张庆华
- 作品数:68 被引量:320H指数:8
- 供职机构:江西农业大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江西省教育厅科学技术研究项目江西省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学环境科学与工程文化科学化学工程更多>>
- 纤维素降解复合菌系中纤维结合蛋白的分离及鉴定被引量:5
- 2015年
- 采用亲和消化法分离纯化了纤维素降解复合菌系中的纤维素结合蛋白,纯化后的纤维结合蛋白液经SDS-PAGE(聚丙烯酰氨凝胶电泳)后得到13条条带(命名为CBP1- 13),通过对其进行酶谱分析,发现低分子量的蛋白主要表现CMC(羧甲基纤维素钠)酶活性,而高分子量(66- 200 kDa)的蛋白兼有CMC酶和木聚糖酶的活性,其中纤维结合蛋白CBP6表现出的木聚糖酶和CMC酶活性最强.这些条带经质谱鉴定后被确定由8种蛋白组成,除CBP4为Paenibacillus sp.分泌的木聚糖酶5外,其余的蛋白均由C.clariflavum DSM 19732所产生,其中CBP1-3为β-1,4木聚糖酶,CBP5,6为碳水化合物结合蛋白,CBP7-9,11,12为锚定蛋白,CBP10和CBP13为未知蛋白.通过结构域预测,发现除纤维结合蛋白CBP13外所有的蛋白均具有一种催化结构域,分别隶属于第8、9、10及48家族的糖苷水解酶,而部分蛋白(CBP1,2,4-6)还具有碳水化合物结构域或者锚定蛋白结构域(CBP5- 12).
- 黄根树孔令保朱向东王刚刘好桔张庆华
- 关键词:纤维素降解复合菌系纤维结合蛋白
- 酸叶胶藤的化学成分研究被引量:8
- 2011年
- 目的研究云南民间药用植物酸叶胶藤Ecdysanthera rosea茎的化学成分。方法采用硅胶柱、反相硅胶柱和Sephadex LH-20色谱进行分离纯化,通过理化常数和光谱分析鉴定化合物的结构。结果从酸叶胶藤的乙醇提取物中分离、鉴定了10个化合物的结构,分别是α-香树素(1)、羽扇豆醇(2)、3β-羽扇豆醇棕榈酸酯(3)、齐墩果酸(4)、山柰酚3-O-L-鼠李糖(5)、5α-hydroperoxycostic acid(6)、三出蜜茱萸素(ternatin,7)、ayanin(8)、casticin(9)、halicerebroside A(10)。结论化合物1~10为首次从该植物中分离到。
- 朱向东张庆华王飞叶亚建
- 关键词:三萜黄酮
- 持续表达的丙型肝炎病毒NS4B激活HepG2细胞内质网应激反应的研究被引量:2
- 2012年
- 目的研究持续表达的丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白4B(NS4B)对HepG2细胞内质网应激反应的影响。方法 NS4B重组真核表达质粒pcDNA3.1(-)NS4B通过脂质体转染HepG2细胞,G418筛选、基因组PCR和Western blot鉴定稳定转染细胞;RT-PCR检测稳定转染细胞内人X盒结合蛋白1(XBP1)mRNA剪接,荧光素酶试验检测稳定转染细胞内GRP78启动子、XBP1启动子和核因子κB(NF-κB)活性。结果基因组PCR和Western blot鉴定证实NS4B基因整合到转染HepG2细胞的染色体上,并有效表达;在NS4B稳定转染的HepG2细胞中,检测到XBP1mRNA剪接、XBP1和Grp78启动子激活、Ca2+稳态变化及NF-κB激活。结论 NS4B在HepG2的稳定表达诱导了内质网应激反应,揭示NS4B可能通过诱导肝细胞内质网应激反应在HCV感染及其致病性中发挥作用。
- 熊江红张庆华张艳妮朱向东孔令保
- 关键词:肝炎病毒属内质网应激反应HEPG2细胞
- 酵母双杂交筛选与胞内劳森菌LI0902互作宿主蛋白被引量:2
- 2020年
- 为了鉴定胞内劳森菌(Lawsonia intercellularis,LI)外膜蛋白LI0902在细菌感染中的作用,本试验以胞内劳森菌疫苗DNA为模板,设计特异性引物进行PCR扩增,并成功构建诱饵表达载体pGBKT7-LI0902。将通过菌落PCR和测序验证的质粒转化酵母菌株Y2H Gold后,发现LI0902能在酵母细胞中正确表达,对酵母细胞无毒性,且无自激活活性。将含有pGBKT7-LI0902的酵母菌株Y2H Gold与猪肠上皮细胞系IPEC-1 cDNA文库菌株Y187进行杂交,筛选、验证、测序后得到3个与LI0902相互作用的宿主蛋白。本试验研究了胞内劳森菌与猪肠上皮细胞相互作用,为揭示增生性肠炎的致病机理提供了线索。
- 张兰桥赖崇德戴益民张庆华钟其旺赖芬菊
- 关键词:酵母双杂交
- 木薯酒精废水高温厌氧消化系统中酶的提取与分布的研究被引量:1
- 2011年
