张银辉
- 作品数：63 被引量：237H指数：9
- 供职机构：广东医学院更多>>
- 发文基金：深圳市科技计划项目深圳市福田区卫生系统公益性科研项目广东省科技厅科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学交通运输工程更多>>
- 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析被引量：7
- 2007年
- [目的]了解本院产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌分布及耐药特点。[方法]采用NCCLS推荐的纸片扩散法对我院从临床标本中分离的107株大肠埃希菌和95株肺炎克雷伯菌进行ESBL的确诊试验,并应用ATB G-5药敏卡对20种抗生素进行药敏试验。[结果]107株大肠埃希菌分离到产ESBLs菌株44株,检出率为41.12%,95株肺炎克雷伯菌分离到产ESBLs菌株35株,检出率为36.84%。ESBLs检出模式以单用头孢噻肟、头孢噻肟/棒酸一组为底物阳性率最高,分别占68.18%和62.85%;单用头孢他定,头孢他定/棒酸一组为底物,会造成大肠埃希菌68.18%和肺炎克雷伯菌62.85%的漏检。产ESBLs菌株对青霉素类、头孢菌素类的耐药率为55%～100%;但对哌拉西林/他唑巴坦的敏感率大于77%,对亚胺培南,美洛培南的敏感率均大于91%。[结论]本院分出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs严重,且产ESBLs菌多呈多重耐药。建议各地根据感染菌株的特点及三代头孢菌素的使用情况,采用多种底物检测ESBLs。碳青酶烯类应作为治疗产ESBLs菌株的首选药物。
- 黄烈聂署萍张银辉韦洁宏陆学东
- 关键词：大肠埃希菌肺炎克雷伯菌耐药
- 人博卡病毒重组蛋白表达及间接酶联免疫法检测的建立
- 2016年
- 目的:原核表达并纯化人博卡病毒结构蛋白VP2,并建立间接酶联免疫法,用于病毒感染的检测。方法:本研究采用PCR法从菌种模板WHL-1扩增出人博卡病毒结构蛋白VP2基因片段,克隆至表达载体p ET28a中,转化到菌BL21(DE3),经过诱导产生融合蛋白,使用Western blot检测,并以该蛋白为包被抗原建立检测血清人博卡病毒的间接酶联免疫法。结果:重组原核表达质粒经双酶切鉴定构建正确,并可与人博卡病毒Ig G阳性血清发生特异性反应,建立的间接酶联免疫法最佳抗原包被浓度为2 mg/m L,血清的最佳稀释倍数为1∶200,封闭以1%BSA封闭效果最佳,酶标二抗的最佳工作稀释度为1∶4 000,工作时间最佳为1 h,该检测方法有较好的特异性和重复性。建立的间接ELISA方法Cut-off值为0.1,灵敏度为92%,特异性为98%,与对照试剂检测结果的符合率为97%。结论:原核表达并纯化了人博卡病毒结构蛋白VP2蛋白建立的间接酶联免疫法,为人博卡病毒的血清抗体检测方法提供了依据。
- 张允奇何涛君陆学东张银辉
- 关键词：人博卡病毒原核表达
- 梅毒血清学诊断的方法学比较
- 2004年
- 目的探讨梅毒非螺旋体抗原和特异性螺旋体抗体血清学试验对梅毒病人的筛查和确诊价值。方法比较RPR试验和Trust试验检测172例梅毒血清和228例对照血清非特异性心磷脂抗原的结果，比较TPPA法，ELISA法，免疫印迹法检测172例梅毒血清和228例对照血清梅毒特异性抗体的结果。结果对梅毒血清抗原的检测结果，进口RPR试剂检测阳性率为94．19％，国产RPR试剂检测阳性率为93．02％；对对照血清抗原的检测结果，进口RPR试剂20例阳性，国产RPR试剂4例阳性。进口与国产RPR试剂检测结果间没有显著性差异(P>0．05)。对梅毒血清抗原的检测结果，国产Trust试验试剂1、试剂2检测阳性率均为93．02％；对对照血清抗原的检测结果，国产Trust试验试剂1、试剂2均有4例阳性。Trust试验试剂1与试剂2检测结果间没有显著性差异(P>0．05)。对梅毒血清抗体的检测结果，TPPA法检测阳性率为83．72％，ELISA法检测阳性率为87．21％，免疫印迹法检测阳性率为100％；其中对一期梅毒血清抗体的检测结果，TPPA法诊断阳性率为73．08％，ELISA法为61．54％，而免疫印迹法为100％；对对照血清抗体的检测结果，均无一例阳性。TPPA法、ELISA法与免疫印迹法检测结果相比有显著性差异(P<0．01)。结论免疫印迹法具有高度敏感性和特异性。
