曹亚伟
- 作品数：14 被引量：134H指数：5
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- 长链非编码RNA CDKN2BAS靶向微小RNA-98-5p调控骨肉瘤细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的分子机制被引量：5
- 2020年
- 目的探讨长链非编码RNA CDKN2BAS(lncRNA CDKN2BAS)是否通过靶向微小RNA(miRNA,miR)-98-5p影响骨肉瘤细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭。方法实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测成骨细胞hFOB1.19(购自上海通派生物科技有限公司)与骨肉瘤细胞U2-OS、SOSP-9607、Saos-2、SJSA-1(购自美国典型菌种保藏中心)中CDKN2BAS、miR-98-5p的表达水平;按照随机数字表法随机分组为si-con组、si-CDKN2BAS组、miR-con组、miR-98-5p组、si-CDKN2BAS+anti-miR-con组、si-CDKN2BAS+anti-miR-98-5p组,噻唑蓝(MTT)法检测CDKN2BAS与miR-98-5p表达对骨肉瘤细胞增殖活力的影响;流式细胞术检测CDKN2BAS与miR-98-5p表达对骨肉瘤细胞凋亡能力的影响;Transwell小室实验检测CDKN2BAS与miR-98-5p表达对骨肉瘤细胞迁移及侵袭能力的影响;双荧光素酶报告实验检测CDKN2BAS是否靶向miR-98-5p;蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞核增殖抗原(Ki-67)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、p21、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved Caspase)-3、Cleaved Caspase-9、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化-丝裂原活化蛋白激酶p38(p-p38 MAPK)的表达量。两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果hFOB1.19细胞与骨肉瘤细胞U2-OS、SOSP-9607、Saos-2、SJSA-1中CDKN2BAS的表达水平分别为1.05±0.28、4.26±0.42、3.65±0.56、4.02±0.46、3.75±0.41,miR-98-5p的表达水平分别为0.98±0.06、0.41±0.05、0.64±0.07、0.57±0.06、0.47±0.05,与hFOB1.19细胞比,骨肉瘤细胞株中CDKN2BAS表达明显上调(F=80.889,P<0.05),miR-98-5p表达明显下调(F=130.868,P<0.05),差异均有统计学意义;沉默CDKN2BAS与过表达miR-98-5p后骨肉瘤细胞存活率分别为(68.57±8.63)%、(64.68±7.24)%,迁移细胞数分别为(98.43±11.51)、(93.46±12.54)个,侵袭细胞数分别为(47.93±6.84)、(38.64±6.69)个,沉默CDKN2BAS与过表达miR-98-5p后骨肉瘤细胞增殖活力明显降低(F=37.873、60
- 曹亚伟肖鹏孙金鹏宋晓东郑飞吴学建
- 关键词：骨肉瘤迁移
- 伞状支撑骨移植术治疗股骨头坏死的生物力学研究被引量：1
- 2010年
- 目的 观察伞状支撑骨移植术治疗股骨头坏死的生物力学变化.方法 应用伞状支撑骨移植术（A组）治疗山羊股骨头坏死模型,并通过生物力学检测与单纯股方肌骨柱移植术组（B组）、骨髓间充质干细胞和松质骨移植术组（C组）进行对照研究（每组均14只）.结果 术后3个月A组手术侧股骨头软骨下骨、松质骨的最大压强和弹性模量为：（77.43±2.65）、（120.60±4.18）MPa;（46.63±1.32）、（81.74±3.96）MPa.高于B组、C组（P＜0.05）,与正常侧比较差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 伞状支撑骨移植术能有效恢复股骨头的生物力学强度,防止塌陷.
