吴晓松
- 作品数：8 被引量：10H指数：2
- 供职机构：同济大学附属第十人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市浦江人才计划项目上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- G30.丙戊酸钠通过细胞外信号调节激酶上调骨髓瘤细胞表面NKG2D配体并增强NK细胞对其杀伤作用
- 施菊妹陶怡侯军吴晓松
- 文献传递
- 多发性骨髓瘤患者自然杀伤细胞体外扩增及其抗自体骨髓瘤作用被引量：3
- 2012年
- 目的探讨体外高效扩增多发性骨髓瘤(MM)患者自身自然杀伤细胞(NK细胞)的方法,研究扩增前和扩增后NK细胞对骨髓瘤细胞株U266和自体骨髓瘤细胞的杀伤作用。方法 10例MM患者的外周血单个核细胞与K562转基因细胞株在含不同浓度白细胞介素(IL)-2的培养液中共育14d,应用流式细胞仪,采用氚标记的胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法和铬51释放法等方法,研究NK细胞的扩增情况、增殖能力、免疫表型和抗骨髓瘤作用。结果 300U/mLIL-2共培养体系扩增NK细胞的扩增倍数为196.4±12.8,扩增后NK细胞存活率>95%,IL-2能增强共培养体系中NK细胞的增殖能力。在效靶比为10∶1时,扩增后NK细胞对自体骨髓瘤细胞的平均杀伤率为(38.1±6.2)%,显著高于扩增前的(3.9±1.7)%(P<0.01)。结论 K562转基因细胞株能特异性刺激骨髓瘤患者NK细胞扩增,扩增后NK细胞抗自体骨髓瘤的作用显著增强,扩增并活化的NK细胞将有望作为临床治疗MM的免疫治疗方法。
- 施菊妹邵阳吴晓松陶怡艾工文胡晓静侯军孟秀琴郑军华
- 关键词：自体自然杀伤细胞多发性骨髓瘤
- 体外扩增人NK细胞及其对白血病细胞杀伤作用的研究
- 2013年
- 目的通过体外扩增人NK细胞的方法,探讨扩增后NK细胞对K562和HL60白血病细胞株的体外杀伤作用及机制。方法抽取5例健康志愿者外周血,分离单个核细胞(PBMC),与基因修饰K562细胞共同培养,采用流式细胞仪检测NK细胞的表型,铬51释放法测定NK细胞对白血病细胞的杀伤率。结果基因修饰K562细胞在体外刺激NK细胞扩增202倍;扩增后NK细胞对白血病细胞K562、HL60的杀伤率分别为77.1%、61.2%(效/靶比为8:1),扩增前NK细胞对K562、HL60杀伤率分别为39.0%、35.4%;扩增后NK细胞表面活化受体NKG2D、NKp30和NKp44表达增强;这些活化受体特异抗体能部分抑制扩增后NK细胞的抗白血病作用。结论基因修饰K562细胞刺激NK细胞有效扩增,扩增后NK细胞杀伤白血病细胞作用明显增强,扩增后NK细胞表面部分活化受体上调可能为扩增后NK细胞抑制白血病作用增强的分子机制,NK细胞治疗在白血病中有潜在的应用前景。
- 蒋卫韩颖吴晓松吴慧群施菊妹
- 关键词：自然杀伤细胞扩增白血病
- 丙戊酸钠增强骨髓瘤细胞对自然杀伤细胞敏感性及其机制的研究被引量：2
- 2013年
- 目的观察丙戊酸钠（VPA）对人类骨髓瘤细胞表面自然杀伤（NK）细胞活化性受体凝集素样同型二聚体（NKG2D）配体表达的影响，并研究VPA对NK细胞杀伤骨髓瘤细胞作用的影响及其机制，为骨髓瘤的免疫治疗提供实验依据。方法选用0．5、1、2、5mmol／LVPA处理人类骨髓瘤细胞ARK、OPM2，与无VPA处理的对照组进行比较，观察不同浓度VPA对细胞ARK、OPM2活力的影响。通过实时荧光定量PCR和流式细胞仪分别检测1mmol／LVPA处理的骨髓瘤ARK、OPM2细胞NKG2D配体在mRNA水平和蛋白质水平的变化。应用钙黄绿素释放法（CARE—LASS）检测VPA对NK细胞抗骨髓瘤活性的调节作用及机制。结果5mmol／LVPA处理ARK、OPM2细胞48h后，对骨髓瘤细胞活力有影响（P〈0．05）；与未处理细胞比较，1mmol／LVPA处理的两种骨髓瘤细胞MICA、MICB和ULBP2mRNA水平及蛋白质表达水平均增高（P〈0．05）。NK细胞对骨髓瘤细胞杀伤率增高，效靶比8：1时，VPA处理后ARK细胞杀伤率为60．2％，对照组为31．4％（P=0．018），VPA处理后OPM2细胞杀伤率为56．8％，对照组为22-3％（P=0．040）；且增强的杀伤率可以被NKG2D抗体特异性拮抗。NK细胞通过穿孔素和颗粒酶杀伤效应裂解肿瘤细胞。结论VPA明显上调骨髓瘤细胞的MICA／B、ULBP2表达，可增强NK细胞对骨髓瘤细胞的杀伤活性，NK细胞经穿孔素和颗粒酶杀伤途径杀伤骨髓瘤细胞，为骨髓瘤的临床免疫治疗提供了实验依据。
