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慢性乙型肝炎患者和HBV携带者外周血单个核细胞差异表达基因的筛选与验证: 第一部分慢性乙型肝炎患者与HBV携带者外周血单个核细胞消减文库的构建和筛选乙型肝炎病毒(HBV)感染呈世界性流行，我国属HBV感染高流行区，一般人群的HBsAg阳性率为9.09％。慢性HBV感染形成HBV携带、慢性乙型肝...; 唐翠兰; 关键词：核细胞抑制消减杂交技术表达基因

抑制消减杂交技术在筛选人慢性肝脏病相关基因中的应用: 2005年; 抑制消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH)是一种分析差异表达基因的方法,广泛应用于寻找疾病、生长发育不同阶段的相关基因,本文就SSH的原理及与相关技术的比较、在慢性肝脏疾病中的应用等方面进行综述。; 唐翠兰陈智; 关键词：肝疾病抑制消减杂交技术基因

慢性乙型肝炎和乙型肝炎病毒携带儿童差异表达基因分析: 2006年; 目的探讨儿童慢性乙型肝炎(CHB)和儿童乙型肝炎病毒(HBV)携带者(ASCs)的致病机制。方法采用抑制消减杂交(SSH)技术构建两者外周血单个核细胞差异表达基因cDNA文库,得到差异表达基因β2微球蛋白(β2-MG)。采集34例CHB和41例ASCs儿童外周血血浆,用酶联免疫试验检测β2-MG水平。结果成功构建了儿童CHB和ASCs的差异表达文库,发现在CHB儿童中β2-MG和铁转运蛋白等炎症相关基因表达增高。证实了β2-MG在蛋白水平也存在相应的差异表达。结论β2-MG在CHB患儿中的高表达参与儿童CHB的发病。; 唐翠兰周舟陈智路成吉; 关键词：乙型肝炎病毒携带者 Β2微球蛋白抑制消减杂交

定量RT-PCR分析穿孔素基因在无症状乙型肝炎病毒携带者中的表达及意义被引量：1: 2006年; 目的:验证无症状乙型肝炎病毒携带者(A SC s)与正常对照组消减文库中的差异基因穿孔素(perforin)在相应人群中的差异表达。方法:采集43例A SC s和41例正常对照者的外周静脉血,分离外周血单个核细胞(PBM C)并提取RNA,做定量RT-PCR(R ea l-tim e RT-PCR)。结果:穿孔素在HBV携带者中表达水平是正常对照的3.58倍。结论:通过定量RT-PCR首次证实了穿孔素基因在A SC s较正常对照表达增高,因穿孔素与免疫抑制有关,该基因在A SC s的高表达对于阐明A SC s的发病机制有重要意义。; 唐翠兰周舟陈智; 关键词：肝炎病毒乙型带病原状态逆转录聚合酶链反应

慢性乙型肝炎病毒携带儿童血清及外周血单个核细胞培养上清干扰素γ和白细胞介素-10的水平及其意义被引量：1: 2006年; 目的探讨慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带儿童血清及外周血单个核细胞(PBMC)经乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)刺激后培养上清干扰素γ(IFN-γ)和IL-10水平及临床意义。方法HBeAg阳性慢性HBV携带儿童21例(A组)、抗-HBe阳性慢性HBV携带儿童20例(B组)及正常儿童19例(C组),每例采集外周静脉血5 mL,分离血清及PBMC,PBMC体外单独培养或与HBcAg共培养72 h后,检测血清及培养上清IFN-γ和IL-10水平。结果血清IFN-γ在各组间无明显差异,A和B组血清IL-10较C组显著增高。经HBcAg处理后PBMC培养上清中,IFN-γ水平在B和C组较A组显著增高。同时,经HBcAg处理后A和B组PBMC培养上清中IL-10水平均较C组显著增高,尤以A组明显。结论IL-10水平及PBMC对HBcAg应答低下在儿童HBV携带者发病机制中起一定作用。; 唐翠兰周舟; 关键词：外周血单个核细胞乙型肝炎病毒核心抗原干扰素Γ 白细胞介素-10