- 张银辉陆学东张小艳
- 关键词：梅毒血清学诊断免疫印迹法
- 毛细管电泳仪检测 HbA2在珠蛋白生成障碍性贫血筛查诊断中的价值被引量：2
- 2014年
- 目的：探讨全自动毛细管电泳系统检测 HbA2在珠蛋白生成障碍性贫血筛查诊断中的应用价值。方法对经基因检测确诊的249例珠蛋白生成障碍性贫血患者和142例健康体检者进行毛细管血红蛋白电泳检测。以基因检测结果将研究对象分组，比较珠蛋白生成障碍性贫血组及各亚组与健康对照组 HbA2浓度的差异性，计算毛细管电泳系统检测HbA2在不同截断值时诊断α，β及α复合β珠蛋白生成障碍性贫血的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值及阴性预测值。结果健康对照组 HbA2均值为（3.03±0.27）％，α珠蛋白生成障碍性贫血组 HbA2均值为（2.38±0.55）％，其中静止型、标准型及血红蛋白 H病分别为（2.61±0.46）％，（2.47±0.32）％和（1.07±0.17）％；β珠蛋白生成障碍性贫血组为（5.65±0.47）％，其中β0杂合子和β＋杂合子分别为（5.71±0.48）％和（5.56±0.43）％；α复合β型 HbA2均值为（5.7±0.82）％。与健康对照组相比，α珠蛋白生成障碍性贫血及其静止型、标准型、血红蛋白 H 病亚组 HbA2浓度明显降低（t值分别为11.73，5.02，12.91和33.46，P均＜0.01），血红蛋白 H病组较静止型和标准型 HbA2浓度明显减低（t值分别为15.62和21.31，P＜0.01），但静止型和标准型亚组之间无明显差异（t＝1.50，P＞0.05）。β珠蛋白生成障碍性贫血组及β0，β＋亚组、α复合β珠蛋白生成障碍性贫血组 HbA2浓度明显升高（t值分别为55.12，44.33，38.94和9.10，P 均＜0.01），β0，β＋亚组之间，HbA2浓度无明显差异（t＝1.79，P＞0.05）。124例β珠蛋白生成障碍性贫血，毛细管电泳系统全部检出；117例α珠蛋白生成障碍性贫血，毛细管电泳系统只检出57例。分别以2.5％，3.5％为截断值，毛细管电泳系统检测单纯α，β珠蛋白生成障碍性贫血的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度分别为48.7
- 何英徐玉红张银辉杨来智陆学东
- 关键词：珠蛋白生成障碍性贫血毛细管电泳血红蛋白A2
- 深圳市急性呼吸道感染儿童WU多瘤病毒感染检测及临床特征分析被引量：3
- 2016年
- 目的了解深圳市急性呼吸道感染儿童WU多瘤病毒(WU polyomavirus,WUPoyV)感染特点及临床特征。方法收集深圳市两家医院急性呼吸道感染住院儿童咽拭子或鼻咽分泌物标本,采用PCR检测WUPoyV及9种常见呼吸道病毒,分析WUPoyV感染特点及临床表现。结果共收集2 025例患儿标本(年龄15d^14岁),10种病毒至少1种阳性971例(阳性率为47.95%)。检出WUPoyV 39例,阳性率1.93%,其中26例(66.67%)为单纯WUPoyV感染,13例(33.33%)为WUPoyV与其他病毒混合感染,感染者平均年龄23.3月,92.31%的患儿<4岁。WUPoyV感染全年均有发生,3~5月为发病高峰。WUPoyV感染症状主要表现为咳嗽、喘息、发热等,X线胸片检查主要为支气管肺炎或细支气管炎表现,临床症状和体征与其他呼吸道病毒感染相似;单纯感染与混合感染症状无明显差别。结论WUPoyV感染以<4岁儿童组常见,全年均可发生;春末夏初多见,其临床表现与普通的支气管肺炎和支气管炎类似,深圳市小儿呼吸道感染可能部分与WUPoyV有关。
- 何英王琼张银辉陆长东黄宝兴陆学东
- 关键词：急性呼吸道感染住院儿童WU多瘤病毒流行病学
- 血培养常见病原菌分布及耐药性分析
- 目的了解我院5年血培养中分离菌株的分布构成比及耐药情况。方法血培养标本经BD 9050血培养仪培养,分离所得菌株用法国生物梅里埃ATB Expression细菌鉴定/药敏系统进行鉴定和药敏试验,同时根据美国临床实验室标准...
