彭松林
- 作品数:6 被引量:11H指数:2
- 供职机构:香港大学更多>>
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- 体外骨髓基质干细胞中腺病毒介导的胶质细胞源性神经营养因子基因的表达及其生物学活性(英文)
- 2005年
- 背景:骨髓基质干细胞(bonemarrowstromalcells,BMSCs)是外源性目的基因的良好靶细胞,在脊髓损伤的修复中具有良好的应用前景。目的:观察重组腺病毒介导的胶质细胞源性神经营养因子(glialcellline-derivedneurotrophicfactor,GDNF)基因在体外培养的骨髓基质干细胞中的表达,并探讨其生物学活性。设计:以细胞为研究对象,对照观察性研究。单位:一所大学医院骨科实验室。材料:实验于2004-03/06在华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科实验室完成。SD大鼠24只,雌雄不限,体质量(180±20)g。干预:用重组腺病毒载体Adv-GDNF感染体外培养的BMSCs,并与脊髓背根神经节共培养。免疫荧光化学的方法检测BMSCs中的GDNF的表达,提取细胞总RNA进行RT-PCR扩增GDNF基因,应用ELISA方法检测其培养上清中的GDNF含量,并通过与脊髓背根神经节共培养观测GDNF的活性。主要观察指标:主要结局:①RT-PCR。②免疫荧光结果。③GDNF的体外活性。次要结局:①BMSCs的培养与鉴定。②ELISA检测蛋白表达与时间的关系。结果:免疫荧光显示Adv-GDNF感染BMSCs48h后即有GDNF的表达,体外培养的BMSCs经Adv-GDNF转染后有GDNF的转录,其培养上清应用ELISA方法分析,在感染24h后即有GDNF的表达,并可持续5~7d的高峰。Adv-GDNF感染的BMSCs的培养液上清可以?
- 彭松林方煌赵红卫蔡卫东黎逢峰胡宁陈安民
- 关键词:腺病毒科干细胞脑源性神经营养因子转染
- 骨髓间质干细胞与纤维蛋白胶生物相容性的实验研究被引量:6
- 2004年
- 目的 采用体外细胞培养法对纤维蛋白胶的生物相容性进行研究,探讨它作为骨组织工程的载体材料的可行性。方法取2月龄新西兰兔,麻醉后无菌条件下自股骨大转子处抽取骨髓4~6ml.淋巴细胞分离液离心后取单核细胞层,D-Hanks液洗涤离心2遍,悬浮于含10%FBS的DMEM培养液中,行原代培养。传代的细胞分为2组,一组继续用完全培养基培养,一组用条件培养基培养。分别收集细胞接种于含纤维蛋白胶的培养板中。不含材料的培养板中接种细胞作为对照。于不同时间进行处理,用于相差显微镜与扫描电镜观察,行MTT及碱性磷酸酶的含量测定。结果骨髓间质T细胞可以在纤维蛋白胶表向生长,逐渐粘附。对照组与实验组在细胞光吸收值(OD值)、碱性磷酸酶的含量方面相近,统计学分析无显著差异。结论纤维蛋白胶对兔骨髓间质干细胞的肜态学,细胞生长增殖、分化都无影响。具有良好的生物相容性,可作为骨髓间质干细胞的生物载体。
- 彭松林方煌陈安民
- 关键词:间质干细胞纤维蛋白胶生物相容性
- 腺病毒介导的胶质细胞源性神经营养因子基因在体外骨髓基质干细胞中的表达及其生物学活性实验研究
- 2005年
- 彭松林方煌赵红卫蔡卫东黎逢峰胡宁陈安民
- 关键词:胶质细胞源性神经营养因子生物学活性体外培养基因转录骨髓基质干细胞BMSCS
- 骨髓基质细胞与骨缺损的修复被引量:2
- 2005年
- 目的 综述骨髓基质细胞 (marrow stromal cells,MSCs)与骨缺损修复的发展近况。 方法 广泛查阅近年来有关 MSCs的生物学特性及其在骨缺损中的应用文献 ,并作综合分析。 结果 在适当条件下 ,MSCs可诱导为成骨细胞 ,在体内具有成骨性能。以 MSCs为种子细胞的骨组织工程学方法和以其为靶细胞的基因治疗方法都可应用于骨缺损的修复。 结论 MSCs在骨缺损的修复中具有良好的应用前景。
- 彭松林方煌罗永湘
- 关键词:骨髓基质细胞骨缺损骨修复密度梯度离心法
- 锶盐对骨质疏松大鼠骨微结构的影响被引量:2
- 2008年
- 目的探讨锶盐对去势骨质疏松大鼠骨微结构的影响。方法采用11个月龄Wistar雌性大鼠,随机分成假手术(Sham)组、卵巢切除(OVX)组和卵巢切除加锶盐(Sr)组。于手术1周后,Sham组和OVX组大鼠给予生理盐水口服,Sr组则给予锶盐口服[SrCl_2,250mg/(kg·d)],持续12周。第13周时,取近端胫骨行微焦点计算机断层扫描(micro computed tomography,micro CT)检测骨微结构,骨组织形态计量学方法评价锶盐对大鼠骨质疏松的骨重建的影响。结果micro CT提示与去势组相比,实验组大鼠骨小梁体积、骨小梁厚度均明显增加(P<0.05),而骨小梁间距明显减少(P<0.05)。静态和动态骨组织形态计量学均表明锶盐可明显提高骨重建过程骨形成而降低骨吸收的作用。结论锶盐可以促进去卵巢大鼠骨重建过程中的骨形成参数而降低骨吸收的参数,改善雌激素减少导致的骨小梁微结构的退变,这可能是锶盐降低绝经后骨质疏松患者骨折风险的基础。
- 彭松林吕维加夏仁云方煌李锋陆瓞骥
- 关键词:骨质疏松锶盐
- 腺病毒介导的NT-3基因在骨髓间质干细胞中的表达被引量:1
- 2004年
- 目的 :研究腺病毒介导的NT 3基因在培养的大鼠骨髓间质干细胞 (mesenchymalstemcells ,MSCs)中的表达。方法 :在 2 93细胞中培养扩增NT 3重组腺病毒 (adenovirusvectorforNT 3 ,Ad NT 3 ) ,测定病毒滴度 ,然后用Ad NT 3感染传代培养的MSCs ,RT PCR技术检测NT 3基因的表达。结果 :Ad NT 3扩增后获得了较高滴度的病毒 ,MSCs经Ad NT 3感染后有NT 3mRNA的转录。结论 :腺病毒介导的NT 3基因可转入培养的MSCs并高效表达 ,为NT 3基因治疗的研究奠定了基础。
- 彭松林方煌黎逢峰李锋陈安民
- 关键词:神经营养素3骨髓间质干细胞基因转移