曹金锁
- 作品数：7 被引量：33H指数：3
- 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 植物化感作用研究进展被引量：16
- 2007年
- 植物化感作用由于在农业和林业上的巨大应用潜力,成为近年来倍受重视的研究热点。综述了植物化感物质的种类、释放方式、作用机理以及研究方法,并对今后的研究方向以及应用前景进行了展望。
- 邓麟曹金锁王秦虎常伟平
- 关键词：化感作用化感物质研究方法
- PLptn真核载体的构建 表达及其趋化活性测定被引量：2
- 2010年
- 柳超蒋朋飞曹金锁张德礼
- 关键词：趋化因子真核载体活性测定免疫反应
- 植酸酶在养殖业中的应用
- 2007年
- 1.植酸酶的基本性质
(1)植酸酶的发现和分类植酸酶是一类能够催化植酸水解成肌醇和磷酸(或磷酸盐)的磷酸单酯水解酶的总称.1907年植酸酶被发现,在此后人们从植物性物质和微生物中分离得到了多种植酸酶和有植酸酶效应的磷酸酶类.这些植物性物质包括麸皮、番茄、豆类植物等,微生物包括青霉菌、酵母菌、乳酸菌和枯草杆菌等.
……
- 曹金锁
- 关键词：植酸酶养殖业
- 猪新基因BCL-G_L的克隆与原核表达及其多克隆抗体的制备被引量：3
- 2010年
- 目的:克隆猪的BCL-GL基因,进行原核表达,并制备出其多克隆抗体。方法:以提交NCBI的人的BCL-GL基因序列为种子序列,对猪的ESTs数据库进行比对拼接,得到contig序列。根据这个序列设计克隆引物,以猪脾脏总RNA反转录得到的cDNA为模板,PCR得到克隆序列。克隆序列经测序验证后,连接到原核表达载体pET-32a,构建成重组表达载体pET32a-BCL-GL,然后将重组载体转化到大肠杆菌BL21进行诱导表达。经His-标签融合蛋白纯化试剂盒纯化得到纯化蛋白制备豚鼠多克隆抗体。结果:抗体ELISA效价为1∶800,Western blot反应特异性良好。结论:成功地克隆了猪BCL-GL基因,并进行了原核表达,制备了特异性豚鼠抗BCL-G血清,为进一步研究其功能奠定基础。
- 蒋朋飞曹金锁柳超赵海平张德礼
- 关键词：克隆原核表达多克隆抗体
- 猪akirin2基因的克隆与真核表达被引量：4
- 2010年
- Trizol法从猪脾脏中提取总RNA,RT-PCR方法得到猪Akirin2的完整编码区,软件分析猪Akirin2的核酸序列与蛋白序列,进行染色体定位。将Akirin2构建到带有荧光标记的真核表达载体pEGFP-C1中,通过脂质体转染法将pEGFP-Akirin2转入猪脐静脉血管内皮细胞系(SUVEC)中进行表达。结果表明,该序列编码203个氨基酸,猪akirin2基因定位于猪1号染色体,含有4个外显子,猪与牛的Akirin2蛋白高度同源。重组表达质粒pEGFP-Akirin2经双酶切鉴定和测序分析,表明构建成功,pEGFP-Akirin2转染SUVEC细胞后,经荧光检测证实转入的akirin2基因得到表达。研究结果为探讨猪Aki-rin2蛋白在免疫调控中的功能提供了基础数据。
- 曹金锁柳超蒋朋飞赵振华陈新雨张德礼
- 关键词：克隆染色体定位真核表达
- 人天然免疫基因BCL10的猪同源物的识别、克隆与初步表达分析被引量：8
- 2008年
- 采用电子克隆方法克隆到大小为925bp的人天然免疫蛋白BCL10的猪同源基因完整cDNA序列(GenBank登录号:EU088132),并利用RT-PCR方法从猪的全血中扩增出包含702bp的完整开放读码框架(ORF)的cDNA片段。经核酸测序,证明与电子克隆结果相符。利用NCBIBLAST分析该cDNA包含3个大小为57bp、289bp和356bp的外显子,并且定位于猪的4号染色体上。采用半定量PCR技术检测基础水平猪各组织BCL10基因mRNA表达丰度,并将该基因构建到带有绿色标签的真核表达载体pEGFP-C1中,采用脂质体转染法将该基因转入PK-15细胞,通过绿色荧光标记和RT-PCR方法检测实验组的BCL10蛋白表达。研究结果表明,BCL10基因mRNA在脾脏中表达最高;胸腺、大脑和淋巴结表达次之,而肝脏只有微量表达,肾脏没有检测到表达;同时BCL10基因在PK-15细胞中得到了有效表达。
- 何建锋张彦明段会娟曹金锁张德礼
- 关键词：克隆真核表达
- 猪Akirin2基因的分子克隆及体外诱导表达
- 先天性免疫是机体防御病原体感染的第一道防线,而Akirin2是先天性免疫系统的一个重要功能基因。Akirin2蛋白严格定位于细胞核,参与NF-κB通路,但其作用机制尚未明确。小鼠Akirin2基因敲除实验表明,Akiri...
- 曹金锁
- 关键词：克隆
- 文献传递