- 黄烈聂署萍林广城吴润香张银辉何涛君陆学东
- 文献传递
- 深圳地区秋冬季儿童腹泻诺如病毒检测及基因型分析
- 目的：了解深圳地区诺如病毒(Norovirus,NV)的感染情况及型别.方法：采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法：对收集的307份腹泻患者粪便标本进行NV检测,PCR产物测序进行核苷酸序列比对构建系统发生树并进...
- 王琼何英张银辉陆学东
- HIV-1 gag基因p17+24重组抗原表达、纯化及抗原性分析
- 2007年
- 目的获得HIV-1型gag基因p17＋2，4重组抗原，分析其免疫原性和探讨开发诊断试剂的可能性。方法采用PCR技术扩增HIV-1gag基因p17＋p24核酸片段，并克隆入pTreHis2A表达质粒，在大肠杆菌BL21（DE3）株中表达。用Ni—NTA金属螯合层析法纯化目的蛋白，并用免疫印迹法分析纯化蛋白的抗原特异性。结果重组质粒在BL21（DF3）菌株中经IPm诱导表达一个相对分子质量（肘，）约为51×10^3的融合重组蛋白，重组蛋白经HIV-1p17、p24抗原单克隆抗体鉴定，具有抗原特异性。25份HIV阳性血清、180份HIV阴性血清标本初步经l临床验证，具有较高的检出敏感性和特异性。结论成功构建HIV-1型gag基因p17＋24抗原表达载体，表达纯化的p17＋24重组抗原具有较好的抗原性，可用于诊断试剂的开发。
- 陆学东张银辉崔素文杨来智曾青卿刘键张小艳
- 关键词：GAG基因重组抗原
- WU多瘤病毒衣壳蛋白原核表达及初步分析
- 2011年
- 目的获得WU多瘤病毒重组衣壳蛋白，分析其抗原性，筛选具有诊断价值的抗原。方法采用PCR技术扩增WU多瘤病毒衣壳蛋白VP1、VP2和VP3的基因片段，并将目的基因插入PGEX-20T表达载体，转化大肠杆菌B121（DE3）后诱导表达。用免疫印迹法对表达蛋白进行鉴定和分析并用临床样本进行初步验证。结果重组质粒在BL21（DE3）菌株中经IPTG诱导、SDS—PAGE和免疫印迹鉴定显示在相对分子质量（Mr）69×10^3、63×10^3和56×10^3处出现清晰条带，重组质粒经双酶切鉴定，表达产物经GST标签鉴定均正确。16份呼吸道分泌物WU多瘤病毒核酸阳性血清标本和70份阴性标本免疫印迹分析表明，重组蛋白具有良好的抗原性。结论成功构建了WU多瘤病毒衣壳蛋白VP1、VP2和VP3的表达载体，表达的重组蛋白具有良好的抗原性，为进一步研究提供了资料。
- 张银辉王琼贾雪林广裕黄烈刘建陆学东
- 关键词：WU多瘤病毒衣壳蛋白原核表达
- 死精症患者精液细菌学分析被引量：3
- 2006年
- 目的了解致精子死亡的原因及死精症患者的致病菌分布及药敏情况,为死精症患者的治疗提供科学指导。方法采用细菌分离培养、药敏纸片抑菌实验进行精液细菌学分析与药敏试验。用细菌培养液做抑制精子动力实验,及应用凝胶分子筛层析技术分离抑制精子活性的大分子物质。结果100例死精症患者精液标本中分离出12种细菌83株,其中G+菌6株,占7.2%;G-菌77株占92.8%,以大肠杆菌、嗜水气单胞菌、催产克雷伯氏菌为主要优势菌;对所选6种抗菌素纸片的药敏试验,以环丙沙星、丁胺卡那霉素抑菌非常显著,头孢三嗪和泰能也有较好的抑菌抑菌作用;凝胶分子筛层析分离结果表明,抑制精子的活性物质为细菌分泌的蛋白质。结论对死精症的诊治过程中,细菌分离培养非常必要,合理应用抗菌素,以有效的治疗死精症。
- 张银辉杨来智黄烈陆学东张小艳
- 关键词：细菌培养药敏
