朱典 作品数:22 被引量:30 H指数:2 供职机构: 公安部物证鉴定中心 更多>> 发文基金: 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 政治法律 更多>>
信件类检材脱落细胞的DNA检验 2020年 目的不经茚三酮显影,仅通过对可能附着有脱落细胞的部位进行DNA-STR检验,确定信纸、信封类检材上脱落细胞的最佳提取部位和转移方法。方法分别尝试直接剪取、植绒拭子擦拭、EZ-tape脱落细胞粘取器粘取等不同的转移提取方法,以商品化试剂盒(硅胶膜吸附法)直接提取,经增加PCR循环扩增、基因分析仪电泳并扫描扩增产物,最终获得DNA-STR分型。结果直接剪取法为最优转移提取方法;直接剪取信纸的折痕部位能稳定获得良好的DNA-STR分型,故应作为此类检材最佳的提取部位;粘取、直接擦拭/剪取法在信封和信纸上的字迹部位均未能获得有效的DNA-STR分型。结论纸张类脱落细胞检验的首选提取方法应为直接剪取,但剪取部位须结合案情、具体情景预判脱落细胞的最佳富集部位。折痕处应作为脱落细胞DNA检验的首选重点提取部位,可对其直接剪取而省去茚三酮显影的过程。 宋燕华 谢仲文 陈效卓 朱典关键词:法医遗传学 脱落细胞 18种样本采集卡性能比较分析 被引量:1 2021年 口腔细胞样本和血液样本是法医DNA检验与数据库建设常见(用)的样本类型,FTA卡以其能够抑制微生物生长、抗紫外线照射的功能而常被选用于这两类样本的保存。本文报道收集上述两类样品采集卡:6种针对口腔细胞样本(含FTA指示卡)、12种用于血液样本(含FTA卡),就它们样本保存区域的属性、抑制微生物、抗紫外线照射以及PCR扩增效果等进行系统分析。结果发现只有具有化学物质涂层的采集卡才有有效抑制微生物生长、抗紫外线照射的功能;而具有涂层的采集卡则因涂层中存在的化学物质会对PCR扩增效果略有影响。基于以上分析,本文认为具有抑制微生物生长、抗紫外线照射功能的口腔细胞样本和/或血液样本采集卡更适合法医DNA检验与数据库样本的保存及STR检测。 卢亮 王延滨 马建伟 申君毅 朱典 陈飞秀 仲利静 田雪梅 赵蕾关键词:法医遗传学 抑菌 生物斑迹离体时间预测方法 本发明公开了生物斑迹离体时间预测方法。本发明基于深度学习和机器学习对生物斑迹的离体时间进行推断,主要通过循环神经网络和PCA模块从原始的不同离体时间生物体样本的数据中筛选出对离体时间预测有效的基因特征或微生物OTUs特征... 张瑾 杨雪莹 徐小玉 畅晶晶 郭柯利 杜猛 刘开会 朱典 秦叶Y-STR单倍型在大家系中的差异研究 被引量:12 2018年 目的研究三种不同的Y-STR分型体系(Yfiler,Yfiler~?Plus和快速突变Y-STRs)在家系遗传过程中所展现出的变异程度。方法选取一遗传关系清晰的汉族家系,利用Yfiler~?Plus复合扩增系统和包含7个快速突变Y-STR基因座的复合扩增系统,得到所采男性样本32个Y-STR基因座的分型数据,统计分析Y-STR单倍型在世代遗传中的变化程度。结果同一家系不同男性个体的Y-STR单倍型具有一定的多样性,并且与Y-STR单倍型包含的基因座数量和基因座突变率有关;当家系中两名男性个体相隔10次减数分裂时,其Yfiler单倍型不一致的概率为7.35%,Yfiler Plus单倍型不一致的概率是91.2%,快速突变Y-STR单倍型不一致的概率则为100%。结论包含不同Y-STR基因座组合的Y-STR单倍型在世代遗传过程中的变化程度差异较大,在亲权鉴定和家系排查过程中特别是当Y-STR分型体系包含快速突变Y-STR基因座时应留心关注。本研究对Y-STR数据库建设中的采样规则和基因座选择也有参考价值。 张广峰 高珊 畅晶晶 徐小玉 郝金萍 杨雪莹 朱典 张颖 张瑾 凃政 刘开会关键词:法医遗传学 龙胆紫染色法在显微捕获单细胞分离技术中的应用 被引量:1 2011年 目的建立用于显微捕获单细胞技术的龙胆紫染色法并评价其应用效果。方法制作20枚口腔拭子脱落细胞悬液,配制0.05g/mL龙胆紫染液。取100μL口腔细胞悬液加入0.15、0.25、0.5、1.0、2.0μL染色液,考察最佳染色浓度;分别染色5、10、30、60min,考察最佳染色时间;用最佳条件染色后抓捕3个细胞,采用联合LV-PCR技术扩增并进行DNA分型检测,进行重复试验20次,并对同一检材未经染色的抓捕细胞进行检测,用于比对STR分型成功率。将龙胆紫染色法用于案例检材的口腔上皮细胞分离检验。结果 100μL细胞悬液加入0.5μL 0.05g/mL龙胆紫染液,染色5min,胞核呈紫红色,与胞浆对比明显;染色时间延长不影响染色效果及细胞分离检验结果。优化后的龙胆紫染色法对低体积扩增无明显抑制(P>0.05)。