张绍松 作品数:66 被引量:296 H指数:10 供职机构: 云南省农业科学院 更多>> 发文基金: 云南省自然科学基金 国家自然科学基金 云南省烟草公司项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
烟草渗调蛋白基因的分离克隆及序列分析 1998年 烟草渗调蛋白基因的分离克隆及序列分析*鄢波陈莉张绍松黄兴奇**(云南省农科院生物技术研究所,昆明650223)CLONINGANDSEQUENCINGOFTHEGENEENCODINGOSMOTINFROMNICOTIANATABACUMYanBoC... 鄢波 陈莉 张绍松 黄兴奇关键词:烟草 分离克隆 抗病育种 蕃茄转基因受体系统的研究 被引量:12 1998年 对蕃茄基因转化的受体系统进行了研究结果表明:在蕃茄离体子叶(或子叶切段)培养中,只加细胞分裂素(Zt或BA)即可使不定芽充分分化,而少量生长素对不定芽的分化反而有抑制作用;在所试验过的多种外植体中,以2/3子叶片处切割子叶所产生的外植体用作转化受体最好;不同蕃茄品种、同一品种的不同外植体及同一外植体的不同培养方式等均对转化频率有一定的影响;通过生长素短期刺激诱导,可解决转基因植物生很困难的问题. 贺竹梅 李宝健 张绍松 黄兴奇关键词:蕃茄 基因转化 受体系统 植物病原根结线虫的染色方法研究 被引量:3 2014年 根结线虫是许多农作物的重要病原,在农业生产中常极大地降低农作物的产量和质量。本研究中选用了7种不同染料,分别对侵入寄主根系组织初期的J2幼虫、雌虫产生的卵块团、雌虫尾部会阴花纹、及鉴别J2幼虫的死虫与活虫的染色方法进行了探索,这些方法便于有效了解和识别病原在侵染寄主不同阶段的形态。试验结果表明,溴酚蓝溶液对侵入根系的J2幼虫具有良好的染色效果;对于根系上的卵块团与雌虫的会阴花纹,cochenille red A或phloxine B溶液的染色效果较清晰;用甲基蓝与吖啶橙溶液分别对J2幼虫染色后,可相应地在可见光和荧光显微镜下判别J2幼虫中的死虫。 李勇军 李宏光 E.Schliephake H.Budahn 朋金娥 刘春明 张绍松关键词:根结线虫 染料 染色 马铃薯质体表达载体构建及遗传转化初报 <正>随着植物基因工程研究的深入,人们发现胞内细胞器也可进行外源基因转化。质体转化与核转化相比有以下优势:外源基因表达效率高,表达稳定,不存在因基因失活和随机插入而造成的位置效应;外源基因不会随花粉扩散而转移到近缘物种中... 丁玉梅 吴毅歆 杨正安 周晓罡 张绍松 孙茂林文献传递 马铃薯质体表达载体构建及GFP基因在块茎中的瞬时表达 被引量:7 2008年 利用高等植物质体基因组在进化中高度保守的特点,根据烟草质体基因组全序列设计合成引物,PCR扩增并克隆了马铃薯质体的trnI-trnA基因片段。将测序正确的trnI基因和trnA基因作为定点整合外源基因的同源重组片段,构建成包含Prrn-gfp-aadA-TpsbA表达盒的马铃薯质体定点转化载体pBMLSIA-GFP,酶切鉴定表明,所构建载体符合预期设计。采用该载体对马铃薯块茎进行基因枪法转化,结果表明,GFP基因可在质体特异性启动子Prrn及终止子TpsbA的调控下在马铃薯块茎中瞬时高量表达,经基因枪轰击后马铃薯块茎在紫外投射仪下产生很强的绿色荧光,在距离为6cm,压力1100psi轰击2枪的条件下产生的绿色荧光最强。马铃薯块茎可溶性蛋白SDS-PAGE电泳分析表明,GFP蛋白表达量约占总可溶性蛋白的15.4%-30.2%,均达到了较高的表达水平。该载体对后期马铃薯质体转化体系的建立和其他功能基因导入马铃薯质体进行性状改良具有重要应用价值。 丁玉梅 杨正安 周晓罡 张绍松 孙茂林关键词:马铃薯 质体 GFP基因 氮胁迫条件下稻瘟病菌分泌蛋白致病性分析 被引量:6 2009年 以CH-63和TH-16 2个致病性差异的稻瘟病菌株为材料,在缺氮培养条件下进行液体培养。经培养2 d后,采用铵盐沉淀及透析纯化处理获得稻瘟病菌培养滤液中的分泌蛋白。分别采用致伤接种及浸泡处理对该蛋白作用水稻植株后的病理反应进行系统研究,结果表明经致伤接种的水稻叶片及茎杆接种斑处出现明显的坏死病斑,其病斑直径是对照的2~4倍。