张金平
- 作品数：43 被引量：105H指数：7
- 供职机构：河北医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 新生大鼠神经干细胞的体外培养方法被引量：1
- 2011年
- 目的 探讨新生SD大鼠神经干细胞（neural stem cells,NSCs）适宜的体外分离培养方法.方法 从出生1～3d的SD大鼠脑组织中分离NSCs,采用不同的接种密度、传代方法,在体外培养NSCs,观察细胞的生长情况.巢蛋白（Nestin）、神经元特异性烯醇化酶（neuron specific enolase,NSE）、胶质原纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）免疫细胞化学法对NSCs进行鉴定.结果 培养的神经球Nestin表达阳性,血清诱导后可分化为NSE阳性神经元和GFAP阳性星形胶质细胞,具有自我增殖和多向分化能力,是NSCs.当NSCs接种密度为1×106/mL时,细胞增殖速度快,神经球生成的数量多.传代的方法应视情况而定,传代时间为7d左右.结论 建立了简单、稳定的新生大鼠NSCs的体外培养方法,为进一步研究NSCs的生物学特征及组织移植奠定了基础.
- 赵昱李莉张金平赵文杰陈炜王慧娟李陈莉
- 关键词：干细胞细胞培养技术
- 外源表达Nkx2-5基因诱导P19细胞心肌分化
- 目的：哺乳动物成熟个体中的心肌细胞是终末分化的细胞，受到损伤时一般由瘢痕进行替代修复，由此造成的心肌细胞缺失和数量下降是导致心脏收缩功能下降，进而引起心力衰竭等心脏疾病的重要原因。近年来的研究表明，成体心脏中的心肌干细胞...
- 张金平
- 关键词：NKX2-5P19细胞心肌分化基因转染5-氮胞苷
- 文献传递
- 大鼠应激耐受多系分化细胞的分离、扩增及鉴定
- 陈炜尹青张金平赵春芳孔祥增
- 该课题为Muse cells研究和临床应用提供种子细胞。以大鼠BMSCs为来源，进一步完善了BMSCs分离、培养技术，经流式细胞技术和向心肌等细胞分化鉴定，结果表明培养的BMSCs具有较高纯度，具有干细胞性质；首次以大鼠...
- 关键词：
- 关键词：干细胞种子细胞
- 雌、孕激素对LPA3在小鼠子宫内膜围着床期表达的影响被引量：9
- 2009年
- 目的研究小鼠围着床期子宫内膜溶血磷脂酸受体3（LPA3）的表达以及雌、孕激素和孕激素拮抗剂RU486对其表达的影响。方法用免疫组化法,检测妊娠第1-6天小鼠子宫内膜LPA3蛋白的表达规律;用RT-PCR、Western blot检测子宫内膜LPA3的表达。结果妊娠第1-6天小鼠子宫内膜组织均有LPA3表达,3 d表达开始增强,4 d最强,5和6 d表达骤然下降。去势小鼠子宫内膜表达低水平LPA3;孕激素提高子宫内膜LPA3的表达,且呈时间依赖性。雌激素对LPA3表达无明显影响。雌、孕激素联合应用,雌激素降低孕激素对子宫内膜LPA3表达的上调作用。RU486减弱孕激素的上调作用。结论LPA3可能参与了胚胎的种植。雌、孕激素可能通过影响小鼠子宫内膜LPA3的表达,共同参与小鼠子宫内膜容受性的建立。
- 郭燕红张雷邵素霞尹青龚淼张金平赵静
- 关键词：溶血磷脂酸受体3孕激素RU486子宫内膜
- 外源表达Nkx2-5基因诱导P19细胞向心肌分化被引量：8
- 2007年
- 目的:构建人Nkx2-5基因融合绿色荧光蛋白真核表达质粒pEGFP-N1-Nkx2-5,探讨外源性Nkx2-5基因诱导P19细胞向心肌分化的作用。方法:以真核表达质粒pEFSA-HA-Nkx2-5为模板,PCR扩增得到人Nkx2-5基因,将目的片段亚克隆到pEGFP-N1载体,鉴定正确。将重组质粒pEGFP-N1-Nkx2-5以脂质体法转染P19细胞,G418筛选2周,聚集4d,贴壁培养16d。以免疫细胞化学检测desmin、α-sarcomeric actin和cardiac Troponin T(cTnT)的表达。结果:将Nkx2-5基因正确插入pEGFP-N1载体,外源表达Nkx2-5基因可使P19细胞在无诱导剂、聚集条件下表达desmin、α-sarcomeric actin和cTnT蛋白。结论:成功构建真核表达质粒pEGFP-N1-Nkx2-5,外源表达Nkx2-5基因诱导P19细胞向心肌分化。
- 张金平张雷王惠娟王多赵昱尹青赵春芳
- 关键词：NKX2-5质粒构建P19细胞心肌分化
