张硌
- 作品数：19 被引量：50H指数：4
- 供职机构：解放军第307医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金军事医学计量科研专项课题更多>>
- 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术机械工程电气工程更多>>
- 巨噬细胞系及PLEKHQ1基因敲除小鼠实验固定夹设计
- 2016年
- 目的:设计研制巨噬细胞系及PLEKHQ1基因敲除小鼠实验固定夹,为小鼠尾部采血和注射实验提供安全、简易、方便及省时的实验工具。方法:采用50 ml注射器按图纸开槽打孔,制作成巨噬细胞系及PLEKHQ1基因敲除小鼠实验固定夹;使用50 ml塑料试管及合适尺寸的塑料底托,制作成小鼠实验固定夹底座。结果:该小鼠固定夹与目前市场销售的小鼠固定夹相比较,具有制作简单、成本低廉、使用安全及操作简便省时等优点。结论:该小鼠实验固定夹为小鼠进行尾部静脉采血及注射等实验操作提供了安全、便利的实验工具,极大的提高了实验的工作效率。
- 刘宏举张鹏飞张硌
- 样本库配套的转化医学实验平台建设被引量：1
- 2016年
- 目的:探讨样本库转化实验平台建设及其在基础实验室和临床上所具有的功能与作用。方法:通过文献评阅,确立转化医学实验平台的功能、作用与双向转化路径;根据功能区进行硬软件功能配置,制订管理规范。结果:实现了样本库转化实验平台支撑基础与临床相互转化的运行机制。结论:样本库医学转化实验平台在基础实验室与临床之间建立起一个双向转化路径,有效启动样品收集、相关课题研究工作。
- 张鹏飞张鹏张硌满秋红张宏
- 关键词：样本库实验室
- 稳定表达人巨噬细胞集落刺激因子的L929细胞株的建立
- 2018年
- 目的:建立稳定表达人巨噬细胞集落刺激因子(hMCSF)的L929细胞株,用于体外培养人源巨噬细胞。方法:采用慢病毒感染的方法将载体质粒pCDH-hMCSF-HA导入L929细胞中,通过荧光显微镜观察病毒感染情况,利用免疫印迹实验检测细胞及培养上清中hMCSF的表达。结果:慢病毒感染的方法使L929细胞株能够稳定表达hMCSF,并已稳定传代。结论:采用慢病毒重组系统能够成功建立稳定表达hMCSF的L929细胞株,并高效表达hMCSF,为体外培养人源的巨噬细胞提供高效途径。
- 陆琤周晨辰张鹏飞张硌张鹏
- 关键词：巨噬细胞集落刺激因子慢病毒感染
- PLEKHQ1基因敲除小鼠的永生化骨髓来源巨噬细胞系的建立
- 2017年
- 目的:建立PLEKHQ1基因敲除小鼠的永生化骨髓来源巨噬细胞系,为PLEKHQ1基因功能的研究奠定基础。方法:用慢病毒感染的方法将包装质粒pCDH-SV40/GFP导入野生型和PLEKHQ1基因敲除小鼠的骨髓来源巨噬细胞,建立永生化细胞系;观察永生化细胞的生物学性状,用聚合酶链反应(PCR)检测目的基因的整合,用RT-PCR鉴定目的基因的表达,并对永生化和非永生化骨髓来源巨噬细胞的生长状况进行比较。结果:构建的骨髓来源巨噬细胞系已扩大培养并稳定传代,经鉴定,SV40LT抗原已整合入细胞并稳定表达。结论:通过慢病毒感染细胞的方法成功构建了PLEKHQ1基因敲除小鼠的永生化骨髓来源巨噬细胞系。
- 陆琤周晨辰张鹏飞张硌查玉华
- 关键词：永生化
- 应急医学救援机动保障平台的设计与研发被引量：1
- 2015年
- 目的:设计研制一种为应对突发事件而进行应急医学救援的机动保障平台。方法:通过平台的功能定位与分析,确定主要技术指标,并进行整体模块化设计。该机动保障平台采用车辆与充气式帐篷相结合的技术模式,综合集成各种应急医学救援所需的装备与物资,形成正规化、系统化的救治流程。结果:应急医学救援机动平台可以携带≥200人(份)的现场应急救治药品与耗材,可展开2顶充气式救治帐篷,开设8个应急救治单元。结论:应急医学救援机动保障平台整体设计合理,可达到预定的技术指标要求,有效提升急救卫勤分队的救援能力。
- 李巍张硌张鹏荆斌
- 关键词：应急医学救援
- 稳定敲低MYH10基因细胞株的建立被引量：2