- 曹亚伟王义生申子龙韩枫
- 关键词：股骨头坏死骨移植生物力学
- 地塞米松对人骨髓基质干细胞成脂与成骨分化的影响的初步报告被引量：7
- 2006年
- 目的探讨不同浓度的地塞米松对骨髓基质干细胞成脂与成骨分化的影响。方法取人骨髓分离培养骨髓基质干细胞,经传代后分别置入地塞米松1×10-8mol/L(A组)、1×10-7mol/L(B组),应用Rt-PCR技术分别扩增成脂基因mPNA(PPARγmRNA)、成骨基因mRNA(Osteocalcin mRNA)对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳。通过凝胶成像扫描系统做半定量分析,以PPARγmRNA和Osteocalcin mRNA与β-actin的吸光度比值表示上述产物mRNA的相对含量。结果对A组和B组通过凝胶成像扫描系统作PCR产物半定量分析,显示B组细胞中的Osteocalcin mRNA表达降低,而A组细胞中的表达增加。而且B组中的PPARγmRNA表达升高,A组降低。两者之间的差异均有统计学意义。结论地塞米松可以从分子水平调控骨髓基质干细胞的的分化。地塞米松浓度为1×10-7mol/L时,诱导骨髓基质干细胞向脂肪细胞分化,同时减少、抑制其向成骨细胞分化,这可能是激素骨坏死发生的机制之一。诱导体外培养的骨髓基质干细胞分化为成骨细胞,地塞米松浓度为1×10-8mol/L是比较适宜的。
- 曹亚伟吴学建王义生李月白
- 关键词：人骨髓间充质干细胞骨钙素地塞米松
- 骨髓间充质干细胞和伞状支撑骨移植术治疗股骨头坏死的实验研究被引量：25
- 2010年
- 目的探讨骨髓间充质干细胞和伞状支撑骨移植术治疗股骨头坏死的疗效。方法42只山羊用液氮冷冻法建立单侧股骨头坏死模型，8周后分为3组，A组行骨髓间充质干细胞和伞状支撑骨移植术；B组行单纯股方肌骨柱移植术；C组行骨髓间充质干细胞和松质骨移植术。三组的健侧均作为自身正常对照。分别于术后3、6个月行放射学、组织学观察。结果治疗术后3个月：①X线检查：A组、B组手术侧股骨头外形恢复，囊性低密度区消失，原塌陷已修复，股骨头无再塌陷。A组植骨愈合良好，骨柱影已模糊；B组植骨愈合欠佳，骨柱影仍较清晰。C组手术侧骨修复效果明显较A组、B组差，股骨头轮廓不规则，扁平塌陷，密度不均。②组织学观察：A组骨小梁成熟，排列规则；B组骨小梁幼稚，排列不规则；C组骨小梁变细、稀疏、断裂。A组空骨陷窝计数百分比降低、骨小梁面积分数百分比增高，与B组、C组相比差异有统计学意义（P〈0．05），与正常侧相比差异无统计学意义（P〉O．05）。治疗术后6个月：X线检查A组、B组手术侧股骨头已为正常股骨头X线表现．而C组手术侧股骨头完全塌陷。组织学检查A组、B组手术侧股骨头空骨陷窝计数百分比、骨小梁面积分数百分比与正常侧相比差异无统计学意义（P〉0．05），且A、B组差异亦无统计学意义（P〉0．05）。结论骨髓间充质干细胞和伞状支撑骨移植术治疗股骨头坏死效果良好，优于松质骨移植术和单纯股方肌骨柱移植术。
- 曹亚伟王义生韩枫申子龙
- 关键词：骨髓间充质干细胞股骨头坏死生物力学
- 带旋髂深血管蒂骨瓣复合骨形态发生蛋白联合内固定治疗青壮年股骨颈骨折被引量：4
- 2018年
- 目的评价带旋髂深血管蒂骨瓣复合骨形态发生蛋白（rhBMP_2）联合内固定治疗青壮年股骨颈骨折的临床疗效。方法选取2012年1月至2016年12月医院诊治的30例青壮年股骨颈骨折，采用髋关节前外侧切口切开复位，3枚空心加压螺钉固定，于股骨颈骨折端前侧开-骨槽并在局部放置3mg rhBMP-2药片，另取带旋髂深血管蒂骨瓣转位移植嵌插于骨槽内并以1枚可吸收螺钉固定，术后随访观察带旋髂深血管蒂骨瓣及股骨颈骨折断端愈合时间、髋关节功能、术后股骨头坏死发生率。结果30例获得随访1-5年，平均3年。所有患者均在6个月内达到骨性愈合，随访期间5例出现股骨头缺血坏死，其中2例再次受伤病史，另外3例于术后1．5、2、4年发生股骨头坏死。末次随访时按髋关节功能评分标准（Harris评分）：优16例，良1l例，差4例，优良率达87．10％。结论rhBMP．2联合内固定治疗青壮年股骨颈骨折，能缩短手术时间、降低创伤，带旋髂深血管蒂骨瓣丰富的血液供应及rhBMP．2的骨诱导作用可有效促进骨折愈合，降低骨折端不愈合发生率，患者术后功能恢复好，具有较高的临床应用价值。而rhBMP-2具有促进VEGF表达、诱导新血管生成的能力，但在本研究中应用rhBMP-2是否与较低的股骨头坏死发生率有关．还需要进行长期随访的对照研究。
- 邵越峰马守战贾思明曹亚伟王义生
- 关键词：股骨颈骨折骨形态发生蛋白
- 地塞米松对人骨髓间充质干细胞成脂分化的基因调控被引量：32
- 2006年
