康桂娟
- 作品数：49 被引量：72H指数：5
- 供职机构：中国热带农业科学院橡胶研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国热带农业科学院橡胶研究所基本科研业务费专项项目海南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学化学工程医药卫生更多>>
- 一种膜结合NAC转录因子HbNTL2及其编码基因
- 本发明提供了一种膜结合NAC转录因子HbNTL2的编码基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明还提供了一种膜结合NAC转录因子HbNTL2，由SEQ ID NO：1所示核苷酸序列编码而成。本发明运用从巴西橡...
- 康桂娟聂智毅曾日中黎瑜代龙军
- 文献传递
- 橡胶树膜系统酵母双杂交cDNA文库构建及HbSRPP7互作蛋白筛选被引量：2
- 2023年
- 橡胶树橡胶粒子上的蛋白质在橡胶生物合成一系列反应过程中起着关键作用,它们直接决定着橡胶烃分子的数量和大小,影响天然橡胶的产量和质量。小橡胶粒子蛋白(small rubber particle protein,SRPP)是丰度仅次于橡胶延伸因子(rubber elongation factor,REF)的橡胶粒子蛋白组分,与橡胶粒子发育和橡胶生物合成密切相关。目前已知橡胶粒子上存在多种SRPP家族蛋白,但大部分成员的功能尚不清楚。SRPP可能通过与其他橡胶粒子蛋白相互作用发挥功能。为了筛选SRPP蛋白家族成员之一Hb SRPP7的互作蛋白,本研究利用位点特异性重组技术构建了原始库容为1.5×10^(7)CFU的均一化橡胶树胶乳膜蛋白酵母双杂交系统(membrane yeast two-hybrid system,MYTH)cDNA文库,该文库插入片段平均长度大于1500 bp,重组率约为100%。构建了用于MYTH系统筛选HbSRPP7互作蛋白的pBT3STE-SRPP7和pBT3SUC-SRPP7诱饵载体并确认其能在NMY32酵母菌株中正确表达,无自激活活性。使用pBT3STE-SRPP7诱饵质粒对胶乳MYTHcDNA文库进行筛选,获得21个HbSRPP7候选互作的蛋白,包括3个REF家族蛋白(HbREF1、HbREF3和HbREF8)、2个SRPP家族蛋白(HbSRPP1、HbSRPP2)、2个活性氧清除相关蛋白(thioredoxin H-type-like、L-ascorbate peroxidase 2)以及5个胁迫相关蛋白(high mobility group Bprotein 2-like、RPM1-interacting protein 4-like、stress-related protein-like、salt stress-induced hydrophobic peptide ESI3-like和F-box/kelch-repeat protein)。结果显示HbSRPP7除了可能通过与橡胶生物合成相关的橡胶粒子蛋白互作参与橡胶生物合成,也可能通过与生物和非生物逆境胁迫相关蛋白互作,响应橡胶树乳管生物和非生物逆境胁迫系统信号,参与橡胶粒子上的橡胶生物合成调控。该研究结果有助于了解SRPP家族蛋白的功能,为揭示橡胶粒子上参与橡胶生物合成的蛋白复合体组成,阐明橡胶生物合成及其调控的分子机制奠定基础。
- 聂智毅康桂娟覃怀德曾日中
- 关键词：橡胶树CDNA文库
- 巴西橡胶树HbREF3在橡胶生物合成中的作用机制研究
- 聂智毅邓治康桂娟覃怀德
- 该项目对HbREF3及其互作蛋白进行鉴定，分析HbREF3及其互作蛋白的表达及表达定位，并以橡胶生物体外合成实验及短角蒲通过公英遗传转化等技术鉴定它们与橡胶生物合成的关系。研究结果显示HbREF3与HbREF1、HbSR...
- 关键词：
- 关键词：橡胶树蛋白复合体
- 一种橡胶树HbWRKY82基因及其应用
- 本发明提供了一种橡胶树HbWRKY82基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还提供了该HbWRKY82基因编码的蛋白质及该基因的应用。本发明首次从橡胶树中克隆得到HbWRKY82基因，该基因具有转录因子功...
- 康桂娟闫栋陈晓丽曾日中杨礼富
- 文献传递
- 橡胶树胶乳表达酰基辅酶A结合蛋白HbACBP1和HbACBP2及应用
- 本发明公开了一种橡胶树胶乳表达酰基辅酶A结合蛋白HbACBP1和HbACBP2及应用。该2个蛋白的氨基酸序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6所示。本发明还公开了一种编码上述蛋白的基因，其核苷酸序列分别...
