张文祥
- 作品数：7 被引量：3H指数：1
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- 小鼠抗人小细胞肺癌单抗轻链可变区基因的体外扩增、克隆及序列分析被引量：2
- 1992年
- 本文通过一对分别位于小鼠免疫球蛋白轻链可变区基因 FR1骨架区和 FR4骨架区的通用引物,利用 PCR 技术首次从小鼠抗人小细胞肺癌2F7杂交瘤细胞染色体组总 DNA 中直接扩增出相应的免疫球蛋白轻链可变区基因,扩增出的基因片段经引物上引进的两个限制性内切酶位点直接克隆到装有人免疫球蛋白轻链恒区的克隆载体 pGEM-7Zf(+)-V_kPCR 中的 EcoR1和 BglⅡ内切酶位点之间.通过对其进行顺序分析,结果表明我们克隆得到了免疫球蛋白轻链可变区基因,其长度为318bp.
- 吴文书李岱宗刘健黄震宇张文祥洪锦心
- 关键词：杂交瘤通用引物
- 应用原位突变技术构建免疫球蛋白K链可变区基因克隆及表达载体被引量：1
- 1995年
- 设计并合成了一对聚合酶链反应（ＰＣＲ）的通用引物，可以从小鼠杂交瘤的ｃＤＮＡ中扩增出免疫球蛋白（Ｉｇ）Ｋ链可变区（ＶＫ）基因。利用这一对引物和原位突变技术，在小鼠的一个ｇｅｎｏｍｉｃＶＫ基因的两端分别引入一个ＤＮＡ限制性内切酶的酶切位点，构建成一个ＩｇＶＫ基因的通用型克隆载体。并将ＶＫ基因片段同人ｋ链基因区基因片段重组，构建成人－鼠嵌合ｋ链基因表达载体。
- 张文祥程华旭刘健
- 关键词：免疫球蛋白嵌合抗体
- 聚合酶链反应法扩增免疫球蛋白变区基因
- 1993年
- 用异硫氰酸胍抽提抗人小细胞肺癌单克隆抗体杂交瘤细胞株2F7的总RNA,用逆转录酶合成第一链cDNA,用PCR技术扩增出351 bp的重链变区基因(V_H)和324bp轻链变区基因(V_L),分别克隆至pUCV_(NP)-PCR和pWR13载体上,经筛选和DNA序列分析研究,证实已获得了该单克隆抗体的变区基因.
- 刘健王斌潘志美田培坤张文祥
- 关键词：聚合酶链反应免疫球蛋白杂交瘤
- 人免疫球蛋白轻链恒区基因的体外扩增及其在大肠杆菌中的分泌表达
- 1992年
- 本文应用聚合酶链反应(PCR)技术体外大量扩增人免疫球蛋白轻链恒区基因(人C_k基因),并将该基因克隆至分泌型表达载体pINⅢ-ompA2,转入大肠杆菌中表达。应用水休克法抽提大肠杆菌的周质蛋白,经SDS-PAGE电泳,免疫印迹法分析,结果表明人恒区基因在大肠杆菌中得到表达,并能分泌至细菌的周质空间。约50％的表达蛋白其ompA信号肽已被切除。
- 吴文书刘健孙学逊黄震宇张文祥郭虹纷
- 关键词：免疫球蛋白
- 人－大鼠嵌合抗双滩病毒抗体重链基因重组表达质粒的构建
- 1994年
- 人－大鼠嵌合抗双滩病毒抗体重链基因重组表达质粒的构建程卫青，杨为松，徐海峰，白雪帆，尚高峰（第四军医大学唐都医院传染科西安７１００３２）刘健，郭虹汾，张文祥，李斯德（上海市肿瘤研究所免疫室，上海２０００３９）早在八十年代中期，国外就已开展了入－鼠嵌合...
- 程卫青杨为松徐海峰白雪帆尚高峰刘健郭虹汾张文祥李斯德
- 关键词：抗体质粒
- 抗汉坦病毒人-大鼠嵌合重链基因在小鼠骨髓瘤细胞中的表达
- 1994年
- 从抗汉坦病毒大鼠杂交瘤KF12株细胞中提取总RNA,合成cDNA第一链,以此为模板,用PCR方法分别扩增出免疫球蛋白重链和轻链可变区基因(约360bp)。将PCR产物分别克隆至PWR13质粒中进行测序。结果显示,重链可变区基因(含357bp),轻链可变区基因(含351bp)有明确的构架区和超变区,经查Genebank。
- 程卫青杨为松白雪帆徐海峰尚高峰程华旭张文祥李思德
- 关键词：抗汉坦病毒小鼠骨髓瘤细胞重链可变区基因免疫球蛋白重链杂交瘤
- 噬菌体展示的抗汉病毒ScFv基因的构建及应用于细胞内免疫的基础研究
- 1994年
- 细胞内免疫(Intracellular Immunization)是一种将抗体基因导入细胞内阻断病毒组装的一项新技术。为探索抗汉坦病毒细胞内免疫的可行性,我们用SOE(Splice by overlapping extention)
- 程卫青白雪帆杨为松徐海峰尚高峰张文祥程华旭王斌李思德
- 关键词：细胞内免疫噬菌体展示抗汉坦病毒OVERLAPPINGLINKERSCFV