- 沙雪平蒋卫吴晓松高敏杰王宏梅施菊妹
- 关键词：丙戊酸NKG2D配体
- G31.多发性骨髓瘤患者自体NK细胞体外扩增及其抗自体骨髓瘤作用研究
- 陶怡施菊妹邵阳侯军艾工文胡晓静孟秀琴吴晓松
- 文献传递
- 自然杀伤细胞对人乳腺癌细胞株的杀伤作用及其机制被引量：2
- 2013年
- 目的观察体外扩增自然杀伤(NK)细胞的表型,探讨其对不同乳腺癌细胞株的杀伤作用及其机制。方法抽取健康志愿者外周血15mL,分离单个核细胞,与基因修饰的K562细胞共培养,应用流式细胞仪采用Calcein释放法检测NK细胞的表型,计算NK细胞对乳腺癌细胞株MDA-MB231和MCF-7的杀伤率。结果扩增后NK细胞、自然杀伤T细胞(NKT细胞)、T淋巴细胞的平均含量分别为(74.2±12.9)%、(19.1±10.8)%、(4.3±0.8)%,与扩增前的(12.6±6.2)%、(7.7±2.7)%、(55.5±8.8)%比较,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。扩增后NK细胞的杀伤细胞活化受体NKG2D、NKp30、NKp44和DNAX辅助分子1(DNAM-1)的表达阳性率分别为(83.4±4.3)%、(80.6±5.1)%、(20.9±2.7)%和(87.2±3.9)%,均显著高于扩增前的(17.0±2.1)%、(18.0±1.8)%、(1.4±0.4)%和(50.1±4.9)%(P值均<0.05)。扩增后NK细胞对MDA-MB231、MCF-7乳腺癌细胞株的杀伤率分别为(61.7±8.0)%、(66.1±3.5)%,均显著高于扩增前的(28.2±3.2)%、(29.6±2.8)%(P值均<0.05)。扩增后主要活化分子的对照抗体、抗NKG2D抗体、抗NKp30抗体、抗NKp44抗体、抗NKp46抗体、抗DNAM-1抗体和联合全部抗体抑制NK细胞对MCF-7乳腺癌细胞株的杀伤率分别为(69.3±4.2)%、(43.6±3.5)%、(49.3±2.8)%、(47.1±4.9)%、(65.3±5.6)%、(41.1±3.8)%和(19.8±2.1)%。结论扩增后NK细胞表达部分活化分子增强,其对乳腺癌细胞的杀伤作用明显增强,扩增后NK细胞具有增强的抗肿瘤活性可能与这些活化分子高表达有关。
- 祖卫兵高敏杰高路杨洸姜卫星朱峰吴晓松施菊妹
- 关键词：自然杀伤细胞扩增体外乳腺癌
- 华氏巨球蛋白血症的个体化治疗研究进展
- 2018年
- 华氏巨球蛋白血症（WM）是一种少见的淋巴瘤，目前的治疗手段仍不能治愈。MYD88和CXCR4基因突变是该病的特征。对WM患者的临床表现、病理及遗传学特征等方面的研究进展，已经催生了一系列极具前景的WM临床治疗方案。现结合第59届美国血液学会（ASH）年会关于WM的个体化治疗相关研究进展的最新报道，对WM患者应用烷化剂、蛋白酶体抑制剂、单克隆抗体及酪氨酸激酶抑制剂（BTK）等药物的安全性和有效性进行综述，探讨以基因组特征为主的基础治疗与现有治疗方案整合治疗WM的可行性。
- 侯军张轶文吴晓松施菊妹
- 关键词：华氏巨球蛋白血症个体化治疗
- 高效扩增和活化自然杀伤细胞并对多发性骨髓瘤细胞有特异性杀伤作用被引量：3
- 2010年
- 目的探讨辐照后的基因修饰的表达膜结合白细胞介素(IL)-15和4-1BB(CD137)配体的K562细胞株对扩增和活化健康人自然杀伤(NK)细胞的影响。方法 6名健康志愿者的外周血单个核细胞与辐照后的基因修饰的K562细胞株混合培养14d后,采用流式细胞仪分析和51铬释放法研究细胞的扩增情况和NK细胞的功能。结果本混合培养实验体系能有效地特异性扩增NK细胞(176.2±63.1)倍,而没有大量扩增T淋巴细胞[扩增倍数为(2.1±2.3)倍]和其他细胞。在效应细胞与靶细胞的比例为10∶1时,扩增后的NK细胞对U266细胞株的平均杀伤率为(73.6±11.2)%,显著高于扩增前的(30.1±9.7)%(P<0.01)。结论基因修饰的K562细胞株能刺激NK细胞高效扩增,扩增后的NK细胞杀伤U266细胞的作用显著增强,扩增的NK细胞将有可能用于骨髓瘤的免疫治疗。
- 吴晓松施菊妹邵阳陶怡侯军孟秀琴郑军华湛凤凰
- 关键词：自然杀伤细胞扩增多发性骨髓瘤