无症状乙型肝炎病毒携带者外周血单个核细胞穿孔素基因表达: 2006年; 目的:检测无症状乙型肝炎病毒携带者(ASCs)与正常对照组消减文库中的差异基因穿孔素(perforin)在相应人群中的表达。方法:分离43例ASCs和41例正常对照者的外周静脉血单个核细胞(PBMC)并提取RNA,做定量RT-PCR检测。结果:穿孔素在HBV携带者中表达水平是正常对照的3.58倍。结论:穿孔素基因在ASCs高表达,对于阐明ASCs的发病机制有重要意义。; 唐翠兰周舟陈智; 关键词：无症状乙型肝炎病毒携带者抑制消减杂交定量RT-PCR

抑制消减杂交法筛选无症状乙型肝炎病毒携带者差异表达基因被引量：2: 2006年; 乙型肝炎病毒（HBV）携带者中,大多数是婴幼儿期感染,往往终生携带HBV,但正常成人初次感染后大多能清除病毒.除病毒因素外,主要是机体的免疫因素决定感染结局[1].机体对HBV的免疫应答受许多基因的调节,我们推测正是由于在正常人和HBV携带者之间存在的免疫相关基因表达的差异才导致了不同的感染结局.本研究旨在探讨HBV携带者与正常人外周血单个核细胞（PBMC）差异表达的基因,有助于阐明HBV携带发生发展机制及设计新的治疗靶标.; 唐翠兰陈智羊正纲周林福陈峰彭国平; 关键词：基因

慢性乙型肝炎患者炎症相关差异表达基因cDNA文库的构建和筛选被引量：4: 2006年; 目的筛选慢性乙型肝炎(chron ic hepatitis B,CHB)患者与无症状乙型肝炎病毒携带者(asymptom atic HBVcarriers,ASCs)表达差异的基因。方法分离CHB及ASCs的外周血单个核细胞(peripheral b lood mononuc lear cells,PBMC)并提取RNA,SMART技术合成cDNA,采用抑制消减杂交(suppression subtractive hybrid ization,SSH)技术构建差异表达基因cDNA文库,进一步采用dot b lot筛选,得到差异表达的基因。结果经过筛选共获得了22个阳性克隆,通过序列分析,发现它们代表22个基因,在CHB表达增高的基因多是和炎症相关,在ASCs表达增高的基因中,多为新基因。结论成功构建了CHB与ASCs的消减文库并初步分析这些差异表达基因的意义,对于阐明CHB的发病机制及其治疗都有重要意义。; 唐翠兰彭国平陈智朱海红郑敏; 关键词：慢性乙型肝炎无症状乙型肝炎病毒携带者抑制消减杂交

α防御素在慢性乙型肝炎患者和HBV携带者之间的差异表达被引量：1: 2009年; 目的测定慢性乙型肝炎（CHB）患者和HBV携带者体内差异表达的基因，以揭示二者不同的发病机制。方法采用抑制消减杂交（SSH）技术构建差异表达基因cDNA文库并筛选出差异表达基因α防御素。采集46例CHB和11例HBV携带者外周肝素抗凝血，用实时定量RT—PCR和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测α防御素在2组患者中mRNA和蛋白水平的差异表达。结果实时定量RT—PCR显示，α防御素在CHB患者中的表达是在HBV携带者中的1．4倍。ELISA结果显示，血浆α防御素在CHB患者中表达的水平为（216．40±81．25）μg/L，HBV携带者为（156．00±57．26）μg/L，二者比较差异有统计学意义（t=2．23，P〈0．05）。结论α防御素在CHB患者中的表达较HBV携带者高，提示其可能参与了CHB的发病机制。; 唐翠兰陈智; 关键词：肝炎病毒乙型肝炎乙型慢性无症状HBV携带者

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唐翠兰