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一种等位基因双敲除打靶载体系统及其构建方法: 一种等位基因双敲除打靶载体系统及其构建方法，该系统由pGT-V1和pGT-V2两个互补载体组成，每个载体都包含两个同向的LoxP元件，其间分别含有正筛选标记基因Neo/GFP和Hyg/RFP，外侧含有一个负筛选标记基因T...; 王华岩韩翠芹李军华; 文献传递

TPT1对OCT4基因表达调控的研究: 为了研究TPT1基因对干细胞特异性表达基因Oct4的调控作用,本实验以P19细胞为模型,通过双荧光素酶报告基因系统（dual-luciferase reporter assay systerm）和实时定量（Quantit...; 李军华; 关键词：OCT4 P19细胞实时定量PCR; 文献传递

一种通过抑制MUL8基因表达促进淀粉积累的方法: 本发明公开了一种通过抑制MUL8基因表达促进淀粉积累的方法，属于基因工程技术领域。本发明公开的一种通过抑制MUL8基因表达促进淀粉积累的方法，利用RNAi技术抑制MUL8基因的表达，能够促进未成熟番茄果实中淀粉的积累。本...; 王家发李国斌陈雅妮袁黎侯晟灿张显张俊红魏春华李军华马建祥田树娟朱涛

双筛选标记打靶载体的构建及其功能鉴定被引量：4: 2010年; 利用DNA同源重组方法(基因打靶)对动物基因组进行修饰是转基因研究的重要手段之一。为了构建一个高效的通用型基因打靶载体,本研究以pBS246质粒为骨架,在两个LoxP序列之间插入正筛选标记新霉素磷酸转移酶(neo)基因和绿色荧光蛋白(EGFP)基因;在两个LoxP序列外侧分别插入两组携带"8碱基"酶切位点的多克隆位点序列(MCS-1和MCS-2)和负筛选标记单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-tk)基因,构建成通用型基因打靶载体pGT-V1,并且在C2C12细胞中验证了载体中各个元件的功能。该载体具有如下特点:1)在载体中引入绿色荧光标记,可以实时监控载体的转染效率,而转染效率的提高为高效基因打靶提供了保证;2)在两个LoxP位点间插入绿色荧光标记,可以直观监测打靶后遗留的筛选标记的去除情况,并且可以通过流式细胞仪或免疫磁珠法,将最终去除了筛选标记的阳性细胞(即丢失绿色荧光的细胞)分选出来,降低筛选标记在中靶细胞中可能产生的负面影响;3)采用"8碱基"酶切位点的MCS序列,便于DNA大片段的连接和重组,极大提高了该载体的通用性。总之,该载体优化了基因打靶的技术手段,为有效开展基因打靶和转基因动物研究提供了新平台。; 李军华韩翠芹邓捷王华岩; 关键词：同源重组打靶载体 CRE-LOXP

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李军华