- 目的观察地塞米松对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)内成脂转录因子PPARγmR- NA和成骨基因Osteocalcin mRNA表达的影响。方法取健康自愿者骨髓,通过梯度离心、贴壁分离培养获得hBMSCs。传代培养第2代hBMSCs 8 d,随机分为两组,实验组给予10-7 mol／L地塞米松,对照组不给予地塞米松,5 d后收集细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测两组细胞中PPARγmRNA和Osteocalcin mRNA的表达。结果用地塞米松处理细胞5 d,RT-PCR检测结果显示,实验组hBMSCs内PPARγmRNA呈高表达,对照组hBMSCs内PPARγmRNA呈低表达,两组差异有统计学意义(P<0．01)。实验组hBMSCs内Osteocalcin mRNA呈低表达,对照组hBMSCs内Osteocalcin mRNA呈高表达,两组间差异有统计学意义(P<0．01)。结论地塞米松能够调控hBMSCs内成脂转录因子高表达,而抑制其成骨表达,这可能与激素性骨坏死的发生机制有关。
- 李月白曹亚伟吴学建王义生
- 关键词：人骨髓间充质干细胞骨钙素地塞米松
- 骨髓间充质干细胞和伞状支撑骨移植术治疗股骨头坏死的实验研究
- 目的：
股骨头坏死(Osteonecrosis of the Femoral Head，ONFH)是由于多种病因破坏股骨头血供使骨的活性成分(包括骨细胞、骨髓造血细胞和脂肪细胞)死亡的一种病理过程。该病发病率高，若...
- 曹亚伟
- 关键词：股骨头坏死骨髓间充质干细胞骨移植术生物力学性能
- LncRNA LOC730101通过Wnt/β-catenin信号通路对骨肉瘤U2OS细胞生物学特性的研究被引量：7
- 2020年
- 目的 探讨长链非编码RNA (lncRNA)LOC730101对骨肉瘤U2OS细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制。方法 2019年2月至2019年10月,将体外培养的U2OS细胞分为对照组(正常培养)、阴性组(转染阴性对照)和干扰组(转染靶向LOC730101的干扰序列),采用RT-PCR检测细胞中LOC730101表达,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活力,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成率,流式细胞仪检测细胞周期分布情况, Transwell小室检测细胞侵袭与迁移,Western blotting法检测细胞中上皮间质转化相关蛋白波形蛋白(Vi- mentin)、N-钙黏附素(N-cadherin)、E-钙黏附蛋白(E-cadherin)和Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白β-catenin、c-Myc、细胞周期蛋白D1 (Cyclin D1)和基质金属蛋白酶-7 (MMP-7)蛋白的表达水平。结果进行统计学分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果 与对照组比较,干扰组细胞中LOC730101表达水平(干扰组、对照组分别为0.25±0.03、1.00±0.06,下同)、细胞成活率[(57.65±3.26)%、(100.00±7.39)%]、克隆形成率[(13.03 ± 2.12)%、(25.35±3.58)%]、侵袭细胞数(51.36±3.48、92.85±6.62)、迁移细胞数(77.15 ± 5.05、136.92 ± 15.35)和细胞在S期[(20.54±2.15)%、(28.15±2.38)%]、G2/M期所占百分比[(16.87±2.12)%、(23.36±3.12)%]以及细胞中Vimentin (0.52 ± 0.04、1.17 ± 0.13)、N-cadherin (0.31 ± 0.03、0.65 ± 0.04)、β-catenin (0.42 ± 0.03、0.73 ± 0.04)、c-Myc (0.29±0.03、0.65±0.03)、Cyclin D1 (0.26±0.02、0.58±0.04)、MMP-7蛋白表达水平(分别为0.55± 0.03、0.86±0.06)均明显降低,而细胞在G0/G1期所占百分比[分别为(62.62±5.15)%、(48.46±3.65)%]以及细胞中E-cadherin蛋白的表达水平(分别为0.82±0.06、0.38±0.03)均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);但阴性组的各指标与对照组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 下调LOC730101可抑制骨肉瘤U2OS细胞增殖、侵袭和迁移,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有