应用此染色法于案例检材,胞核标识清晰,STR分型结果达同一认定标准。结论龙胆紫染色法利于细胞核的发现,有助于提高显微捕获单细胞技术的检测效能。 朱典 李彩霞 黄江平 任文彦 万立华 胡兰关键词:法医物证学 口腔上皮细胞 低体积PCR扩增用于单细胞分离和检验 被引量:7 2012年 目的优化在单细胞分离检验中应用0.2mL试管做低体积扩增载体的最佳反应条件。方法制备理想口腔上皮细胞悬液,用0.2mL试管分别收集捕获到的5、10个细胞,设置蛋白酶K添加、PCR反应金牌酶用量、循环次数3组条件,用Identifiler誖Plus试剂盒进行复合扩增,比较各组的检出率、等位基因丢失率和非特异性扩增情况。结果用0.2mL试管做低体积扩增中,加蛋白酶K裂解、PCR反应金牌酶0.4μL、PCR反应32个循环,这3个条件的检出率较高,等位基因丢失率较低。结论在单细胞分离检验中采用0.2 mL试管进行低体积扩增,可以作为芯片-低体积扩增的有效补充手段。 韩俊萍 李彩霞 严红 朱典 李艮平 胡兰关键词:法医遗传学 核酸扩增技术 单细胞 微滤法分离人血中脱落上皮细胞 被引量:1 2019年 目的建立基于微滤技术分离检验人血中脱落上皮细胞的新方法。方法选用微孔滤膜并构建细胞分离过滤平台,优化过滤参数;制备15组混合细胞悬液,每组包含2个等比例混合的样本, 1个进行常规DNA检验,另1个经过滤平台过滤,取滤膜作DNA检验,对比两者的STR分型结果,评判过滤平台的细胞分离效果。结果当流量为250mL/h、滤膜孔径30μm时,白细胞滤除率可达90%以上,而脱落上皮细胞截留率不低于70%;对15组混合细胞悬液经分离检验, 14组获得预期结果。结论该方法可用于人血中脱落上皮细胞的分离检验,能够改善此类检材中目的细胞的STR分型结果,为刑事案件中血迹浸染的烟蒂等混合生物检材的细胞分离检验提供了一种新思路。 朱典 高珊 张颖 张广峰 聂昊 刘开会关键词:微孔滤膜 细胞分离 DNA检验 基于过滤技术的强奸案精阴混合斑快速检验初探 被引量:2 2019年 目前,强奸案中精阴混合斑的分离检验,基本采用差异裂解法,为确保最终获得精子来源的单一STR分型,则阴道上皮细胞需充分消化裂解(通常56℃不少于6h,而37℃不少于12h),且两种细胞的先后裂解,使得整个检验过程需耗费1-2天[1],不利于快速提供指向犯罪嫌疑人的DNA信息。 朱典 罗杨 郝金萍 高珊 郭柯利 张广峰 刘开会关键词:法医物证学 3种碱性染液对显微捕获联合低体积扩增技术的影响 被引量:1 2011年 目的:比较3种碱性染液对显微捕获联合低体积扩增(Lowvolume polymerase chain reaction,LVPCR)技术的影响,为细胞分离检验中细胞核标记物的选择提供依据。方法:显微捕获联合LVPCR中,用苏木素、龙胆紫、亚甲基蓝3种染液对口腔上皮细胞进行标识。参照龙胆紫染色法,比较0.5、1、2、5、8μl苏木素染液及2、5、8、10、15μl亚甲基蓝染液的染色效果,优化染色条件;并比较优化后的细胞核标识效果。显微操作仪捕获3种染液染色后的细胞进行DNA检验,比较检测结果;并捕获染色10、30、60 min口腔上皮细胞,比较染色时间对DNA检测结果的影响。结果:100μl口腔上皮细胞悬液加入2μl苏木素、0.5μl龙胆紫或5μl亚甲基蓝染液,细胞核均着色明显,与胞浆对比清晰。5个细胞的分离检验结果示有效分型率分别为90%、100%、66.7%,成功分型率为20%、100%、11.1%;龙胆紫、苏木素染色时间(≤60 min)对DNA检测结果无明显影响,而亚甲基蓝染色时间延长导致等位基因丢失等现象加重,影响检测结果。结论:3种染液均可清晰标识细胞核;而龙胆紫染液对LVPCR技术抑制最弱,为三者中较优的细胞核标记物。 朱典 万立华 胡兰 李彩霞 韩俊萍 郝建文关键词:法医物证学 碱性染料 大体积液体检材过滤装置研发及提取技术 2019年 目的研宄一种新型的“液体检材过滤提取仪”,用于过滤、富集大体积液体检材中的脱落细胞。方法在液体检材过滤提取仪中分别安装8种不同孔径的滤膜(0.45|im、10|im、20(xrn、30 jim、60|im、80|im、120|im的尼龙膜、无纺布),依次过滤、富集64份200 m L洗手水样本;采用M 48磁珠法提取滤膜上富集的细胞D N A;再分别对提取到的D N A用7500荧光定量P C R仪进行定量;根据定量结果进行D NA-STR检验。结果l〇nm和2〇n m孔径的尼龙网格膜成为该过滤提取仪首选,无纺布次之。结论“液体检材过滤提取仪”可用于法庭科学实际案例中大体积液体检材中脱落细胞的过滤、富集。 郝金萍 高珊 郭柯利 朱典 刘开会关键词:法庭科学