彭志伟
- 作品数：13 被引量：24H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 传染性法氏囊病毒结构蛋白基因VP3的克隆与原核表达
- 利用PCR(Polymerase Chain Reaction)技术扩增出IBDV的结构蛋白基因VP3,将其克隆到表达载体pPROEX-HTa中,获得重组质粒命名为VP3/PA,经PCR、酶切和序列分析鉴定表明,插入的位...
- 彭志伟王笑梅高宏雷付朝阳张厚双包晓玮冉多良
- 关键词：传染性法氏囊病病毒结构蛋白基因VP3克隆与原核表达
- 文献传递
- 鸡传染性法氏囊病超强毒Gx株感染性分子克隆的构建
- 本研究以传染性法氏囊病病毒超强毒Gx株(野毒株)基因组为模板,用蛋白酶K法提取病毒基因组核酸dsRNA,在cDNA克隆的5'端上游引入了T7启动子序列,采用Long-accurateRT-PCR(LA-PCR)一步法扩增...
- 包晓玮王笑梅高宏雷付朝阳张厚双彭志伟
- 关键词：鸡传染性法氏囊病病毒感染性分子克隆间接免疫荧光
- 文献传递
- 鸡传染性法氏囊病超强毒Gx及其致弱株基因组B节段的克隆和序列分析被引量：13
- 2005年
- 用蛋白酶K法分离提取了鸡传染性法氏囊病病毒强毒株Gx及其致弱株Gt的病毒核酸dsRNA ,应用随机引物将RNA反转录成cDNA ,以此为模板用长距离一步法扩增出全长基因B节段 ,将其克隆入PMD18_T载体 ,进行了测序 ,并用DNAStar软件进行序列分析。测序结果表明 ,克隆的Gx株B节段全长为 2 82 7bp ,与超强毒参考株UK6 6 1的同源性为 88 2 % ,与强毒参考株Harbin_1株的同源性达 96 3% ;克隆的Gt株B节段全长为 2 82 7bp ,与弱毒参考株P2的同源性达 99 5 %。而Gx株与Gt株B节段的核苷酸的同源性只有 89 8% ;vvIBDV_Gx。
- 包晓玮张厚双高宏雷付朝阳彭志伟单文鲁王笑梅
- 关键词：鸡传染性法氏囊病病毒
- 传染性法氏囊病毒VP3基因的原核表达及鉴别诊断方法的建立
- 利用PCR (Polymerase Chain Reaction)技术扩增出IBDV的结构蛋白基因VP3,将其克隆到表达载体pPROEX-HTa 中,获得重组质粒命名为VP3/PA,经PCR、酶切和序列分析鉴定表明,插入...
- 彭志伟
- 关键词：传染性法氏囊病毒
- 文献传递
- 传染性法氏囊病病毒Gt株基因组A节段的克隆和序列分析被引量：1
- 2005年
- 利用SPF鸡胚对鸡传染性法氏囊病超强毒vvIBDV_Gx株进行培育 ,通过鸡胚成纤维细胞对病毒进行传代致弱 ,使其成为弱毒株IBDV_Gt。从细胞适应毒中提取病毒dsRNA ,通过反转录 ,使用Long_accuratePCR(LA_PCR)用一对引物一步直接扩增IBDV_Gt基因组A节段全长cDNA的方法 ,得到一约 3 30kb的片段。测序结果证明已获得 32 5 5bp的A节段全长 ,对vvIBDV_Gx株和IBDV_Gt株的全部核苷酸及推导的氨基酸序列进行分析 ,结果表明IBDV_Gt株与国内外数株IBDV弱毒株的同源性在
- 张厚双包晓玮王笑梅高宏雷付朝阳彭志伟鞠玉琳
- 关键词：鸡传染性法氏囊病病毒
- 传染性法氏囊病毒结构蛋白基因VP3的克隆与原核表达
- 本文利用PCR(PolymeraseChainReaction)技术扩增出IBDV的结构蛋白基因VP3,将其克隆到表达载体pPROEX-HTa中,获得重组质粒命名为VP3/PA,经PCR、酶切和序列分析鉴定表明,插入的位...
- 彭志伟高玉龙王笑梅高宏雷付朝阳张厚双包晓玮冉多良
- 关键词：传染性法氏囊病病毒原核表达PCR
- 文献传递
- 鸡传染性法氏囊病超强毒Gx及其致弱株基因组B节段的克隆和序列分析
- 在蛋白酶K法分离提取了鸡传染性法氏囊病病毒强毒株Gx及其致弱株Gt的病毒核酸dsRNA,应用随机引物将RNA反转录成cDNA,以此为模板用长距离一步法扩增出全长基因B节段,将其克隆入PMD18-T载体,用DNAStar软...
- 包晓玮张厚双高宏雷付朝阳彭志伟单文鲁王笑梅
- 关键词：鸡传染性法氏囊病病毒克隆
- 文献传递
- 鸡传染性法氏囊病毒重组抗原间接ELISA鉴别诊断方法的建立
- 本实验利用大肠杆菌表达系统表达的VP3重组蛋白,建立了间接ELISA鉴别诊断方法.对92份SPF标准阴性血清的检测结果,经统计学分析,确定间接ELISA判定标准为:被检血清S/P值≥0.24判定为阳性,S/P值≤0.17...
- 彭志伟高玉龙王笑梅高宏雷付朝阳冉多良
- 关键词：传染性法氏囊病毒间接ELISA大肠杆菌
- 文献传递
- 鸡传染性法氏囊病超强毒Gx株感染性分子克隆的构建
- 本研究以传染性法氏囊病病毒超强毒Gx株(野毒株)基因组为模板,用蛋白酶K法提取病毒基因组核酸dsRNA,在cDNA克隆的5’端上游引入了T7启动子序列,采用Long-accurate RT-PCR(LA-PCR)一步法扩...
- 包晓玮王笑梅高宏雷付朝阳张厚双彭志伟
- 关键词：鸡传染性法氏囊病病毒感染性分子克隆
- 文献传递
- 传染性法氏囊病病毒结构蛋白VP3基因的克隆与原核表达被引量：7
- 2006年
- 利用PCR技术扩增出IBDV的结构蛋白VP3基因,将其克隆到表达载体pPROEX-HTa中,获得重组质粒命名为VP3/PA,经PCR、酶切和序列分析鉴定表明,插入的位置、大小和读码框均正确。SDS-PAGE检测表明,经重组质粒VP3/PA转化、诱导的受体菌E.coliDH5α能表达结构蛋白VP3基因,约33Ku,表达量达到了菌体总蛋白的33.9%,经Westernblot等检测表明,诱导表达的抗原蛋白能与vvIBDV阳性血清发生特异性反应。这为IBDV血清学诊断方法的建立打下了基础。
- 彭志伟王笑梅高宏雷付朝阳张厚双包晓玮冉多良
- 关键词：传染性法氏囊病病毒克隆与原核表达
