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徐海丰

作品数:7 被引量:9H指数:2
供职机构:安徽理工大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金安徽省自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 6篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 7篇医药卫生

主题

  • 6篇尘螨
  • 5篇免疫
  • 5篇粉尘螨
  • 5篇T细胞
  • 5篇T细胞表位
  • 5篇变应原
  • 5篇表位
  • 3篇特异
  • 3篇特异性
  • 3篇特异性免疫
  • 3篇免疫治疗
  • 3篇B细胞
  • 3篇B细胞表位
  • 2篇特异性免疫治...
  • 2篇哮喘
  • 2篇基因
  • 1篇痒螨
  • 1篇食用
  • 1篇食用菌
  • 1篇嵌合

机构

  • 7篇安徽理工大学
  • 4篇皖南医学院

作者

  • 7篇徐海丰
  • 6篇李朝品
  • 5篇徐朋飞
  • 4篇祝海滨
  • 3篇王克霞
  • 2篇段彬彬
  • 1篇刘志明
  • 1篇姜玉新
  • 1篇宋红玉
  • 1篇李娜
  • 1篇徐鹏飞

传媒

  • 2篇中国微生态学...
  • 2篇中国血吸虫病...
  • 1篇安徽医科大学...
  • 1篇中国媒介生物...

年份

  • 5篇2015
  • 2篇2014
7 条 记 录,以下是 1-7
排序方式:
粉尘螨1类变应原T细胞表位重组蛋白的构建及鉴定被引量:1
2015年
目的构建Der f1的T细胞表位融合肽基因的原核表达载体并表达鉴定。方法利用基因工程方法构建Der f1的T细胞表位融合肽嵌合基因,命名为Der f1T,并插入到原核表达载体p ET28a(+)中,形成重组原核表达载体p ET28a(+)-Der f1T,进行双酶切和测序验证后的阳性克隆转化到E.coli BL21(DE3)诱导其表达。制样进行SDS-PAGE分析表达产物,再进行纯化,并Western bloting鉴定表达的蛋白。ELISA法测定重组蛋白对粉尘螨过敏的患者血清Ig E抗体的结合能力。结果双酶切和测序结果说明原核表达载体p ET28a(+)-Der f1T构建成功;SDS-PAGE说明Der f1T诱导且纯化成功;Western bloting进一步说明Der f1T蛋白纯化成功;ELISA试验结果说明Der f1T对粉尘螨过敏的患者血清中Ig E结合能力与Der f1相比明显下降(P<0.05)。结论成功表达Der f1的T细胞表位重组蛋白,为后续粉尘螨过敏患者提供特异性免疫治疗奠定基础。
祝海滨段彬彬徐海丰徐朋飞李朝品
关键词:哮喘粉尘螨特异性免疫治疗T细胞表位
粉尘螨1类变应原T和B细胞表位t合基因的构建与表达被引量:4
2014年
目的:构建粉尘螨1类变应原(Derf1)的T和B细胞表位嵌合基因原核表达载体。方法将Derf1包含的5个T细胞表位(T1~T5)和6个B细胞表位(B1~B6),以B1-T1-B2-T2-B3-T3-B4-T4-B5-T5-B6和B1-B2-B3-B4-B5-B6-T1-T2-T3-T4-T5连接方式直接合成表位嵌合基因,并分别命名为Derf1A和Derf1B。构建原核表达重组质粒pET-28a(+)-Derf1A和pET-28a(+)-Derf1B,双酶切及测序验证的阳性克隆转化到E.coliBL21(DE3)后诱导表达。SDS-PAGE分析表达产物后进行纯化,并进行Westernblotting鉴定。ELISA法检测嵌合蛋白对粉尘螨过敏患者血清IgE抗体的结合力。