徐晓霞
- 作品数：13 被引量：31H指数：3
- 供职机构：新疆医科大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目新疆维吾尔自治区科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 同一滴度不同方法转染AAV9-SERCA2a基因对大鼠的有效性和毒副作用评价被引量：2
- 2013年
- 目的研究同一滴度不同心脏基因转染方法转染携带肌浆网钙ATP酶2a(sarcoplasmic reticulumCa2+ATPase 2a,SERCA2a)基因的9型腺相关病毒(adeno-associated virus serotype 9,AAV9)即AAV9-SERCA2a对SD大鼠心肌的有效性及对机体毒副作用的影响。方法体外成功构建AAV9-SERCA2a-EGFP病毒载体系统,90只雄性SD大鼠随机分为尾静脉注射(tail vein injection,TVI)组、心肌注射(intramyocardial injection,IMI)组、心包腔注射(intrapericardial injection,IPI)组,采用相应方法在体分别转染滴度1×1011vg/mL AAV9-SERCA2a-EGFP、AAV9-EGFP、NS各200μL。转染后30 d,荧光显微镜下观察心肝肾组织绿色荧光表达情况,Western blot检测SER-CA2a基因在大鼠各组织的相对表达量,体表12导联心电图检测心律失常发生率,HE染色观察病理学变化,心脏彩色多普勒超声评价心功能,血液生化学指标检测肝肾功能。结果三组左心室可见大量绿色荧光表达,IMI组荧光局限在注射点,三组肝肾组织均可见微弱荧光;三组心肌SERCA2a蛋白相对表达量显著高于肝肾(P<0.01),TVI组和IMI组心肌SERCA2a蛋白相对表达量明显高于IPI组(P<0.01);TVI组和IPI组心电图正常,IMI组2只大鼠发生室性早搏;三组转染AAV9-EGFP、AAV9-SERCA2a-EGFP与转染NS相比,心功能、组织病理学、血液生化学指标差异均无显著性(P>0.05)。结论三种方法转染滴度1×1011vg/mL AAV9-SERCA2a基因,TVI法和IMI法在心肌的有效性优于IPI法,TVI法和IPI法对机体的毒副作用小于IMI法,综合三种方法的有效性和毒副作用评价,TVI法优于IMI法和IPI法。
- 徐晓霞周祁娜姜涛王红丽王欢季萌王凌鹏张广伟侯月梅
- 星状神经节刺激诱发急性心房颤动及心房电重构与神经重构被引量：7
- 2013年
- 目的探讨星状神经节（SG）刺激诱发急性心房颤动（房颤）及心房电重构与神经重构的机制。方法将健康家犬12只（18～25kg）随机分为2组：对照组（n=6），单纯快速心房起搏（RAP）；SG组（n=6），左侧或右侧SG刺激＋RAP。测定房颤诱发率、房颤持续时间，观察心房电重构和神经重分布。结果①与基础值相比，SG刺激显著增高房颤诱发率（P〈0．05），并延长房颤持续时间（P〈0．05）；（2）SG组有效不应期（ERP）显著缩短（P〈0．05），ERP离散度显著增加（P〈0．05），ERP频率适应性不良（P〈0．05）；③SG组心肌组织酪氨酸羟化酶（TH）、胆碱乙酰转移酶（ChAT）和生长相关蛋白-43（GAP-43）阳性神经纤维密度均高于对照组（P〈0．05）。结论SG刺激使心房和肺静脉部位的房颤诱发率升高，房颤持续时间延长，单侧去SG支配可减少房颤的发生和维持。交感神经活动增强可以引起心房和肺静脉发生电重构以及心房自主神经重构，急性心房电重构和急性自主神经重分布之间的恶性循环，是房颤早期诱发和维持的重要机制。
- 周祁娜陈冰心刘希徐晓霞郭玉君段明军季萌王红丽侯月梅
- 关键词：心房颤动交感神经星状神经节
- 星状神经节电刺激建立交感神经介导的急性房颤犬模型被引量：7
