张骐
- 作品数:10 被引量:31H指数:4
- 供职机构:第二军医大学神经科学研究所更多>>
- 发文基金:上海市科学技术发展基金军队杰出人才基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 酵母双杂交方法筛选与NGF受体TrkA相互作用的新蛋白质被引量:4
- 2002年
- 目的 :寻找新的 Trk A可能底物或调控蛋白 ,以深入认识 Trk A下游信号转导机制。方法 :将 Trk A胞内域与 L ex A蛋白融合作为诱饵蛋白 ,应用酵母双杂交方法筛选人脑 L ex A c DNA文库 ,经β-半乳糖苷酶活性鉴定和测序分析进一步鉴别 ,获得阳性克隆。 结果 :明确阳性克隆中的 Trk AIC- BP1为一种新的 Trk A结合蛋白。免疫共沉淀实验证实了 Trk AIC- BP1和Trk A在酵母中的相互作用。结论 :首次筛选到 Trk A结合蛋白—— Trk AIC- BP1,它可能在 Trk
- 张勇黄爱军曹莉阎志勇刘秀杰张骐路长林何成
- 关键词:TRKA相互作用蛋白质
- 大鼠脊髓中神经生长因子受体TrkA的表达与分布被引量:5
- 2004年
- 目的 :检测神经生长因子受体TrkA在大鼠脊髓中的表达与分布。方法 :通过Westernblot检测TrkA在脊髓中的表达 ;通过免疫荧光组织化学 ,利用激光共聚焦显微镜检测TrkA在神经元中的定位。结果与结论 :TrkA广泛分于脊髓各层神经元及灰质内 。
- 王永刚张勇张骐吴爱群何成
- 关键词:TRKA脊髓神经生长因子受体
- Dok1与表皮生长因子受体之间相互作用的酵母双杂交研究
- 2004年
- 目的 :研究 downstream of kinases(dok1 )与表皮生长因子受体 (EGFR)之间的相互作用 ,寻找 EGFR的可能底物或调控蛋白 ,以深入认识 EGFR下游信号转导机制。 方法 :将 EGFR胞内域与 L ex A蛋白融合作为 DNA结合蛋白 ,分别将dok1、dok1 PTB及 dok1 ΔPTB与 B4 2 AD蛋白融合作为激活域蛋白 ,共转化酵母菌后 ,通过 β-半乳糖苷酶活性检测、生长实验以及免疫共沉淀实验分析它们之间的相互作用。结果 :dok1及 dok1 PTB与 EGFR之间在酵母中存在结合 ,而 dok1Δ PTB不与 EGFR结合。 结论 :首次证实 EGFR与 dok1之间具有相互作用 ,dok 1的
- 张勇刘秀杰张骐阎志勇矫力刘翾路长林何成
- 关键词:表皮生长因子受体PTB酵母双杂交
- 神经生长因子受体TrkA与胞内信号分子Mint2相互作用的研究
- NGF是最早发现的神经营养因子,它的作用除促进发育中的交感、感觉神经元分化、成熟、维持成年期的生存等功能外,还可阻止成年神经损伤后死亡.TrkA是NGF的高亲和力受体,分子量为140kDa,膜内域具有酪氨酸蛋白激酶活性....
- 张骐
- 关键词:TRKA信号分子基因克隆
- 文献传递
- 低强度He—Ne激光血管内照射治疗糖尿病周围神经病变
- 2000年
- 目的:探索低强度He-Ne激光血管内照射(ILIT)治疗糖尿病周围神经病变的疗效。方法:将糖尿病周围神经病变病人65例。随机分为两组。激光组35例(男性21例,女性14例,年龄48±13岁)采用低强度He-Ne激光血管内照射治疗,激光强度2.5mV。每日1次,10次为一疗程。共三个疗程;对照组30例(男性20例,女性10例,年龄47±12岁)采用维生素B1100mg,维生素B120.5mg,im,qd,山莨菪碱20mg及维生素B6400mg加入0.9%%氯化钠注射液500ml,iv,gtt,qd,疗程30d。结果:激光组与对照组总有效率分别为92%和73%(P<0.05)。同时激光组起效果时间较对照组早(P>0.05)且无明显副反应。结论:低强度He-Ne激光血管内照射治疗糖尿病周围神经病变疗效显著。安全可靠。
- 张骐王金莲等
- 关键词:低强度HE-NE激光糖尿病周围神经病微循环
- 万拉法新治疗脑卒中后抑郁症
- 2001年
- 目的 探讨万拉法新治疗脑卒中后抑郁的疗效及不良反应。方法 通过随机双盲对照研究 ,采用HAMD及Asberg抗抑郁症副作用量表 (ASBS) ,在用药前及用药后第 1、 2、 4周评定药物疗效及不良反应。结果 经 4周治疗 ,万拉法新组与阿米替林组相比 ,临床总显效率无显著性差异 (P >0 0 5 )。治疗后 1、 2周末 ,两组间HAMD评分存在显著性差异 (P <0 0 5 )。治疗后第 1、 2、 4周末 ,ASBS评分万拉法新组明显低于阿米替林组 ,两组间存在显著性差异 (P <0 0 5 )。结论 万拉法新治疗脑卒中后抑郁疗效可靠、起效迅速、副作用小。
- 张骐李伯华马建军
