于放置地,再进行水肥管理,待新生苗达到苗高50cm、地径0.5cm时移栽。本发明操作简单,管...
- 李德军杜红岩杨洪杜庆鑫任小青纪向云印汉
- 文献传递
- 巴西橡胶树HbAIH基因的克隆及表达分析被引量:2
- 2020年
- 鲱精胺亚胺水解酶(Agmatine iminohydrolase,AIH)是植物通过精氨酸途径合成多胺过程中的重要酶之一。本研究首次从巴西橡胶树中克隆了AIH基因HbAIH。序列分析结果表明HbAIH全长1 462 bp,开放阅读框长为1 137 bp,编码378个氨基酸。预测 HbAIH 蛋白的分子量是42.28 kD,等电点为5.09,是一个亲水性蛋白。氨基酸相似性比对结果表明HbAIH与大戟科木薯MeAIH、蓖麻RcAIH和麻风树JcAIH等具有很高相似性,且含有植物AIH中高度保守的与酶活性位点形成和参与底物结合的11个氨基酸位点。qRT-PCR 分析表明,HbAIH表达无组织特异性,在雌花中表达量最高,树皮、茎尖、胶乳、叶片和雄花中表达量依次降低。HbAIH在不同发育时期叶片中的表达存在变化,稳定期表达量最低,淡绿期最高,说明HbAIH可能参与橡胶树叶片发育过程。此外,低温、干旱、高盐、过氧化氢、乙烯利、茉莉酸甲酯处理以及橡胶树死皮的发生均能引起HbAIH表达变化。这些结果说明HbAIH可能参与了橡胶树生长发育、产排胶调控及逆境应答过程。
- 杨洪岳镒繁胡燕玲邓治代龙军李德军
- 关键词:巴西橡胶树胁迫响应