- 2015年
- 目的构建稳定敲低MYH10基因的COS-7细胞株。方法在293TX细胞中进行病毒的包装,用获得的高效价慢病毒感染COS-7细胞,通过免疫印迹和荧光显微镜,检测病毒感染后COS-7细胞MYH10蛋白表达的变化。结果在构建的两种重组质粒中,MYH10-lentiviral shRNA-2在转染后表现出明显的干扰作用,感染后能明显下调COS-7细胞的MYH10蛋白表达。结论病毒感染的COS-7细胞可明显抑制COS-7细胞内源MYH10的表达,说明了稳定敲低MYH10基因的COS-7细胞株的建立,为进一步研究MYH10在相关疾病中的功能奠定了基础。
- 周晨辰陆琤张鹏飞张硌
- 关键词：慢病毒感染
- PLEKHQ1基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞永生化细胞系的建立被引量：1
- 2017年
- 目的:建立PLEKHQ1基因敲除小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)永生化细胞系,为全面研究PLEKHQ1基因功能提供细胞实验材料。方法:采用慢病毒感染的方法将猿猴病毒40(SV40)大T抗原基因导入已鉴定出基因型的MEF中,建立永生化细胞系;利用聚合酶链反应(PCR)检测SV40大T抗原基因在MEF中的整合情况,利用反转录PCR及凝胶成像的方法观察SV40大T抗原基因在MEF中的表达。结果:SV40大T抗原基因已整合至MEF中,且此类MEF已扩大培养及稳定传代半年之久。结论:成功建立的PLEKHQ1基因敲除MEF永生化细胞系,可为进一步研究PLEKHQ1基因功能提供细胞实验材料。
- 张鹏飞张硌陆琤周晨辰
- 关键词：慢病毒感染胚胎成纤维细胞永生化
- 应急医学救援机动保障平台的设计与研发
- 目的 设计研制一种为应对突发事件而进行应急医学救援的机动保障平台。方法 通过平台的功能定位与分析，确定主要技术指标，并进行整体模块化设计。该机动保障平台采用车辆与充气式帐篷相结合的技术模式，综合集成各种应急医学救援所需的...
- 李巍张硌张鹏荆斌
- 关键词：应急医学救援
- 原核质粒pGEX-4T-2-PLEKHQ1及真核质粒pCMV-Myc-PLEKHQ1的构建与蛋白表达被引量：2
- 2015年
- 目的:构建基因PLEKHQ1的原核质粒及真核质粒。方法:全长编码基因PLEKHQ1的聚合酶链反应(PCR)产物经Eco RⅠ和Kpn1双酶切后,分别与双酶切后的载体pGEX-4T-2及载体pCMV-Myc相连,在pGEX-4T-2-PLEKHQ1转化E.coli DH5α提取质粒后,转化E.coli BL21中诱导GST-Q1融合蛋白表达,利用谷胱甘肽琼脂糖4B纯化诱导的融合蛋白;而pCMVMyc-PLEKHQ1则瞬转至293TX细胞;用蛋白质印迹法(Western blot)检测GST-Q1和Myc-Q1融合蛋白表达。结果:将获得的重组质粒进行双酶切鉴定,得到约1500 bp的目的片段,符合预计大小。质粒经测序分析正确后,Western blot检测到诱导及纯化后的GST-Q1和转染293TX后的Myc-Q1蛋白。结论:成功构建的pGEX-4T-2-PLEKHQ1和pCMV-Myc-PLEKHQ1重组质粒,为深入研究PLEKHQ1功能奠定良好的基础。
- 陆琤周晨辰张鹏飞张硌
- 关键词：重组质粒
- PLEKHQ1基因敲除小鼠基因型鉴定方法被引量：3
- 2015年
- 目的:探讨鉴定PLEKHQ1基因敲除(KO)小鼠基因型的方法。方法:对PLEKHQ1基因敲除杂合子小鼠进行单独饲养及配种繁殖,繁殖后其子代出现野生型、杂合子型及纯合子型3种基因型,提取每只小鼠的基因组DNA,采用聚合酶链反应(PCR)和变性方法进行基因类型鉴定。结果:采用PCR和变性法成功鉴定出PLEKHQ1基因敲除小鼠的基因型。结论:这种无需T7酶切的小鼠基因型鉴定方法可用于PLEKHQ1基因敲除小鼠的基因型鉴定。
- 张鹏飞张硌陆琤周晨辰
- 关键词：基因敲除小鼠纯合子杂合子
