孟艳
- 作品数：23 被引量：19H指数：3
- 供职机构：安徽农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目安徽省农业科学院院长青年创新基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学化学工程医药卫生更多>>
- 家蚕β-呋喃果糖苷酶基因BmSuc1的CRISPR敲除载体的构建与导入被引量：2
- 2018年
- 【目的】CRISPR/Cas9是近些年报道较多的基因编辑新工具,具有简便高效、特异性强等优势。BmSuc1是从鳞翅目经济昆虫家蚕Bombyx mori体内发现的编码β-呋喃果糖苷酶(β-fructofuranosidase,β-FFase)的基因,也是首个被克隆和鉴定的动物型β-FFase编码基因。β-FFase是作用于果糖基的蔗糖水解酶,BmSUC1可能与家蚕防御桑叶生物碱的生理过程有关,但目前其发挥作用的分子机制尚不清晰。为了解析BmSuc1在蚕体的作用途径及其生理功能,本研究基于CRISPR/Cas9基因编辑系统构建表达双元sgRNA的CRISPR载体,用于敲除家蚕基因组中的BmSuc1基因。【方法】根据目的基因BmSuc1的ORF序列设计2条sgRNA,通过同源重组的方法分别插入CRISPR载体的Sal I和Nhe I酶切位点。进而利用转基因显微注射技术将该编辑载体注入G_0代蚕卵,经催青孵化饲养家蚕并自交制备G_1代蚕种。【结果】PCR验证及测序结果均表明CRISPR编辑载体构建成功。根据Ds Red2红色蛋白的荧光标记,从G_1代家蚕幼虫中成功筛选出阳性转基因个体。【结论】本文详细介绍了表达双元sgRNA的CRISPR载体的构建方法,所获得的阳性转基因家蚕对于下一步探讨BmSuc1在家蚕糖类营养的吸收与利用途径中的作用奠定了重要的实验基础,有助于阐明蚕-桑相互选择和适应的分子机制。
- 朱文恺甘泉贺伟张新伟周跃吴梦雪孙同同江松孟艳
- 关键词：家蚕Β-呋喃果糖苷酶
- 氮离子束注入家蚕卵对血液SOD活性的影响被引量：1
- 2000年
- 孟艳徐厚镕赵正龙姚建铭
- 关键词：家蚕
- N^+注入家蚕卵的当代生理生化效应
- 2001年
- 家蚕卵期N+ 注入后 ,当代蛹期进行血液酯酶同工酶电泳 ,发现A区酶带数和活性比对照增强 ,经N+ 注入后的孵化率随剂量增加而下降 ,孵化出的蚁蚕疏毛率比对照略有提高 ,个体间发育开差增大 ,茧质并未下降 ,出现个别环节畸变蚕.
- 徐厚镕孟艳
- 关键词：家蚕酯酶同工酶茧质
- 一种拟南芥Mo敏感变异株筛选培养基及筛选方法
- 一种拟南芥Mo敏感变异株的筛选方法以及筛选所用的培养基和培养方法。此方法筛选出拟南芥Mo敏感的突变体。筛选所用的培养基包括不含钼(-Mo)和含170nM钼(+Mo)的固体培养基。培养方法是：拟南芥M2种子先用75％的酒精...
- 高俊山巫飞飞沈知临孟艳蔡永萍林毅
- 文献传递
- 家蚕墨蝶呤还原酶基因的体外表达及酶活性研究被引量：1
- 2014年
- 家蚕(Bombyx mori)黄体色突变体(lem)的幼虫体壁富含墨蝶呤(SP),SP经墨蝶呤还原酶(SPR)的催化作用合成四氢生物蝶呤(BH4)。作为芳香族氨基酸羟化酶的重要辅酶,BH4的缺乏会导致多种神经性代谢综合症。前期研究已克隆获得家蚕SPR基因(BmSpr),确定了BmSpr为lem突变体的遗传本质。本实验将重组质粒pET-24b-BmSpr转化至E.coli不同菌株的感受态细胞,对BmSpr的体外表达条件进行了优化。SDSPAGE和Western Blot的检测结果表明BmSPR融合蛋白能够在原核表达系统中得到稳定表达,酶活性分析结果显示体外表达的重组BmSPR对其底物SP有较好的催化活性。本研究为进一步以从家蚕lem突变体资源大量提纯的SP为底物,利用原核表达BmSPR,开展体外合成BH4的应用基础研究奠定了实验基础。
- 李闻天龚美霞戴伟宏张蕾王文静刘朝良孟艳
- 关键词：四氢生物蝶呤酶活性
- 一种从蚕体中提取纯化高纯度墨蝶呤的方法
- 本发明涉及一种高纯度墨蝶呤的提取纯化方法，该方法为将黄体色家蚕体壁用50%的乙醇按料液比1:20制成匀浆，煮沸10min，15000rpm，4℃离心30min，取上清液，过滤，滤液浓缩至一定体积后经ECTEOLA纤维素柱...
- 孟艳王敬高俊山王文静刘朝良
- 重叠延伸PCR法克隆蓖麻蚕β-FFase同源基因被引量：1
- 2014年
- 本研究利用重叠延伸PCR的方法成功获得蓖麻蚕两个β-FFase基因ScSuc1和ScSuc2全长ORF,为今后研究ScSuc1和ScSuc2的体外表达以及分析酶活特征奠定了必要的实验基础。
- 张蕾李静戴伟宏孟艳
- 关键词：蓖麻蚕家蚕Β-呋喃果糖苷酶重叠延伸PCR
- 桑蟥的生物学特性及室内饲养技术被引量：1
- 2014年
- 桑蟥是一种与家蚕近缘的鳞翅目蚕蛾科昆虫,在长期的自然选择中形成了自身特有的生物学特性。探讨了桑蟥的生物学特性及室内饲养技术环节。
- 戴伟宏张蕾李静孟艳
- 关键词：桑蟥生物学特性室内饲养
- BmSUC1, an essential β-fructofuranosidase for glycometabolism modulation in the silkworm, Bombyx mori
- Sucrose is the most commonly transported sugar in plants and is easily assimilated by insects to fulfill the r...
- 孟艳Quan GanXinwei ZhangLiangli YangYue ZhaoTongtong SunDandan Xia
- 文献传递
- 一种快速鉴定烟草抗性基因的有效方法
- 本发明公开了一种快速鉴定烟草抗性基因的有效方法，本发明所用的农杆菌株系为GV3101(pMP90),属根癌农杆菌，在烟草的遗传转化中效果比较好。采用的转化方法是电击转化法，而不是常用的冻融法或热激法，使用伯乐公司的电转化...
- 高俊山谢鹏胡丽孟艳蔡永萍林毅
- 文献传递
