吴剑
- 作品数：6 被引量：5H指数：1
- 供职机构：湖南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金湖南省教育厅科研基金湖南省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 噬菌体抗体库淘筛方法的比较研究被引量：1
- 2009年
- 目的:比较噬菌体抗体库的淘筛方法,从而为得到亲和力高、特异性强的抗体克隆打下基础。方法:在包被好抗原的2个细胞培养瓶中加入噬菌体抗体库,一个采用先直接加入宿主菌感染后,再将培养瓶内残留结合物洗脱中和后感染的方法,另一个则采用先洗脱并中和的噬菌体感染宿主菌,与抗原结合的剩余的噬菌体再行直接感染,将2种方法所得到的感染菌和援救所得的噬菌体进行CFU和PFU测定。结果:从实验的数据中可以发现,采用第一种方法所得次级库的容量要大于后一种方法所得的初级库。结论:噬菌体抗体库的淘筛方法必须按照实验的具体情况进行选择,如果要求严谨度适中,则可以采用直接感染的方法淘筛。
- 杜东霞吴剑李小曼朱振久张冉
- 关键词：噬菌体抗体库CFUPFU
- 流感病毒全病毒灭活疫苗及疫苗佐剂在1型糖尿病小鼠中的效力研究
- 本论文由四部分组成：一)流感病毒、流感病毒疫苗、疫苗佐剂以及糖尿病简介；二)1型糖尿病小鼠对H5N1流感病毒易感性研究；三)1型糖尿病小鼠接种H5N1流感病毒全病毒灭活疫苗后的免疫应答及其保护效果研究；四)佐剂对H5N1...
- 吴剑
- 关键词：H5N1流感病毒1型糖尿病佐剂
- 文献传递
- 抗体库构建中影响库容量的因素探讨被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨在噬菌体抗体库的构建过程中,提高转化效率的最优条件。方法:通过改变感受态细菌的浓度、电击时间的长短以及连接产物的纯化方法,从而找出最佳条件。结果:实验证明:在仪器的电压、电阻、电容等条件设定不变的情况下,感受态细菌的OD600在0.4左右,电击时间为2 s,转化效率最高。结论:连接产物进行酚-氯仿抽提后转化效率也会大大提高。
- 杜东霞吴剑李小曼朱振久张冉
- 关键词：电转化
- 流感病毒神经氨酸酶双表达DNA疫苗的构建及在小鼠中的免疫保护研究
- 2008年
- 目的研究对多亚型流感病毒流行提供预防的DNA疫苗。方法以pIRES为双表达载体,在其两个多克隆位点中分别插入H1N1(A/PR/8/34)和H3N2(A/Guizhou/54/89)的NA DNA片段,构建双表达质粒pN1-IRES-N2及pN2-IRES-N1。以BALB/c小鼠为模型,采用电穿孔法进行免疫,并用致死量流感病毒感染以检测双表达载体的保护力。结果实验表明pN1-IRES-N2能完全保护小鼠抵御致死量H1N1同源病毒的攻击,部分保护小鼠抵御致死量H3N2同源病毒攻击;pN2-IRES-N1能完全保护小鼠抵御致死量H3N2同源病毒攻击,对致死量H1N1同源病毒的攻击提供部分保护。结论双表达DNA疫苗可望开发为一种提供广泛保护的新型流感疫苗。
- 周玉朱洪浩刘传楠匡海门刘满清常海艳吴剑方芳周敦金
- 关键词：流感病毒DNA疫苗神经氨酸酶
- 抗病毒噬菌体抗体库研究进展被引量：3
- 2009年
- 噬菌体抗体库技术是基于噬菌体表面展示技术发展起来的一项基因抗体工程新技术。它将含亿万种基因的抗体可变区基因库转化成展示在噬菌体表面的蛋白库，不仅使对于具备所需属性的单克隆抗体筛选能更方便、快速、高效地在体外进行，还开辟了单克隆抗体人源化的新途径，揭开了人类单克隆抗体生产的历史新篇章。本文综述了近年来针对各种病毒的噬菌体抗体库的构建、筛选方法以及其在各种病毒性疾病研究中的最新进展。
- 吴剑张风华张冉
- 关键词：噬菌体抗体库噬菌体表面展示技术病毒病毒性疾病
- 糖尿病小鼠对H5N1病毒的易感性及灭活疫苗诱导的免疫反应
- 2010年
- 糖尿病患者免疫功能低下,是流感病毒感染的高危人群.研制有效的流感病毒疫苗对糖尿病患者尤为重要.以注射STZ的方法建立糖尿病小鼠模型,比较糖尿病小鼠和健康小鼠对H5N1病毒易感性的差异.病毒感染3 d后糖尿病小鼠的肺部病毒滴度比健康小鼠高,显示糖尿病小鼠对H5N1病毒更易感.用一次免疫的方法接种不同剂量的H5N1灭活疫苗(单独免疫或与佐剂共同免疫),比较其在糖尿病小鼠和健康小鼠诱导抗体应答的能力.一次免疫H5N1流感病毒灭活疫苗可诱导糖尿病小鼠产生体液免疫应答,但其抗体量低于健康小鼠,增加疫苗剂量可提高抗体水平.佐剂能增强H5N1全病毒灭活疫苗在糖尿病小鼠体内诱导的抗体反应.
- 王芙艳吴剑张风华方芳常海燕陈则
- 关键词：灭活疫苗糖尿病佐剂