结果双酶切及测序结果表明,成功构建了原核表达重组质粒pET-28a(+)-Derf1A和pET-28a(+)-Derf1B;SDS-PAGE分析表明,Derf1A和Derf1B诱导并纯化成功,Westernblotting结果进一步证实纯化了Derf1A和Derf1B嵌合蛋白。与Derf1相比,Derf1A和Derf1B嵌合蛋白与粉尘螨过敏患者血清IgE抗体的结合能力显著降低(P均<0.05),但Derf1A和Derf1B间差异无统计学意义(P>0.05)。结论成功表达了Derf1的T和B细胞表位嵌合蛋白,为粉尘螨过敏的特异性免疫治疗奠定了基础。
徐海丰徐朋飞王克霞李朝品
关键词:粉尘螨T细胞表位B细胞表位免疫印迹试验
粉尘螨1类变应原Der f1 T细胞表位疫苗对哮喘小鼠特异性免疫治疗的实验研究
2015年
目的探讨粉尘螨1类变应原Der f1T细胞表位疫苗对哮喘小鼠特异性免疫治疗的效果。方法30只小鼠按每组10只随机分为三组,PBS组、哮喘组和免疫治疗组。哮喘组和免疫治疗组分别在第0、7、14天经小鼠腹腔注射100μL含100μg/mL Der f1的致敏液[含2%Al(OH)3的PBS液],PBS组以PBS液[含2%Al(OH)3]代替。哮喘组和免疫治疗组自第21天起,雾化吸入上述致敏液,PBS组雾化吸入上述PBS液,每天雾化30min,连续雾化7d。免疫治疗组在第25~27天雾化前30min,经腹腔注射100μg/mL的Der f1T细胞表位蛋白200μL,进行特异性免疫治疗,PBS组以PBS液代替。最后一次雾化吸入24h后处死小鼠,收集每组小鼠的支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清并计数BALF中嗜酸性粒细胞,取肺组织制作肺组织病理切片,取脾脏分离脾细胞加入Der f1共培养制成脾细胞培养上清。ELISA检测BALF和脾细胞培养上清中IL-13和IFN-γ含量及血清中特异性IgE(sIgE)和IgG2a水平。结果肺组织病理切片镜检说明,免疫治疗组比哮喘组炎症明显好转,炎症细胞浸润减少。小鼠BALF中嗜酸性粒细胞数结果为免疫治疗组嗜酸性粒细胞数明显低于哮喘组(P〈0.01)。BALF中IL-13含量免疫治疗组明显低于哮喘组(P〈0.01),而IFN-γ含量与IL-13含量变化相反,免疫治疗组明显高于哮喘组(P〈0.01)。各组脾细胞培养上清中IL-13,免疫治疗组明显低于哮喘组(P〈0.01),而IFN-γ含量与IL-13含量变化相反,免疫治疗组明显高于哮喘组(P〈0.01)。血清中特异性IgE含量结果为免疫治疗组明显低于哮喘组(P〈0.01),IgG2a变化水平与IgE变化正好相反,免疫治疗组明显高于哮喘组(P〈0.01)。结论 Der f1T细胞表位疫苗能有效缓解哮喘小鼠的炎症反应并纠正Th1/Th2失衡。
祝海滨徐海丰徐朋飞段彬彬宋红玉李朝品
关键词:粉尘螨变应原特异性免疫治疗T细胞表位
粉尘螨1类变应原T和B细胞表位嵌合基因的构建、表达及特异性免疫治疗研究
目的:构建编码粉尘螨1类变应原(Der f1)B的细胞表位与T细胞表位嵌合基因原核表达载体,并进行大规模表达纯化,以及探究重组变应原的特异性免疫治疗(Allergen Specific Immunotherapy,ASI...
徐海丰
关键词:粉尘螨变应原T细胞表位
文献传递
粉尘螨1类变应原重组融合表位免疫治疗小鼠哮喘的效果分析被引量:1
2015年