- 关键词:万拉法新脑卒中抑郁
- 灵芝多糖肽对氧化应激损伤PC12细胞的保护作用:与神经生长因子的比较被引量:8
- 2005年
- 目的:探讨灵芝的主要有效成分灵芝多糖肽对H2O2氧化应激损伤PC12细胞的保护作用,并以神经生长因子作为阳性对照。方法:实验于2004-01/06在第二军医大学神经科学研究所进行。以H2O2损伤PC12细胞为氧化应激损伤神经元的模型,将培养的PC12细胞随机分成4组:①正常对照组:PC12细胞在无血清的DMEM培养基中培养。②H2O2作用组:PC12细胞与终浓度为200μmol/L的H2O2作用4h。③灵芝多糖肽组:PC12细胞预先用终浓度为10mg/L的灵芝多糖肽预处理24h后,加入终浓度为200μmol/L的H2O2共同作用4h。④神经生长因子组:PC12细胞预先用终浓度为0.1mg/L的神经生长因子预处理24h后,加入终浓度为200μmol/L的H2O2共同作用4h。采用MTT法检测细胞的存活率以及Westernblotting检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3P20活性片段。结果:①细胞存活率:H2O2作用组显著低于正常对照组犤(38.6±7.1)%,(100±9.3)%,P<0.01犦;灵芝多糖肽组和神经生长因子组显著高于H2O2作用组犤(83.4±10.2)%,(75.9±7.4)%,P<0.01犦,但两组间比较无差异(P>0.05)。②半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3P20活性片段:Westernblotting检测结果提示灵芝多糖肽组和神经生长因子组较H2O2作用组明显减少。结论:适量灵芝多糖肽灵芝多糖肽能促进氧化应激损伤PC12细胞的存活,抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡,对氧化应激损伤PC12细胞具有保护作用,其效果与神经生长因子相似。
- 张骐阎志勇贾学江矫力
- 关键词:灵芝PC12细胞
- 癫痫患者生活质量调查被引量:14
- 2000年
- 为探讨癫痫患者的生活质量情况 ,应用癫痫患者生活质量量表 ,以问卷方式进行调查 ,并与正常成人作对比 ,结果显示 ,癫痫患者生活质量明显低于正常人 ,两组比较有显著差异。提示在对癫痫患者进行药物治疗的同时 ,应加强心理治疗 。
- 陈薇张骐徐海波
- 关键词:癫痫生活质量
- 灵芝多糖肽对氧化应激损伤PC12细胞的保护作用
- 目的探讨灵芝多糖肽(GLPP)对H2O2氧化应激损伤PC12细胞的保护作用。方法以H2O2损伤PC12细胞为氧化应激损伤神经元的模型,采用MTT法检测细胞的存活率以及Western blotring检测Caspase-3...
- 张骐贾学江阎志勇肖林
- 关键词:灵芝多糖肽氧化应激PC12细胞CASPASE-3
- 文献传递
- PC12-Mint2基因工程细胞株的构建
- 2005年
- 目的:构建稳定表达Mint2蛋白的PC12-Mint2基因工程细胞株。方法:用PCR方法将Mint2基因亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1A,构建真核表达质粒peDNA3.1A-Mint2;采用脂质体Lipofectamine2000介导,将重组载体转染入PC12细胞,G418筛选抗性克隆,有血清培养并传代具有G418抗性的细胞,数代培养后获得工程细胞株;分别提取野生型PC12细胞和PC12-Mint2工程细胞的mRNA及细胞裂解液,RT-PCR方法检测Mint2基因是否整合入PC12细胞基因组,并用West-ern印迹法检测外源基因Mint2在PC12-Mint2工程细胞中是否正常表达。结果:扩增出的基因片段大小为2 253 bp;pcDNA3.1A-Mint2重组质粒酶切结果表明Mint2基因正确地插入到pcDNA3.1A载体中,测序结果正确;将peDNA3.1A-Mint2转染PC12细胞,经G418筛选获得PC12-Mint2工程细胞株;RT-PCR结果表明Mint2基因已整合入PC12细胞,Western印迹结果显示在120 000处有特异条带,大小与Mint2蛋白理论计算值一致,表明在PC12-Mint2基因工程细胞中确实有Mint2蛋白表达。结论:本试验成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1-Mint2,并获得了稳定表达Mint2蛋白的PC12-Mint2基因工程细胞株,为进一步研究Mint2生物学功能及其作用机制奠定了基础。
- 张骐张勇曹莉刘翾矫力何成
- 关键词:PC12细胞转染WESTERN印迹法