- 曾日中聂智毅王艺航黎瑜康桂娟覃怀德
- 文献传递
- 巴西橡胶树HbNTL2基因的克隆和表达分析被引量：3
- 2015年
- 利用RT–PCR和实时荧光定量PCR技术,对巴西橡胶树膜结合转录因子Hb NTL2进行克隆和表达,并通过酵母试验进行转录激活功能分析。结果表明,Hb NTL2基因的开放阅读框为1 380 bp,编码一个由459个氨基酸组成的蛋白,该蛋白属于NAC转录因子家族中的ANAC001亚族;在第6~172位氨基酸之间含有典型的NAC结构域,第433~453位氨基酸具有跨膜结构域,是膜结合NAC转录因子;Hb NTL2具有转录激活功能,转录激活区在C–末端;Hb NTL2在叶片的表达高于在橡胶树的其他部位,受割胶、茉莉酸（JA）和乙烯（ET）处理以及低温胁迫诱导。综合分析结果表明,Hb NTL2可能参与调控巴西橡胶树的生长发育和胁迫应答过程。
- 康桂娟黎瑜曾日中
- 关键词：巴西橡胶树基因克隆基因表达转录激活活性
- 橡胶树芽条苗圃增殖及其后复壮和换种方法
- 本发明属植物栽培领域，涉及一种橡胶树芽条苗圃增殖及其后复壮和换种方法，包括实生苗培育与移苗、增殖苗培育、接后管理、主干培养、接条采收、增殖苗复壮和换种过程。本发明选用无性系初级系比区良种芽条先通过高位芽接进行繁殖，再利用...
- 吴春太曾日中黎瑜聂智毅代龙军康桂娟田郎覃怀德
- 文献传递
- 酵母双杂交系统筛选新橡胶延长因子HbREF3互作蛋白被引量：5
- 2016年
- 橡胶延长因子(rubber elongation factor,REF)等橡胶粒子蛋白可能通过相互作用形成蛋白复合体在橡胶生物合成发挥作用。为鉴定REF家族中一新成员Hb REF3的互作蛋白,以橡胶树Hb REF3基因的c DNA序列为基础,分别构建了筛选Hb REF3相互作用蛋白的3种诱饵载体p GBKT7-Hb REF3-F(含全长ORF序列)及p GBKT7-Hb REF3-N(含N端序列)和p GBKT7-Hb REF3-C(含C端序列),并分别转化到Y2H Gold酵母菌株中,进行诱饵表达载体的自激活性与毒性检测。实验证明,3种诱饵载体转化的酵母菌能在SD/-Trp平板上正常生长,而在SD/-Trp/-His/-Ade平板上不能生长,因此,诱饵载体本身没有自激活性,它们的表达产物也没有毒性,不影响转化酵母菌Y2H的生长,满足作为诱饵质粒的条件,并用于橡胶树胶乳c DNA酵母表达文库的筛选。结果表明,用Hb REF3基因的全长ORF编码产物作诱饵,没有筛选到任何候选互作蛋白,而用Hb REF3的N端和C端区域分别作诱饵,均筛选到了可能与Hb REF3具有相互作用的候选蛋白,其中包括REF家族的其他成员和膜联蛋白D4等。
- 孙丽娜康桂娟黎瑜曾日中
- 关键词：橡胶树酵母双杂交诱饵载体
- 巴西橡胶树HbNAM基因克隆和表达分析被引量：3
- 2016年
- 为了研究巴西橡胶树中植物特有NAC转录因子的功能,笔者通过RT-PCR和实时荧光定量PCR技术对HbNAM的开放阅读框(ORF)进行了克隆和表达分析,并通过酵母转化实验进行转录激活活性分析。结果显示,HbNAM基因ORF为1 077 bp,编码358个氨基酸,在第12—167位氨基酸之间含有一个典型的NAC结构域,属于NAC转录因子家族中的NAM亚族。酵母试验表明,HbNAM在高度变异C端具有转录激活活性,具备转录因子的基本特征。实时荧光定量PCR分析发现,HbNAM在叶片、雄花、雌花、胶乳和树皮中均表达,其中以光合组织叶片和生殖组织雄花中的表达量最高,并且胶乳中该基因的表达受割胶、植物激素或植物生长调节剂茉莉酸(JA)和乙烯利(ET)以及低温胁迫影响,推测HbNAM可能与植物的生长发育和胁迫应答过程有关。
- 康桂娟黎瑜曾日中
- 关键词：巴西橡胶树NAC转录因子基因克隆转录激活活性
- 一种NAC转录因子HbNAM及其编码基因
- 本发明提供了一种NAC转录因子HbNAM及其编码基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明还提供了一种NAC转录因子，由SEQ ID NO：1所示核苷酸序列编码而成。本发明从巴西橡胶树中分离得到一个新的NAC...
- 康桂娟代龙军曾日中黎瑜聂智毅
- 文献传递