浸泡处理的水稻幼根出现严重褐化,植株生长矮小,株高仅为对照的1/2。对上述稻瘟病菌株分泌蛋白进行酶解处理后病症消失或减弱,进一步确证其为引起上述病理反应的主要因子。将该分泌蛋白接种24个水稻单基因系,接种后72 h根据病斑长度将24个IRRI水稻单基因系按抗、中、感病性状分组。对稻瘟病菌菌株CH-63和TH-16的缺氮分泌蛋白致病力强弱差异与菌丝块接种结果进行比较,结果表明CH-63致病力强于TH-16。 周晓罡 苏源 李成云 丁玉梅 张绍松 孙茂林 李进斌关键词:氮胁迫 稻瘟病菌 分泌蛋白 一种灭杀根结线虫的微波旋耕机 本实用新型涉及微波旋耕机技术领域,具体揭示了一种灭杀根结线虫的微波旋耕机,包括推车主体,所述推车主体的底面从左至右依次固定连接有隔离壳、支撑板、连接块与支撑腿,所述支撑腿的底端设有万向轮,所述支撑板的表面通过转轴固定连接... 余萍 张绍松 罗红梅 李树红 赵永昌 董超文献传递 用于叶绿体基因组转化的马铃薯高效再生体系的建立 被引量:5 2006年 云南马铃薯不同品种、不同外植体类型的植株再生能力差异极大。阿诗洋芋、K-18、287、丽薯3号、丽薯4号和紫依的分化率较低,在0-27.8%。多数品种带叶柄的叶片再生能力大于叶盘,茎段分化率最低。会-2是最易诱导植株再生的品种,不同外植体的分化率在20.8%-92.2%,叶盘分化率最高,达92.9%,且平均分化芽数达8.2个,适合于会-2的壮观霉素浓度为100mg/L。筛选出了用于叶绿体转化的马铃薯会-2的高效再生体系和壮观霉素浓度,为Bt基因导入马铃薯叶绿体基因组奠定了基础。 丁玉梅 杨正安 吴毅歆 周晓罡 张绍松 孙茂林关键词:马铃薯 植株再生 叶绿体转化 外植体 农杆菌介导的甜菜碱醛脱氢酶基因转化甘蓝的研究 被引量:6 2009年 为获得抗旱和耐盐性提高的甘蓝植株,通过农杆菌介导法将来自菠菜的甜菜碱醛脱氢酶(Betaine Aldehyde Dehydrogenase,BADH)基因导入甘蓝品系03079,并采用正交设计优化影响转化效率的参数,建立了甘蓝高效转化体系,即以侵染液为AA液体培养基、乙酰丁香酮200μmolL-1、侵染时间20min、共培养天数2d为最佳转化参数,在该条件下转化率可达54.26%。转基因甘蓝植株经PCR检测初步说明BADH基因已导入甘蓝中,Southern杂交证明BADH基因已稳定整合到甘蓝基因组中。甜菜碱脱氢酶活性测定结果表明,经过聚乙二醇(PEG)、NaCl和干旱处理的转基因甘蓝植株的BADH酶的平均比活力范围在2.1Umg-1~3.6Umg-1之间,不同处理的转基因株系酶比活力显著高于相应的未转基因株系。膜的相对电导率测定结果说明,经过PEG、NaCl和干旱处理的转基因植株平均相对电导率在16.2%~32.6%之间,耐逆境胁迫处理后的绝大多数转基因株系相对电导率显著低于相应对照。多数转BADH基因甘蓝植株在干旱、盐胁迫和PEG胁迫条件下生长势强于未转基因植株,表现为大多数转基因株系株高增幅显著高于对照,说明BADH基因的导入能提高转基因甘蓝植株的抗旱和耐盐性。我们获得的抗旱和耐盐能力明显提高的转基因甘蓝植株,可作为培育耐盐、抗旱甘蓝品种的种质材料。 周国雁 杨正安 张应华 郭凤根 周晓罡 张绍松 孙茂林 伍少云 丁玉梅关键词:甘蓝 农杆菌介导法 BADH基因 烟草漂浮育苗施肥量与电导率关系及对培育健壮苗的影响 被引量:14 2012年 烟草漂浮育苗的施肥量与漂池溶液的电导率大小有关。分别以专用肥和KCl的浓度梯度水溶液,检测其电导率,获得直线回归方程yF=10037x+498.6和yKCl=15304x+570.6,其相关系数为rF=0.999和rKCl=0.998,表明可通过测定漂池液的电导率,推测肥料浓度的变化。以总施肥量设3个水平、在3个育苗时期施肥、用3个烟草品种培育烟苗、检测漂池液电导率的动态变化和调查烟苗生长状况。结果表明,电导率与施肥量呈正相关;总施肥量2400 g/标池时可满足育苗过程中烟苗所需养分,在适宜时期施肥,可培育健壮烟苗;施肥水平与根腐发生率有关,差异极显著;在试验的烟草品种中,红花大金元对根腐较敏感;肥料浓度约0.32%、电导率约4000μS/cm时,发生根腐的潜在风险最高。 李勇军 李宏光 刘春明 何金祥 朋金娥 张绍松关键词:烟草 育苗 施肥量 电导率