- 5-氮胞苷诱导外源表达Nkx2-5的P19细胞向心肌分化的研究被引量：1
- 2009年
- 目的研究在单层培养条件下,5-氮胞苷(5-azacytidine,5-aza)诱导表达Nkx2-5的P19细胞向心肌分化的可能性和效率。方法实验分为实验组和对照组,实验组细胞为稳定表达Nkx2-5的P19细胞,对照组为P19细胞。2组细胞均在单层培养条件下,以5-aza(1μmol/L)诱导。倒置显微镜观察细胞的生长状态;诱导4、8、12、16d,Western blot检测α-sarcomeric actin和cTnT的表达;并用免疫荧光双标检测α-sarcomeric actin和cTnT的共表达。结果实验组和对照组细胞在5-aza诱导下,生长缓慢,死亡细胞数目增多。随贴壁细胞密度增加,形成类似于聚集体贴壁生长的状态,中心细胞小、密集,周边细胞呈放射状排列,胞体长梭形,伸出突起。实验组诱导8、12、16d检测到α-sarcomeric actin和cTnT2种蛋白的表达和共表达,表达量呈增多趋势;诱导12、16d时α-sarcomerica ctin的表达量与8d比差异有统计学意义(P<0.01),诱导16d的表达量与12d比差异有统计学意义(P<0.01);cTnT在诱导12、16d的表达量与8d比差异有统计学意义(P<0.01)。对照组没有2种蛋白的表达和共表达。结论5-aza可诱导单层生长的表达Nkx2-5的P19细胞向心肌分化。
- 张金平赵静王慧娟赵秀军赵春芳张雷
- 关键词：P19细胞心肌分化
- 大脑皮层神经元微管相关蛋白-2在人胚发育过程中的表达变化被引量：2
- 2008年
- 目的观察微管相关蛋白-2(MAP-2)在人胚胎大脑发育过程中的作用,为预防先天性神经系统疾病提供理论依据。方法收集3、4、5、6、7个月胎龄人胚胎组织标本,采用免疫组织化学方法观察其大脑皮层神经元MAP-2(a、b、c)表达变化。结果免疫反应阳性产物均定位于胞质,胞核不着色;随月龄增加,大脑皮层神经元MAP-2(a、b、c)表达逐渐增多,细胞阳性反应平均光密度(OD值)3月龄为0.1297±0.0051,4月龄为0.1832±0.0050,5月龄为0.2597±0.0058,6月龄为0.3284±0.0067,7月龄为0.3909±0.0039。结论在人胚胎大脑发育过程中,MAP-2(a、b、c)可能参与神经元的发育、结构稳定及突起形成。
- 王慧娟郭建国张金平张惠欣赵昱李陈莉
- 关键词：胚胎微管相关蛋白-2大脑皮质神经元
- 应用Cx43基因转染的成肌细胞治疗心肌梗死的研究
- 邵素霞张雷吕平赵静王多刘丽霞张金平赵秀军赵春芳
- 该项目运用转基因技术对L6-Cx43细胞对心肌梗死的治疗作用进行了比较系统研究，现已取得了阶段性成果，为心梗等心脏疾患的基因治疗提供一些理论及实验依据。该项目在技术上采用了基因转染技术、细胞培养技术、分子生物学技术和传统...
- 关键词：
- 关键词：心肌梗死成肌细胞移植治疗基因治疗
- 分辨学习训练对谷氨酸神经毒性的保护作用研究
- 谷氨酸是人及哺乳动物脑内重要的兴奋性神经递质,但过量谷氨酸可导致神经元变性死亡,脑缺血、癫痫等神经疾患都伴有谷氨酸的过量释放.该实验以SD大鼠为对象,以脑组织的结构变化为指标,研究了分辨学习活动对谷氨酸单钠(MSG)所致...
- 张金平
- 关键词：谷氨酸神经毒性神经保护
- 文献传递
- 溶血磷脂酸受体3在小鼠胚胎围着床期子宫内膜的表达及意义被引量：5
- 2009年
- 目的探讨溶血磷脂酸受体3（LPA—R3）mRNA和蛋白在小鼠胚胎着床过程中表达的动态变化。方法将78只雌性昆明小鼠随机分为真孕组（36只）、假孕组（36只）和对照组（6只），应用反转录．聚合酶链反应（RT-PCR）和Westernblotting以及免疫组织化学sP法，检测胚胎围着床期（0～6d）LPA—R3mRNA和蛋白在小鼠子宫内膜的表达和定位。结果LPA—R3主要分布于小鼠子宫内膜腔上皮、腺上皮和部分基质细胞的胞质。LPA—R3mRNA和蛋白在小鼠胚胎着床过程中，3d时开始上升，4d时达峰值，5d、6d骤然下降至基础水平。假孕组子宫内膜LPA—R3mRNA和蛋白表达水平及变化规律与相应同期真孕组一致。结论LPA—R3可能参与了胚胎的着床和子宫内膜容受性的建立过程。
- 郭燕红张雷邵素霞尹青赵春芳龚淼张金平赵静
- 关键词：溶血磷脂酸受体3胚胎着床反转录-聚合酶链反应免疫印迹法
