宋涛
- 作品数:6 被引量:10H指数:2
- 供职机构:南京军区福州总医院更多>>
- 发文基金:福建省农科院青年科技人才创新基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 人自身抗原SSA52的酵母重组分泌表达及其斑点免疫金渗滤法的建立
- 人自身抗原SSA52通常采用组织提取法或原核表达获得,存在诸多问题。本研究通过基因克隆技术,在毕赤酵母中表达人自身抗原SSA52,并建立斑点免疫金渗滤法。采用RT-PCR扩增SSA52基因,与酵母表达载体pPIC9k重组...
- 杨湘越宋涛兰小鹏
- 甲胎蛋白异质体在诊断肝细胞癌中的价值分析被引量:5
- 2011年
- 目的:评价甲胎蛋白异质体(AFP-L3)在肝细胞癌(HCC)中的诊断价值。方法:收集福州总医院2009年1月至2010年6月住院及门诊患者血清,其中HCC患者114例,Cirrhosis患者53例,Hepatitis患者40例。AFP-L3采用AFP-L3亲和吸附离心管分离,血清AFP和AFP-L3水平采用化学发光法检测,计算AFP-L3的百分含量。结果:HCC、Cirrhosis和Hepatitis3组AFP阳性率分别为62.3%、13.2%、10%,AFP-L3阳性率分别为81.6%、3.8%、7.5%。结论:对于诊断HCC,AFP-L3灵敏度和特异度优于AFP,结合约登指数,显示了AFP-L3在诊断HCC方面能力优于AFP。
- 宋涛王开宇兰小鹏
- 关键词:肝细胞甲胎蛋白甲胎蛋白异质体ROC曲线特异性
- 人自身抗原SSA52的酵母重组分泌表达及其斑点免疫金渗滤法的建立被引量:1
- 2012年
- 人自身抗原SSA52通常采用组织提取法或原核表达获得,存在诸多问题。通过基因克隆技术,在毕赤酵母中表达人自身抗原SSA52,并建立斑点免疫金渗滤法。采用RT-PCR扩增SSA52基因,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-SSA52。用电穿孔法转化酵母菌SMD1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上清液用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western blot)鉴定,并建立斑点免疫金渗滤法(dot immuogold filtration assay,DIGFA),进行初步临床应用对比研究。结果显示,RT-PCR产物约为1 400 bp,与预期1 428 bp接近,pPIC9k-SSA52重组阳性克隆测序结果与基因库核酸数据库报道完全一致,双酶切鉴定正确,表达产物SSA52的相对分子质量约52 kD。Western blot法证实表达产物具有天然SSA52分子的免疫原性,阴性对照菌未见目的表达条带。DIGFA与欧蒙酶免疫斑点法的阳性符合率为95.2%(120/126),阴性符合率为94.0%(47/50),总符合率为94.9%(167/176);两种方法检测结果无统计学显著差异(P>0.05)。说明SSA52在毕赤酵母中分泌表达成功,建立的DIGFA简便、快速、准确。
- 杨湘越宋涛兰小鹏
- 关键词:自身抗原克隆巴斯德毕赤酵母斑点免疫金渗滤法
- Ro52蛋白的分子生物学研究进展被引量:4
- 2010年
- Ro52蛋白作为靶抗原,存在于多种自身免疫性疾病,如干燥综合征、系统性红斑狼疮、皮肌炎等患者的血清中。Ro52蛋白是TRIM蛋白家族成员(TRIM21),其分子内含有RING-finger、B-box、卷曲螺旋结构域,分别具有不同的生物学功能。Ro52蛋白在免疫防御中的作用日渐为研究者所关注,如Ro52与IgG分子的作用、Ro52作为一种E3泛素连接酶与其他信号分子的作用等。其自身泛素化和广泛的泛素化作用已经在Ro52与干扰素的作用中得到了体现。迄今,Ro52在自身免疫性疾病中的具体致病机制还不清楚。我们尝试通过介绍Ro52的分子生物学特点及其与相关活性分子的相互作用的最新研究进展,初步探索其可能的致病机制。
- 宋涛兰小鹏
- 关键词:泛素化分子生物学
- 人自身抗原SSA52的酵母重组分泌表达及其斑点免疫金渗滤法的建立
- 人自身抗原SSA52通常采用组织提取法或原核表达获得,存在诸多问题。本研究通过基因克隆技术,在毕赤酵母中表达人自身抗原SSA52,并建立斑点免疫金渗滤法。采用RT-PCR扩增SSA52基因,与酵母表达载体pPIC9k重组...
- 杨湘越宋涛兰小鹏
- 文献传递
- 分析AFP-L3在诊断HCC中的价值
- 目的评价AFP-L3在肝细胞癌(HCC)中的诊断价值。方法收集福州总医院2009年1月到2010年6月住院及门诊患者血清,其中HCC患者114例,Cirrhosis患者53例,Hepatitis患者40例。AFP-L3采...
- 宋涛兰小鹏
- 文献传递