孙飞
- 作品数:9 被引量:23H指数:3
- 供职机构:南华大学基础医学院药物药理研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- RAMP1促进CRLR膜分布并增强CGRP抑制VSMCs增殖作用被引量:1
- 2010年
- 孙飞许俊周孝钱唐江琼秦旭平
- 关键词:CGRP增殖作用受体活性免疫荧光法稳定转染
- RAMP1真核载体构建及其对血管平滑肌细胞CRLR分布和表达的影响
- <正>前言CGRP(calcitonin gene-related peptide,CGRP)在调节心血管系统发挥重要作用,且其作用存在多样性。CGRP受体是由降钙素受体样受体(calcitoninreceptor-li...
- 孙飞谌赟秦又发许俊周孝钱陈临溪廖端芳秦旭平
- 文献传递
- 受体活性修饰蛋白1基因载体构建及其对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响被引量:6
- 2010年
- 目的探讨受体活性修饰蛋白1(RAMP1)表达载体的构建及其高表达RAMP1对血管平滑肌细胞增殖的影响。方法通过构建RAMP1大鼠基因开放阅读框的真核表达载体,利用脂质体将其转入原代培养的大鼠主动脉平滑肌细胞,G418筛选稳定表达细胞集落。逆转录-聚合酶链反应和蛋白印迹法检测RAMP1的表达量;MTT法测定细胞的增殖或生存率,并计算细胞倍增时间。结果成功构建RAMP1基因真核表达载体,脂质体能将RAMP1表达载体稳定转入血管平滑肌细胞,RAMP1高表达能明显增强降钙素基因相关肽抑制血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞生存率及明显延长其倍增时间。结论RAMP1高表达能增强CGRP抑制血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖。
- 郑元斌秦旭平孙飞唐江琼廖端芳
- 关键词:降钙素基因相关肽血管平滑肌细胞增殖
- RAMP1促进CRLR膜分布对CGRP抑制VSMCs增殖的研究
- 目的:观察过表达RAMP1对CGRP抑制AngII诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响;探讨过表达RAMP1对细胞中CRLR表达和分布的关系。 方法:1、pCDNA3.1(+)-RAMP1真核表达载体的构建:从A10细胞中提取...
- 孙飞
- 关键词:过表达增殖
- 文献传递
- 氯沙坦对两肾一夹高血压大鼠肾脏的保护作用及PRCP-激肽释放酶调节轴的影响被引量:4
- 2013年
- 本研究观察氯沙坦对两肾一夹(2K1C)高血压大鼠体内脯氨酰羧基肽酶(PRCP)-激肽释放酶调节轴的影响,揭示氯沙坦保护肾脏作用的新机制。采用SD大鼠,建立2K1C高血压大鼠模型,分别给予哌唑嗪(5 mg.kg 1.d 1)或氯沙坦(5、15及45 mg.kg 1.d 1)连续干预4周,观察血压变化。实验结束后,通过计算大鼠右侧肾脏体重比,石蜡切片HE染色观察肾小球纤维化的程度以及自动生化分析仪检测血清中Na+、K+、肌酐以及尿素氮的含量来评估大鼠肾脏功能;RT-PCR分析右侧肾脏中PRCP mRNA的表达;Western blotting分析肾脏中PRCP、组织激肽释放酶、血浆激肽释放酶和TGF-β1以及血浆中血浆激肽释放酶蛋白的表达水平。结果显示,氯沙坦能显著减轻由高血压大鼠肾脏体重比、肾小球的融合及纤维化和血清生化指标的改变;并能同时升高其同侧肾脏组织中PRCP、血浆激肽释放酶和组织激肽释放酶的蛋白表达,降低TGF-β1蛋白的表达。氯沙坦对2K1C高血压大鼠肾脏功能的保护作用可能与其增强大鼠体内PRCP-血浆激肽释放酶和组织激肽释放酶调节轴功能、降低TGF-β1蛋白的表达有关。
- 秦又发田海红孙飞秦旭平
- 关键词:氯沙坦组织激肽释放酶
- 氯沙坦和哌唑嗪调节早期高血压大鼠体内降钙素基因相关肽反应的差异(英文)被引量:2
- 2009年