- 2013年
- 目的建立交感神经张力异常介导的急性房颤动物模型的方法学。方法将16只随意来源犬分为三组:对照组(n=4),右侧星状神经节(RSG)组(n=6)和左侧星状神经节(LSG)组(n=6),测定心房和肺静脉不同部位的房颤诱发率、房颤持续时间。结果 RSG刺激显著增加右心房(RA)的房颤诱发率和持续时间(P<0.05),LSG刺激显著增加左心房(LA)、左上肺静脉(LSPV)、左下肺静脉(LIPV)的房颤诱发率和持续时间(P<0.05);与刺激时相比,RSG切除显著降低RA的房颤诱发率和持续时间(P<0.05);LSG切除显著降低LA、LSPV、LIPV的房颤诱发率和持续时间(P<0.05)。结论星状神经节电刺激同时快速心房起搏6h可成功建立交感神经介导的急性房颤犬模型,星状神经节电刺激使心房和肺静脉部位的房颤诱发率显著升高,房颤持续时间显著延长,去星状神经节支配可减少房颤的发生和维持。
- 周祁娜姜涛季萌王欢徐晓霞杨曦张峰侯月梅
- 关键词：心房颤动交感神经星状神经节
- 房颤时间依赖性电重构、结构重构、神经重构与血浆内皮素-1水平研究
- 陈华张玲杨尚磊周祁娜徐晓霞张广伟季萌侯月梅
- 肌浆网钙泵基因过表达对快速起搏右房引起的急性心功能不全及电生理的影响被引量：3
- 2012年
- 目的研究心肌肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA2a)基因过表达对快速起搏右房(RAP)兔心功能及电生理的影响。方法将新西兰大白兔动物模型随机分为假手术组(A组);腺相关病毒/绿色荧光蛋白(AAV1/EGFP)+心房颤动(简称房颤)模型组(B组);AAV1/SERCA2a+房颤模型组(C组);每组各12只。A、B、C组心包腔内分别注射生理盐水、含AAV1/EGFP液、含AAV1/SERCA2a液各500μl。4周后,行心脏超声检测心功能,并行短期RAP24 h,采用心内电生理技术检测各组心房有效不应期(AERP)。处死各组动物,行免疫组化检测SERCA2a在心肌中的表达情况。结果与A组比较,B组起搏8,12,24 h后AERP明显缩短(P<0.05),而C组无明显变化(P>0.05)。与A组比较,B组左室射血分数(LVEF)降低(P<0.05),C组未见明显变化(P>0.05),C组SERCA2a在心房心肌组织中呈强阳性表达。结论 SERCA2a在心房肌组织中过表达有抗快速起搏致AERP缩短作用,并有保护心功能的效益。
- 黄焰孙娟张广伟徐晓霞杨曦王凌鹏侯月梅
- 关键词：快速心房起搏心房有效不应期心功能
- 肌浆网钙ATP酶过表达对急性心房颤动兔心房有效不应期的影响
- 2012年
- 目的探讨肌浆网钙ATP酶2a(SERCA2a)基因过表达对急性心房颤动(AF)兔心房有效不应期(AERP)的影响。方法 40只成年健康新西兰大白兔随机分4组:正常对照组(control组,n=8)、房颤组(AF组,n=8)、绿色荧光蛋白+房颤组(EGFP+AF组,n=12)、肌浆网ATP酶2a+绿色荧光蛋白+房颤组(SER-CA2a+EGFP+AF组,n=12)。control组仅植入电极不起搏;AF组、EGFP+AF组和EGFP+SERCA2a+AF组采用快速心房起搏(频率600次/min)制作急性AF模型,后两组起搏前30d分别向心包腔内注射携带EGFP和SERCA2a+EGFP基因的rAAV载体。转染30d,荧光显微镜下观察心肌组织绿色荧光表达情况,观察起搏0、4、8、12、24hAERP的变化。结果 EGFP+AF组兔心肌冰冻切片在荧光显微镜下可见弥漫绿色荧光,起搏4h后AF组和EGFP+AF组AERP较control组显著缩短(P<0.05),随起搏时间延长呈进行性加重,AERP在AF组和EGFP+AF组间无明显差异(P>0.05),SERCA2a+EGFP+AF组自起搏12h后AERP较AF组和EGFP+AF组缩短程度减轻(P<0.05)。结论以rAAV9为载体介导SERCA2a基因转导可有效逆转快速心房起搏兔心房肌的电重构,是一种潜在的治疗AF的方法。
