张娜娜
- 作品数：31 被引量：93H指数：6
- 供职机构：山西医科大学第一医院更多>>
- 发文基金：山西省科技攻关计划项目国家杰出青年科学基金山西省回国留学人员科研经费资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学语言文字更多>>
- 血管紧张素1-7对血管紧张素诱导的p38 MAPK磷酸化表达的影响
- 目的探讨血管紧张素(Ang)1-7阻断AngⅡ致炎作用的可能机制。方法(1)用含20%胎牛血清的DMEM培养基在二氧化碳培养箱中培养HUVEC,待细胞生长至80%融合时无血清培养16小时后分两组:Ⅰ组:对照组,AngⅡ组...
- 杨志明梁长清张娜娜肖传实
- 文献传递
- LOX-1特异性小发夹RNA表达载体的构建及其效应被引量：1
- 2010年
- 氧化型低密度脂蛋白（ox—LDL）在动脉粥样硬化形成和发展过程中起着关键的作用，而血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1（LOX-1）是OX—LDL在血管内皮细胞上的主要受体，它在介导ox—LDL对血管内皮细胞的损伤、参与动脉粥样硬化的形成和发展过程中发挥了重要作用。
- 边云飞李茂莲杨慧宇杨志明高奋张娜娜肖传实
- 关键词：小发夹RNALOX-1动脉粥样硬化形成血管内皮细胞LDL
- 血管紧张素(1-7)对血管紧张素Ⅱ诱导的人脐静脉内皮细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1表达的影响被引量：3
- 2009年
- 目的观察血管紧张素(1-7)对血管紧张素Ⅱ诱导的人脐静脉内皮细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1表达水平的影响并探讨其可能作用机制。方法采用胰蛋白酶消化法原代培养人脐静脉内皮细胞,取2～5代用于实验,培养的人脐静脉内皮细胞随机分为对照组、血管紧张素Ⅱ组、血管紧张素(1-7)组、血管紧张素Ⅱ+血管紧张素(1-7)组、血管紧张素Ⅱ+血管紧张素(1-7)+血管紧张素(1-7)特异性受体拮抗剂A-779组,通过半定量逆转录聚合酶链反应和流式细胞术分别检测血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1基因和蛋白表达水平;用免疫印迹法检测p38丝裂原活化蛋白激酶磷酸化的表达水平。结果血管紧张素Ⅱ(10^(-6) mol/L)可以诱导血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1表达增加(P<0.05),血管紧张素(1-7)(10^(-9)～10^(-6) mol/L)随着浓度的增加抑制血管紧张素Ⅱ诱导的血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1表达水平增强(P<0.05);血管紧张素(1-7)特异性受体拮抗剂A-779可阻断血管紧张素(1-7)的上述效应(P<0.05)。与对照组相比,血管紧张素Ⅱ(10^(-6) mol/L)诱导后p38丝裂原活化蛋白激酶磷酸化表达水平显著增加(P<0.05);血管紧张素(1-7)(10^(-9)～10^(-6) mol/L)随着浓度的增加抑制血管紧张素Ⅱ诱导的p38丝裂原活化蛋白激酶磷酸化表达水平增强(P<0.05),血管紧张素(1-7)特异性受体拮抗剂A-779可阻断血管紧张素(1-7)的上述效应(P<0.05)。结论血管紧张素Ⅱ可诱导血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1及p38丝裂原活化蛋白激酶磷酸化表达增加,血管紧张素(1-7)抑制血管紧张素Ⅱ的上述效应,并且是通过其特异性受体发挥作用。
- 杨慧宇杨志明边云飞张娜娜梁斌肖传实
- 关键词：血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1P38丝裂原活化蛋白激酶
- 血管紧张素Ⅰ抑制血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖被引量：10
- 2007年
- 目的探讨血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的影响。方法采用组织贴块法培养VSMCs,取生长良好的第3～5代细胞用于实验。随机分为对照组、AngⅡ组、Ang-(1-7)组、AngⅡ+Ang-(1-7)组、AngⅡ+Ang-(1-7)+(A-779)组,通过3H胸腺嘧啶(3H-TdR)掺入法测定VSMCs的DNA合成,用结晶染色的方法检测细胞数目,观察VSMCs的增殖情况。结果①与对照组比,AngⅡ(100nmol/L)孵育细胞24h后可明显诱导VSMCs3H-TdR掺入量增加;Ang-(1-7)(1000nmol/L)可减少3H-TdR掺入量。②与AngⅡ组比较,Ang-(1-7)(10nmol/L、100nmol/L、1000nmol/L)呈浓度依赖性的抑制AngⅡ诱导的VSMCs3H-TdR掺入量。加入Ang-(1-7)特异性受体阻断剂A-779后,Ang-(1-7)此作用消失。③结晶染色结果显示,AngⅡ可诱导VSMCs数目明显增加(P<0.05)。Ang-(1-7)可抑制AngⅡ诱导的VSMCs增加,亦呈浓度依赖性(P<0.05)。结论Ang-(1-7)能抑制基础和AngⅡ诱导的VSMCs增殖,通过其特异性受体发挥作用。