- 木薯酒精废水中固形物(干基)的主要成分为纤维素和半纤维素,分别为30%和18%。由于内切-β-1,4-葡聚糖苷酶(CMC酶)和木聚糖酶在高温厌氧消化过程中对纤维素和半纤维素的水解起关键作用,作者比较了从厌氧污泥中提取CMC酶和木聚糖酶的6种方法,并分析了其在厌氧污泥中的分布情况。结果表明,用质量分数1% Triton X-100来提取CMC酶和木聚糖素酶是一种高效且温和的酶提取方法,且至少有占总酶质量90%的CMC酶和70%的木聚糖酶分布在污泥絮凝体(细胞表面或胞外聚合物)中。
- 王柯毛忠贵张成明张庆华陈程王欣姜立何江张建华张宏建
- 关键词:木薯酒精废水高温厌氧消化木聚糖酶胞外聚合物
- 一株纤维素降解菌的筛选、鉴定及产酶条件优化被引量:11
- 2021年
- 【目的】为筛选出高效降解厌氧消化残余物的纤维素降解菌,实现农业废弃物的高值化利用。【方法】本研究使用纤维素-刚果红透明圈法和酶活测定法从沼渣堆肥中分离出一株高效纤维素降解菌,结合形态学观察并通过16S rRNA测序,对该菌株进行鉴定。然后对该菌株的培养时间、培养温度、初始pH和接种量等培养条件进行单因素优化,并在此基础上以羧甲基纤维素酶(CMCase)和滤纸酶(FPase)活性为优化目标对该菌株的产酶条件进行响应面优化。【结果】分离出的一株纤维素降解菌F3为产碱杆菌(Alcaligenes faecalis strain),响应面优化结果表明,当培养温度、pH、培养时间和接种量分别取35℃、7.0、3 d和2%时,CMCase和FPase活性达到最高,分别为2.63 U/mL和2.23 U/mL,比未经优化前分别提高了29.56%和32.74%。【结论】该菌株在常温条件下具有较高的降解木质纤维素的能力,具有开发成沼渣高效好氧堆肥菌剂的潜质,为沼渣的高值化生物转化提供了优质菌种资源,为沼气工程的可持续发展奠定一定的基础。
- 钟斌陶文玲倪思毅安雪姣夏祥张庆华
- 关键词:纤维素降解菌菌种鉴定响应面优化
- 生物工程实验教学改革及安全教学方法初探——以江西农业大学为例被引量:2
- 2022年
- 实验教学是高校生物工程专业中不可或缺的教学环节,对培养学生的实践操作和独立思考能力以及思维的创新有非常重要的作用。目前我国高校生物工程专业实验教学中仍普遍存在一些传统的教学方式和实验安全隐患的问题,本文以此为出发点,并以江西农业大学为例,针对实验教学中存在的一些问题,对实验教学模式进行改革并创新实验教学方式、构建现代化教学模式、完善教学考核方式以及实验安全管理制度等,对生物工程专业实验教学的改革和对实验教学安全规范管理方法进行探讨。
- 安卫娟安雪姣张庆华李格肖小双
- 关键词:生物工程实验教学教学改革
- 生物工程专业多层次递进式实验教学改革的探索与实践——以江西农业大学为例被引量:2
- 2017年
- 为了解江西农业大学生物工程专业的实验教学改革效果,通过学生问卷的形式对教学改革进行了调查与分析。结果表明,多层次递进式实验教学应用在生物工程专业中,能够激发学生的学习兴趣,提高学生的实践能力,培养出适应社会需求的创新型高素质人才。
- 张庆华冯琳琳张宝张宝李汉广
- 关键词:生物工程专业实验教学教学实践
- ddx27蛋白的丢失导致斑马鱼咽部骨骼和肌肉的缺陷
- 为了研究ddx27在RNA生物发生中发挥的具体作用,以便更好地理解其在遗传发育中的功能。本实验利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,有效地获得了ddx27基因缺失突变体斑马鱼,之后利用阿尔新蓝染色及肌肉荧光标记鱼系观察...
- 时灿张庆华李伟明
- 关键词:斑马鱼细胞凋亡
- 文献传递
- 复合菌系RXS中木质纤维素降解酶类分析被引量:2
- 2016年
- 复合菌系RXS能分泌多种木质纤维素降解酶,为探究这些酶在木薯渣降解中的作用,对RXS的培养时间、酶作用的温度和pH值,以及添加金属离子对酶活性和降解效果的影响进行了研究。结果表明,在培养48 h后,木聚糖酶(Xylanase)、滤纸酶(FPAase)和内切葡聚糖酶(CMCase)酶活性均达到最大值(分别为56.02 U/m L、3.14U/m L和6.78 U/m L),pH=6.0(FPAase和Xylanase的最适pH值)、温度为55℃(FPAase和CMCase酶活性最高)条件下,RXS酶液处理可使木薯渣的失重率达到18.78%,纤维素和半纤维素质量分数分别由31.46%和20.19%下降到22.12%和12.23%。添加Cu^(2+)有效地抑制了酶液中FPAase和Xylanase的酶活性,木薯渣几乎不降解,纤维素和半纤维素组分质量分数基本不发生变化;分别添加Co^(2+)和Zn^(2+)时,对3种酶均有一定程度的抑制,木薯渣失重率仅为3.29%和4.70%;分别添加Fe^(2+)、Mg^(2+)时,FPAase酶活性被抑制,Xylanase与CMCase共同降解底物,木薯渣失重率分别达12.77%和15.81%,纤维素和半纤维素质量分数明显降低。研究表明,Xylanase与CMCase是复合菌系中降解木薯渣的关键酶,其协同作用可使木薯渣有效降解。
- 王荣胡方觊张庆华毛忠贵唐蕾
- 关键词:环境工程学复合菌系内切葡聚糖酶木聚糖酶木薯渣