宋清源
- 作品数：6 被引量：16H指数：2
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- 子宫内膜异位症患者血清与腹腔液中骨桥蛋白的表达及意义被引量：3
- 2011年
- 目的探讨骨桥蛋白（OPN）在子宫内膜异位症患者血清与腹腔液中的表达及意义。方法用酶联免疫吸附方法检测40例子宫内膜异位症患者术前血清与腹腔液中骨桥蛋白的表达情况。结果 （1）子宫内膜异位症患者术前血清OPN平均水平为（46.68±16.38）ng/ml（16.69-101.85ng/ml）,明显高于对照组患者水平（P〈0.05）;内异症组患者的腹腔液OPN平均水平为（47.47±15.90）ng/ml（20.35-97.56ng/ml）,也高于对照组患者的表达水平（P〈0.05）。（2）Ⅲ-Ⅳ期内异症患者的血清与腹腔液中OPN的表达水平均高于I-Ⅱ期患者,差异具有显著性（P〈0.05）。（3）内异症患者的血清与腹腔液的OPN表达呈正相关关系（r=0.669,P〈0.05）;对照组血清与腹腔液的0PN表达亦呈正相关关系（r=0.538,P〈0.05）。结论 OPN在子宫内膜异位症患者血清与腹腔液中高表达,可能促进异位内膜黏附和侵袭,促进血管生成,在子宫内膜异位症发生发展中起重要作用,OPN在内异症的早期诊断方面有一定应用价值。
- 娄思园生秀杰周冬梅周映群宋清源
- 关键词：子宫内膜异位症骨桥蛋白酶联免疫吸附测定
- BRMS1基因对卵巢癌细胞侵袭转移作用及其机制的探讨被引量：7
- 2011年
- 目的:研究BRMS1基因对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞侵袭、转移的作用及可能机制。方法:应用脂质体介导法将BRMS1-siRNA转染人卵巢癌细胞株OVCAR3细胞内(实验组),设转染不干扰任何基因的NC-siRNA的OVCAR3细胞为阴性对照组,未进行任何转染的为空白对照组。BRMS1基因有效沉默后,用Tr-answell侵袭、迁移实验检测OVCAR3细胞侵袭、迁移能力的变化,并采用蛋白质印迹法及免疫细胞化学法检测蛋白NF-κB p65、uPA表达的变化。结果:人卵巢癌细胞OVCAR3中BRMS1基因成功沉默。Tr-answell侵袭实验中,实验组转入底层膜的细胞数〔(190±8.5)个〕明显高于阴性对照组和空白对照组〔分别为(144±7.8)和(146±6.8)个,P<0.05〕。Transwell迁移实验中,实验组转入底层膜的细胞数〔(231±8.9)个〕明显高于阴性对照组和空白对照组〔分别为(177±9.7)和(182±7.9)个,P<0.05〕。在实验组中NF-κBp65、uPA蛋白表达均显著增强。结论:BRMS1基因可抑制卵巢癌细胞的转移,机制可能与NF-κB信号转导通路有关,通过抑制NF-κB的表达,下调uPA的表达,从而实现抑制卵巢癌的远处转移。
- 周冬梅生秀杰娄思园刘启才宋清源周映群
- 关键词：卵巢肿瘤肿瘤转移BRMS1基因
- BRMS1 shRNA表达载体的构建及对卵巢癌细胞转移的影响被引量：2
- 2011年
- 目的探讨乳腺癌转移抑制基因1(BRMS1)表达抑制对人卵巢癌细胞转移能力的影响及机制。方法构建靶向BRMS1基因的短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体pGPU6/GFP/Neo-BRMS1,并转染人卵巢癌OVCAR3细胞,经G418筛选获得稳定转染株。采用实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测BRMS1 mRNA和蛋白的表达,采用黏附实验检测细胞的黏附能力,采用Tr-answell小室法检测细胞的体外侵袭和迁移能力,采用实时荧光定量PCR法检测基因沉默后miR-146a的表达。结果经酶切和DNA测序证明重组载体构建成功。稳定转染BRMS1 shRNA后,OVCAR3细胞中BRMS1 mRNA和蛋白表达均受到明显抑制。BRMS1表达下调后,细胞的黏附、侵袭和迁移能力较对照组明显增强。干扰组细胞的miR-146a mRNA表达下调了(44.69±4.60)%。结论干扰BRMS1基因的表达可促进卵巢癌细胞的黏附、侵袭和迁移,其机制可能与下调miR-146a的表达有关。
- 周映群生秀杰宋清源刘启才
- 关键词：RNA干扰乳腺癌转移抑制基因1MIR-146A