- 张广伟王凌鹏张玲孙娟徐晓霞姜涛侯月梅
- 关键词：快速心房起搏有效不应期
- 构建重组人SERCA2a基因9型腺相关病毒载体和病毒包装
- 2012年
- 目的探讨构建重组人SERCA2a基因9型腺相关病毒载体和病毒包装的方法,并包装出rAAV9-hSERCA2a-EGFP。方法根据细菌内同源重组的方法使用腺相关病毒包装系统,将hSERCA2a基因克隆到腺相关病毒载体中,与腺相关病毒包装质粒pAAV pHelper发生重组,通过脂质体共转染人胚肾293(HEK293)细胞,产生重组腺相关病毒,通过酶切鉴定和DNA测序鉴定正确后进行扩增、纯化和滴度测定(采用荧光滴度检测法)。结果酶切鉴定和DNA测序证明重组腺相关病毒载体rAAV9-hSERCA2a-EGFP构建成功,PCR鉴定可见到阳性扩增条带,rAAV9-hSERCA2a-EGFP滴度高达1×1012 vg(virus genomes,vg)/mL。结论本方法成功构建和包装滴度为1×1012 vg/mL携带hSERCA2a基因的rAAV9-hSERCA2a-EGFP。
- 徐晓霞黄焰范平王红丽王凌鹏张广伟侯月梅
- 关键词：肌浆网钙ATP酶重组腺相关病毒
- 星状神经节刺激诱发急性心房颤动及其电重构与神经重构机制
- 目的探讨星状神经节(SG)刺激诱发急性心房颤动(房颤)及其电重构与神经重构机制。方法将健康家犬12只(18～25)kg将实验动物随机分为两组:对照组(n=6),单纯快速心房起搏(rapid atrial pacing,R...
- 周祁娜刘希徐晓霞杨尚磊段明君季萌王红丽侯月梅
- 三种心脏基因转染方法转染9型腺相关病毒介导肌浆网钙ATP酶基因在大鼠体内的有效性和安全性评价
- 徐晓霞周祁娜姜涛王欢张广伟王凌鹏王红丽侯月梅
- 肌浆网钙ATP酶过表达对心房颤动兔心房及L型钙通道a1c蛋白表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的探讨心肌肌浆网钙ATP酶2a(SERCA2a)基因过表达,对兔急性心房颤动(AF)的心房肌L型电压依赖钙通道蛋白alc亚单位(LVDCCalc)表达的影响。方法 48只成年新西兰兔,随机分成为房颤组(AF组,n=12)、9-型腺相关病毒+增强型绿色荧光蛋白组+房颤组(rAAV9+EGFP+AF组,n=12)、9-型腺相关病毒+肌浆网钙ATP酶2a+增强型绿色荧光蛋白组+房颤组(rAAV9+SERCA2a+EGFP+AF组,n=12),并设假手术组作为对照(Control组,n=12)。rAAV9+EGFP+AF组和rAAV9+SERCA2a+EGFP+AF组起搏前30 d开胸心包腔内注射包含报告基因的rAAV9-EGFP和包含靶基因的rAAV9-SERCA2a-EGFP各500μL(1×1012v.g/μL)。转染30 d后,AF组、rAAV9+EGFP+AF组和rAAV9+SERCA2a+EGFP+AF组,以600 BPM刺激频率,持续起搏兔右心房24h制作AF模型。处死各组动物,倒置荧光显微镜下观察右心房肌组织EGFP表达情况,行HE染色对右心房组织形态检查,应用免疫组化技述检测SERCA2a蛋白及LVDCCalc蛋白在心房肌中的表达情况。结果 rAAV9+EGFP+SERCA2a+AF组SERCA2a蛋白及LVDCCalc蛋白表达量显著高于AF组和rAAV9+EGFP+AF组(P<0.05),但与对照组比较差异无显著性。结论心房肌转SERCA2a基因,显著减少了急性房颤心房肌的LVDCCa1c蛋白表达的降低,有逆转急性AF电重构的作用。
- 张广伟徐晓霞王凌鹏王红丽张峰杨曦侯月梅
- 关键词：快速心房起搏钙通道