- 目的:探讨高血压早期大鼠体内降钙素基因相关肽(CGRP)的变化,并观测两类降压药物,氯沙坦或哌唑嗪在降压过程中对CGRP的反应差异。方法:采用经典的两肾一夹型高血压大鼠(Goldblatt,2K1C)为研究模型,夹尾法测定大鼠清醒状态下血压,通过公式计算出平均动脉压;放射免疫法血浆内CGRP和血管紧张素II(Ang II)的含量。反转录聚合连反应(RT-PCR)测定脊髓背根神经节中CGRP mRNA的表达。结果:收缩压、平均动脉压在结扎肾动脉10 d后较对照组快速升高(P<0.01),给予氯沙坦或哌唑嗪治疗5 d后,血压明显降低(P<0.01);实验末,高血压未治疗组血浆中Ang II、CGRP浓度(P<0.01,P<0.01)和脊髓背根神经节中的CGRP mRNA的表达明显升高(P<0.05),高血压氯沙坦治疗组可进一步升高大鼠血浆中Ang II、CGRP浓度(P<0.01,P<0.01)和脊髓背根神经节中的CGRP mRNA的表达(P<0.05);但在高血压哌唑嗪治疗组大鼠血浆中Ang II变化不显著(P>0.05),但CGRP浓度和脊髓背根神经节中的CGRP mRNA的表达与未治疗组相比显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:在肾血管性高血压早期含CGRP感觉神经功能存在代偿性增高,氯沙坦或哌唑嗪的不同降压机制也可能与其影响体内CGRP合成和释放差异有关。
- 秦旭平谌赟秦又发田海宏孙飞
- 关键词:降钙素基因相关肽氯沙坦哌唑嗪高血压
- 高表达受体活性修饰蛋白1对血管紧张素Ⅱ和降钙素基因相关肽诱导的A10细胞降钙素受体样受体膜分布的影响被引量:2
- 2013年
- 目的探索受体活性修饰蛋白1(RAMP1)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和(或)降钙素基因相关肽(CGRP)诱导的降钙素受体样受体(CRLR)在血管平滑肌细胞(VSMC)的表达和分布的影响,进一步揭示CGRP抑制VSMC增殖的机制。方法 通过酶切、连接、转化等方法构建pCDNA3.1(+)-RAMP1真核表达载体并稳定转染至鼠源性血管平滑肌细胞株A10中,获得稳定高表达RAMP1的细胞系。无转染细胞、转染空载体〔pCDNA3.1(+)〕细胞和RAMP1高表达组细胞〔pCDNA3.1(+)-RAMP1〕分别用AngⅡ100 nmo.l L-1、CGRP 100 nmo.l L-1和CGRP+AngⅡ处理24 h,用MTT法检测细胞存活;逆转录PCR、Western印迹和免疫荧光法分别检测CRLR mRNA含量、蛋白表达及细胞膜分布。结果 单纯转染空质粒或RAMP1对细胞增殖无明显影响。AngⅡ处理对3种细胞存活的影响无显著差异。pCDNA3.1(+)-RAMP1细胞经CGRP处理24 h后,细胞存活明显高于其他两组细胞(P<0.05);经CGRP+AngⅡ处理,细胞存活明显低于其他两组(P<0.05)。AngⅡ,CGRP和CGRP+AngⅡ处理对3种细胞CRLR mRNA表达无明显影响,但CGRP处理使pCDNA3.1(+)-RAMP1细胞中CRLR蛋白明显高于其他两种细胞(P<0.05),而CGRP+AngⅡ处理使pCDNA3.1(+)-RAMP1细胞中CRLR蛋白明显低于其他两种细胞(P<0.05)。免疫荧光结果显示,经无血清或CGRP处理后,无转染细胞和pCDNA3.1(+)细胞中的RAMP1和CRLR主要分布在胞浆区域;经AngⅡ或CGPR+AngⅡ处理后,pCDNA3.1(+)-RAMP1细胞中RAMP1和CRLR在细胞膜上的分布多于无转染细胞和pCDNA3.1(+)细胞。结论 高表达RAMP1能增强CGRP抑制AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞增殖,其机制可能是通过RAMP1增加CRLR的膜分布,从而增强CGRP受体对CGRP的敏感性有关。
- 孙飞唐江琼郑元斌秦又发陈临溪秦旭平
- 关键词:降钙素基因相关肽
- RAMP1促进CRLR膜分布并增强CGRP抑制VSMCs增殖作用
- <正>目的:探索过表达受体活性修饰蛋白1(RAMP1)对血管平滑肌细胞(VSMCs)降钙素受体样受体(CRLR)表达和分布的影响,观察RAMP1过表达对降钙素基因相关肽(CGRP)抑制血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导VSMC...
- 孙飞许俊周孝钱唐江琼秦旭平
- 文献传递
- 降钙素基因相关肽(CGRP)受体被引量:10
- 2009年
- 降钙素基因相关肽(CGRP)是一个含37个氨基酸残基的神经肽,对心血管、神经和消化等系统的功能有重要的调节作用。CGRP功能主要由其受体介导。研究发现,CGRP受体由降钙素受体样受体(CRLR)、受体活性修饰蛋白-1(RAMP1)和受体组分蛋白(RCP)组成,不同受体组分在受体的跨膜信号转导中所起的作用存在差异。
- 孙飞秦旭平
- 关键词:降钙素基因相关肽