目的探讨粉尘螨1类变应原重组融合表位对哮喘小鼠的免疫治疗效果。方法将40只小鼠随机分为阴性对照组、哮喘组、Der f 1治疗组和重组融合变应原Der f 1A治疗组等4组。哮喘组、Der f 1治疗组和Derf 1A治疗组小鼠用粉尘螨提取液于第1、7、14 d进行3次腹腔注射致敏,并于第21 d开始雾化吸入激发,持续7 d。其中治疗组于雾化吸入前30 min,分别用Der f 1、Der f 1A进行特异性免疫治疗。对照组用磷酸盐缓冲液(PBS)进行腹腔注射和雾化吸入。完成雾化吸入激发后,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数;观察肺组织病理切片;检测BALF与脾细胞培养上清液(SCCS)中IL-5、IFN-γ和血清中特异性Ig E、Ig G2a水平。结果与哮喘组相比,免疫治疗组小鼠肺部炎症明显减轻,且BALF中白细胞总数明显降低;免疫治疗组小鼠BALF和SCCS中IL-5水平显著降低,IFN-γ水平则显著升高;血清中变应原的特异性Ig E抗体水平显著降低,Ig G2a抗体水平则显著升高(P均<0.01)。结论粉尘螨1类变应原重组融合表位能够有效减轻小鼠的哮喘症状,为诊断和治疗过敏性哮喘奠定了基础。
徐海丰祝海滨徐朋飞李朝品王克霞
关键词:粉尘螨T细胞表位B细胞表位重组变应原免疫治疗
淮南地区食用菌粉螨孳生研究(粉螨亚目)被引量:2
2015年
目的 调查淮南地区食用菌孳生粉螨种类及生物多样性。方法 分别于1-5月份、8-12月份(每月1次),从食用菌种植基地采取6种食用菌及其培养料。采用直接镜检法、避光爬附法和电热集螨法分离粉螨、制片与鉴定。计算样本中物种多样性(Shannon-Wiener指数)、物种丰富度(Margalef指数)和物种均匀度(Pielou指数)。结果 淮南地区食用菌中共分离出5种粉螨,隶属于3科4属。1年中粉螨的物种多样性指数为1.606-1.683,其中3、4月份最高,1月份最低;物种丰富度指数为0.502-0.982,其中4月份最高,8月份最低;物种均匀度指数为1.003-1.493,其中8月份最高,11月份最低。结论 淮南地区食用菌中有多种粉螨孳生。对此应采取有效措施控制粉螨孳生,以防食用菌质量和产量下降。
徐朋飞李娜徐海丰祝海滨李朝品
关键词:粉螨食用菌
空调隔尘网尘螨过敏原的检测被引量:1
2014年
目的检测安徽省芜湖地区家庭空调隔尘网灰尘和空调开机前、后室内空气中粉尘螨Ⅰ类过敏原(Der f 1)和屋尘螨Ⅰ类过敏原(Der p 1)浓度,以探讨隔尘网中尘螨过敏原与哮喘发病的关系。方法分别从哮喘患者和健康居民家庭采集空调隔尘网灰尘样本各30份,同时用粉尘采样器采集哮喘患者和健康居民室内空气粉尘样本,开机前、后各采集30份。ELISA法检测Der f 1、Der p 1的浓度,Dot-ELISA检测灰尘提取液过敏原性。结果健康人群(家庭)组隔尘网灰尘中的过敏原Der f 1、Der p 1浓度中位数分别为1.49和1.28μg/g;哮喘患者(家庭)组隔尘网灰尘中的过敏原Der f 1、Der p 1浓度中位数分别为0.73和0.85μg/g,二者差异有统计学意义(分别为P<0.01,P<0.05)。健康人群(家庭)组的空调开机前空气中Der f 1、Der p 1浓度中位数分别为4.65和5.90 ng/m3,开机后分别为7.65和7.35 ng/m3。哮喘患者(家庭)组空调开机前空气中Der f 1、Der p 1浓度中位数分别为5.05和5.90 ng/m3,开机后分别为7.15和7.10 ng/m3。检测结果显示,打开空调送风情况下,哮喘患者(家庭)组与健康人群(家庭)组的空气中Der f 1、Der p 1浓度均比未开空调时高,且差异有统计学意义(P<0.05)。Dot-ELISA分析显示,灰尘提取液中过敏原能与螨过敏性哮喘患者的IgE产生结合反应。结论芜湖地区居民空调隔尘网中含有尘螨Ⅰ类过敏原,空调开启送风后空气中尘螨的2个主要过敏原浓度均显著升高,应重视家用空调的清洁与净化,定期清洗、更换隔尘网以防止或减少尘螨孳生。
王克霞刘志明姜玉新刁继东徐海丰徐鹏飞李朝品
关键词:尘螨痒螨尘螨过敏
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