- 曹亚伟肖鹏孙金鹏宋晓东郑飞吴学建
- 关键词：骨肉瘤细胞增殖迁移
- 微创切口异体韧带重建治疗慢性踝关节外侧不稳定的临床研究
- 2023年
- 目的:探讨微创切口进行异体韧带重建治疗慢性踝关节外侧不稳定的疗效。方法:分析2020年12月至2022年12月期间采用微创切口异体韧带重建手术治疗慢性踝关节外侧不稳定的26例患者的临床资料,测量对比术前术后距骨前移距离及距骨倾斜角度,以美国骨科足踝协会(American Orthopaedic Foot and Ankle Society)踝-后足功能评分评价踝关节功能及疼痛情况。组间比较采用配对样本t检验。结果:26例患者均获得随访,终末随访时前抽屉试验距骨前移[(3.65±0.56)mm],低于术前[(12.27±1.51)mm,t=28.320,P<0.01];距骨倾斜角度[(3.41±0.79)°],低于术前[(7.14±1.05)°,t=15.590,P<0.01];AOFAS踝-后足功能评分由术前的(57.15±4.25)分提高到术后终末随访时的(91.42±3.28)分(t=34.346,P<0.01),差异均有统计学意义。所有患者无严重并发症出现,对疗效满意。结论:微创切口异体韧带重建治疗慢性踝关节外侧不稳定的手术方式创伤小,术后恢复快,无严重并发症,踝关节功能明显改善。
- 郑飞曹亚伟吴学建
- 关键词：单通道韧带重建
- 长链非编码RNA LBX2-AS1调控微小RNA-491-5p影响骨肉瘤细胞增殖及凋亡的机制被引量：1
- 2020年
- 目的探讨长链非编码RNA((lncRNA)LBX2-AS1靶向调控微小RNA(miRNA,miR)-491-5p影响骨肉瘤细胞增殖及凋亡的分子机制。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测2017年10月至2018年12月郑州大学第一附属医院收集的骨肉瘤组织与瘤旁组织中LBX2-AS1、miR-491-5p的表达量。选取人骨肉瘤细胞U2OS为研究对象,按照数字表法随机分为4组:si-NC组(转染si-NC)、si-LBX2-AS1组(转染si-LBX2-AS1)、si-LBX2-AS1+anti-miR-NC组(共转染si-LBX2-AS1与anti-miR-NC)、si-LBX2-AS1+anti-miR-491-5p组(共转染si-LBX2-AS1与anti-miR-491-5p),分别将si-NC、si-LBX2-AS1、si-LBX2-AS1与anti-miR-NC、si-LBX2-AS1与anti-miR-491-5p转染至U2OS细胞。噻唑蓝(MTT)检测细胞存活率;应用流式细胞仪检测细胞周期;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验验证LBX2-AS1与miR-491-5p的靶向关系;蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞周期蛋白1(Cyclin D1)、p21、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)蛋白表达量。两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果瘤旁组织与骨肉瘤组织组织中LBX2-AS1的表达量分别为(1.01±0.10)、(3.56±0.35),miR-491-5p的表达量分别为(1.02±0.10)、(0.16±0.02),与瘤旁组织比较,骨肉瘤组织中LBX2-AS1的表达水平显著升高(t=35.027,P<0.05),miR-491-5p的表达水平显著降低(t=42.165,P<0.05),差异均有统计学意义;si-NC组与si-LBX2-AS1组细胞存活率分别为(100.02±10.00)%、(55.67±5.54)%,G1期比例分别为(38.51±2.55)%、(52.27±4.68)%,S期比例分别为(30.10±2.14)%、(15.36±1.26)%,细胞凋亡率分别为(8.28±0.92)%、(24.11±2.37)%,与si-NC组比较,si-LBX2-AS1组细胞存活率显著降低(t=11.638,P<0.05),细胞周期G1期比例明显升高(t=7.745,P<0.05),S期比例明显降低(t=17.806,P<0.05),细胞凋亡率显著升高(t=18.680,P<0.05),Cyclin D1表达量显著降低(t=20.871,P<0.05),p21、Caspase-3表达量显著升高(t=22.687,P<0.05;t=20.871,P<0.05),差
- 曹亚伟肖鹏孙金鹏宋晓东郑飞吴学建
- 关键词：骨肉瘤脱噬作用