- 梁斌杨志明张娜娜杨慧宇康玉明肖传实
- 关键词：细胞周期
- ABCA1在冠心病及其发病机制中的研究新进展被引量：6
- 2015年
- 动脉粥样硬化(As)是冠心病的主要病因,而泡沫细胞又是As的主要病因,过多的胆固醇在巨噬细胞中积累形成泡沫细胞,因此减少胆固醇的积累从而减少泡沫细胞的形成可能成为治疗As有效的方法。ATP结合盒转运体A1(ABCA1)可使细胞内胆固醇和磷脂转运到载脂蛋白AⅠ(Apo AⅠ)形成高密度脂蛋白前体,使过多的胆固醇进入肝脏重新利用或经胆汁和粪便排出,这个过程就是胆固醇逆转运。ABCA1还能够抑制As的炎症反应,引起血管内皮细胞变化,参与氧化应激反应,可通过多种代谢通路影响As,其不同的基因型对As的影响也不相同。因此,ABCA1在As的发生发展中具有举足轻重的作用。
- 韩耀霞张强梁斌张娜娜边云飞肖传实
- 关键词：ATP结合盒转运体A1胆固醇逆转运炎症反应氧化应激
- 肾素(前体)受体miRNA干扰质粒的构建及鉴定
- 2011年
- 目的设计及构建肾素(前体)受体微小干扰核糖核酸(miRNA)质粒,并鉴定出有效干扰质粒。方法设计及构建4对肾素(前体)受体的pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR miRNA及1对阴性对照miRNA干扰质粒,通过测序鉴定。将干扰质粒用LipofectamineTM 2000转染大鼠血管平滑肌细胞,通过顺时转染获得细胞系,倒置荧光显微镜下观察绿色荧光及流式细胞术确定转染效率,Real-time PCR和Western blot检测4对干扰质粒、阴性对照质粒肾素(前体)受体的mRNA及蛋白表达水平。结果测序显示肾素(前体)受体干扰序列及读框完全正确,倒置荧光显微镜及流式细胞术结果显示干扰质粒瞬时转染的大鼠血管平滑肌细胞系的转染效率均在60%以上。Real-time PCR和Western blot结果显示X2-2-3、X2-3-3干扰质粒对肾素(前体)受体mRNA及蛋白有较好的抑制效果。结论成功构建了肾素(前体)受体干扰真核表达载体,筛选出有效干扰质粒,为进一步研究肾素(前体)受体在大鼠血管平滑肌细胞中的作用提供参考。
- 张娜娜李茂莲边云飞高奋杨慧宇肖传实
- 关键词：血管平滑肌细胞
- 瑞舒伐他汀强化治疗对急性冠状动脉综合征患者经皮冠状动脉介入术后小而密低密度脂蛋白胆固醇水平及预后的影响被引量：14
- 2015年
- 目前，急性冠状动脉综合征（ACS）是心血管内科常见急危重症，PCI手术已经成为该类患者的首选治疗方法。新一代的他汀类降脂药物瑞舒伐他汀，具有很强的降脂作用，可以显著降低低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平，同时可以升高HDL-C，安全性和耐受性好。LDL是动脉粥样硬化致病的主要危险因素，但有些ACS患者即使LDL-C已经达到目标值，仍有心血管事件的发生。小而密低密度脂蛋白胆固醇（sd-LDL）是低密度脂蛋白的亚组份。多项研究证实，与常规LDL相比，sd-LDL有更强的致动脉粥样硬化的能力，尤其与ACS的关系更为密切。本研究通过对我院收治的ACS患者，PCI术后分别采用瑞舒伐他汀常规治疗和强化治疗，以观察瑞舒伐他汀常规剂量及强化治疗对PCI术后患者的sd-LDL的水平及预后的影响，现将结果报道如下。
- 王飞边云飞杨慧宇韩耀霞张娜娜肖传实
- 关键词：小而密低密度脂蛋白瑞舒伐他汀胆固醇水平介入术后
- 血管紧张素Ⅱ和血管紧张素-(1-7)对大鼠血管平滑肌细胞肾素(原)受体表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:研究血管紧张素Ⅱ(Ang II)和血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)肾素(原)受体[(P)RR]表达的影响。方法:将VSMCs按以下分组:(1)对照组:不加干预因素;(2)不同浓度AngⅡ组:分别加入AngⅡ10、100、1 000 nmol/L;(3)不同浓度Ang-(1-7)组:分别加入Ang-(1-7)10、100、1 000 nmol/L;(4)AngⅡ+losartan(AT1受体拮抗剂)组:losartan 10-6 mol/L预处理30 min后,再加入AngⅡ100 nmol/L;(5)AngⅡ+PD123319(AT2受体拮抗剂)组:先用10-5 mol/LPD123319预处理30 min后,再用终浓度为100 nmol/L AngⅡ;(6)CGP42112A(AT2受体激动剂)组:加入10-7 mol/L CGP42112A。各组用real-time PCR法和Western blotting法检测(P)RR的表达情况。结果:与对照组比,不同浓度AngⅡ可以促进(P)RR mRNA和蛋白的表达,并且呈浓度依赖性(均P<0.01);不同浓度Ang-(1-7)可抑制(P)RR mRNA和蛋白表达(均P<0.01),各浓度之间比较无显著差异(均P>0.05);加入CGP42112A可以促进(P)RR mRNA和蛋白的表达(均P<0.01),与AngⅡ处理组比较,加入PD123319可抑制(P)RR mRNA和蛋白表达(均P<0.01),加入losartan不能抑制(P)RR mRNA和蛋白表达(P>0.05)。结论:AngⅡ可通过AT2受体促进(P)RR mRNA和蛋白表达,而Ang-(1-7)可抑制(P)RR mRNA和蛋白的表达。