- RNA干扰沉默基质金属蛋白酶2基因对卵巢癌OVCAR-3细胞诱导体外血管形成能力的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨沉默基质金属蛋白酶2（MMP-2）基因对卵巢癌OVCAR．3细胞血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响，以及对细胞诱导的体外血管形成能力的影响。方法合成特异性靶向基因的小干扰RNA（siRNA）并转染卵巢癌OVCAR-3细胞（MMP-2沉默组），以非特异性序列转染细胞作为阴性对照组，以培养液代替转染siRNA的试剂作为空白对照组；采用实时荧光定量PCR和Westernblot法分别检测转染后48hMMP-2及VEGF的mRNA和蛋白表达水平，通过体外血管形成实验检测卵巢癌OVCAR-3细胞诱导的体外血管形成能力。结果与阴性对照组相比，MMP-2沉默组转染48h，OVCAR-3细胞MMP．2和VEGFmRNA表达量分别下降了78．8％和75．5％（P〈0．05），蛋白表达量分别下降了81．2％和783％（P〈0．05）；体外血管形成实验显示，沉默MMP-2基因后卵巢癌OVCAR-3细胞诱导的体外血管形成能力明显降低（P〈0．05）。结论沉默MMP-2基因可抑制卵巢癌细胞VEGF表达，并能够抑制卵巢癌细胞诱导的体外血管形成能力，抑制MMP-2基因有助于抗血管形成，可能成为卵巢癌基因治疗的新靶点。
- 宋清源生秀杰周冬梅周映群
- 关键词：RNA干扰基质金属蛋白酶2新生血管化
- 乳腺癌转移抑制基因1对卵巢癌细胞血管生成的影响及其机制探讨
- 2012年
- 目的探讨乳腺癌转移抑制基因1(breast cancer metastasis suppressor 1,BRMS1)对人卵巢癌细胞OVCAR3诱导血管内皮细胞形成管腔能力的影响及可能的机制。方法应用脂质体介导的方法将BRMS1shRNA重组质粒转染人卵巢癌细胞OVCAR3,经G418筛选获得稳定转染株。荧光定量PCR和Western blot法检测BRMS1mRNA和蛋白的表达水平;体外血管形成实验检测OVCAR3诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的血管形成能力;Western blot法检测生长抑制因子4(ING4)和白细胞介素-6(IL-6)的蛋白表达情况。结果稳定转染BRMS1shRNA后,OVCAR3细胞BRMS1的表达在mRNA和蛋白水平均受到明显抑制。体外血管形成实验提示,BRMS1表达下调后能显著促进卵巢癌细胞诱导的HUVECs形成管腔样结构的能力;Western blot法显示干扰组中ING4蛋白表达量较对照组下降30%,而IL-6蛋白表达上调,是空白对照组的1.5倍,差异有统计学意义(P<0.05)。结论干扰BRMS1基因的表达可促进卵巢癌细胞诱导血管形成能力,其机制可能与调节下游基因ING4和IL-6的表达有关。
- 周映群生秀杰周冬梅宋清源刘启才
- 关键词：卵巢肿瘤RNA干扰血管生成乳腺癌转移抑制基因1
- 小干扰RNA沉默基质金属蛋白酶-2基因对卵巢癌细胞恶性行为的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨靶向基质全属蛋白酶．2（MMP-2）基因的RNA干扰（RNAi）技术对卵巢癌OVCAR．3细胞MMP-2的沉默作用，以及沉默MMP-2基因对OVCAR-3细胞生长、黏附、侵袭和迁移能力的影响。方法合成特异性靶向MMP-2基因的小干扰RNA（siRNA）并转染卵巢癌OVCAR-3细胞，以非特异性序列转染细胞作为阴性对照组，以培养液代替siRNA转染细胞作为空白对照组，采用实时荧光定量PCR和Westernblot分别检测转染后24、48和72hMMP．2mRNA和蛋白的表达水平，通过四甲基偶氮唑蓝（M1Tr）法绘制细胞生长曲线，利用Transwell、划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力。结果与阴性对照组相比，OVCAR-3细胞在转染siRNA．MMP．2后24、48和72hMMP-2mRNA表达量分别下降了73．8％、78．8％和78．4％（均P〈0．05），蛋白表达量分别下降了72．6％、81．2％和76．4％（均P〈0．05），以48h作用最强；细胞生长曲线显示细胞生长无明显变化（P〉0．05）；60min和90min时的黏附抑制率分别为55．0％和44．8％（均P〈0．05）；细胞的侵袭和迁移能力分别下降29．7％和35．8％（均P〈0．05）。结论siRNA介导的MMP-2基因沉默能明显抑制OVCAR．3细胞的黏附、侵袭和迁移能力，而对其生长无明显影响，MMP-2基因有可能成为卵巢癌基因治疗的重要靶点。
- 宋清源生秀杰周映群李祯孙曼汪志辉
- 关键词：基质金属蛋白酶2