- 张娜娜李茂莲边云飞高奋杨志明杨慧宇肖传实
- 关键词：肾素(原)受体血管平滑肌细胞
- LOX-1对ox-LDL诱导的小鼠巨噬细胞MMP-9表达的影响
- 2018年
- 目的观察LOX-1对ox-LDL诱导的小鼠巨噬细胞MMP-9表达的影响。方法体外培养小鼠单核巨噬细胞RAW264. 7,构建LOX-1小干扰RNA(LOX-1-siRNA),并用LOX-1-siRNA 0. 5μg、1μg、1. 5μg与脂质体转染剂(μl)比例为1∶1,1∶2,1∶3转染RAW264. 7细胞48 h,经荧光显微镜观察不同转染条件下的转染效率,并分别使用反转录-多聚酶反应(RTPCR)和Western blot的方法检测各组LOX-1的mRNA和蛋白表达水平并选取最佳转染比例。随机将RAW264. 7细胞分成4组:对照组、ox-LDL组、ox-LDL+LOX-1-siRNA组和p Genesil组;分别使用反转录-多聚酶反应(RT-PCR)和Western blot的方法检测各组MMP-9的mRNA和蛋白表达水平。结果 (1)LOX-1-siRNA1及LOX-1-siRNA2分别转染RAW264. 7细胞48 h,LOX-1-siRNA2抑制作用强于LOX-1-siRNA1。(2)用LOX-1-siRNA与脂质体转染剂不同比例转染RAW264. 7细胞48 h后,当LOX-1-siRNA量为1. 0μg、Lipofectamine2000的量为2μl时转染效率最高,与其余任一组相比差异有统计学意义(P <0. 05)。(3)与对照组比较,ox-LDL组MMP9 mRNA表达水平明显升高; ox-LDL+LOX-1-siRNA组与ox-LDL组比较MMP-9 mRNA表达明显减弱; p Genesil组MMP-9 mRNA表达与对照组比较差异无统计学意义。(4)与对照组相比,ox-LDL组MMP9蛋白表达明显增加; ox-LDL+LOX-1-siRNA组与ox-LDL组比较MMP-9蛋白表达明显减弱; p Genesil组MMP-9蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义。结论 ox-LDL可促进小鼠巨噬细胞MMP9的表达;抑制小鼠巨噬细胞LOX-1的表达后,ox-LDL促进MMP9的表达相应减弱。由此可见ox-LDL可通过LOX-1受体促进MMP-9表达。
- 刘佳佳边云飞肖传实张娜娜杨志明杨慧宇
- 关键词：MMP-9LOX-1OX-LDL巨噬细胞
- LOX-1特异性小发夹RNA表达载体的构建及其对巨噬细胞源性泡沫细胞形成的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:靶向血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)基因的发卡样siRNA(shRNA)表达载体的构建及其对巨噬细胞源性泡沫细胞形成的影响。方法:(1)采用DNA重组技术,将LOX-1shRNA双链与线性化pGenesil-1质粒表达载体连接,构建LOX-1特异性小发夹RNA表达载体pLOX-1-shRNA1及pLOX-1-shRNA2,用脂质体法转染小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7),半定量逆转录聚合酶链反应法检测LOX-1mRNA的表达,Western blot法检测LOX-1蛋白的表达,选择沉默效果最佳的作为下一步的干预序列。(2)ox-LDL诱导巨噬细胞建立泡沫细胞模型,pLOX-1-shRNA进行干预,干预组使用脂质体法进行细胞转染,转染24小时后,再加入ox-LDL作用24小时,用油红O染色法及细胞内游离胆固醇及总胆固醇测定法观察对泡沫细胞形成的影响,倒置荧光显微镜观察RAW264.7细胞对Dil-ox-LDL的摄取率。结果:测序鉴定发现插入的发卡样序列正确,成功合成了发卡样LOX-1基因RNA干扰表达载体,pLOX-1-shRNA1及pLOX-1-shRNA2转染RAW264.7细胞后,其LOX-1基因和蛋白表达显著下调,并且以pLOX-1-shRNA2沉默效果最佳。结论:成功构建了能有效抑制LOX-1基因及蛋白表达的干扰表达载体,同时可抑制巨噬细胞源性泡沫细胞形成及对Dil-ox-LDL的摄取,为进一步利用RNA干扰技术防治动脉粥样硬化提供理论基础。
- 杨慧宇边云飞杨志明张娜娜肖传实
- 关键词：RNA干扰巨噬细胞源性泡沫细胞
