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CRISPR-Cas9技术在疾病治疗中的应用被引量：5: 2016年; CRISPR-Cas系统广泛存在于细菌中,是一种高效、特异、操作简单易行、可对多种生物的基因组进行遗传改造的工具。与其他功能缺失的筛选技术(如RNAi、TALEN)相比,全基因组CRISPR-Cas9敲除技术显示出更大的优势。这种技术被广泛应用于世界各地的实验室以及各个领域,尤其是在疾病研究中。利用CRISPR-Cas系统,科学家在艾滋病、癌症、亨廷顿氏病研究中取得了重大突破。本文将就CRISPR-Cas系统的最新进展,尤其是在疾病研究中的最新应用成果作一综述,并对此技术在人类战胜病魔的斗争中将起到的关键作用进行探讨。; 颜雯向蓉向华王晓虎; 关键词：疾病

双抗夹心ELISA检测肠出血性大肠杆菌O157方法的建立被引量：10: 2011年; 以前期建立并纯化的肠出血性大肠杆菌O157:H7单克隆抗体3D6,建立一种适宜食品样品检测的双抗夹心ELISA检测方法。该方法只对O157菌株有特异性反应,对非O157型肠出血性大肠杆菌及其他菌株无交叉反应。敏感性试验结果表明,对大肠杆菌O157纯培养菌液检出限为1.2×105 CFU/mL。选择性增菌培养后,对牛肉、猪肉和鸡肉与模拟样品中的大肠杆菌O157的检出限为0.4～4CFU/g。; 吴大成孙洋袁洁康桦华郭学军祝令伟陈志虹向蓉冯书章; 关键词：单克隆抗体

一种狂犬病病毒的RT-LAMP检测试剂盒及其检测方法: 本发明公开了了一种狂犬病病毒的RT-LAMP检测试剂盒及其检测方法，主要是根据狂犬病病毒的核衣壳蛋白基因(N基因)和大转录酶蛋白基因(L基因)中的高度保守区段分别设计了一套引物，建立了检测狂犬病病毒的快速一步式反转录环介...; 向华黄元陈晶徐敏向蓉; 文献传递

伪狂犬病病毒变异株的鉴定及伪狂犬病的防控被引量：5: 2016年; 2011年以来伪狂犬病病毒(PRV)变异株在中国大范围流行致伪狂犬病(PR)再次暴发。广东某猪场发生疑似PR引起母猪较大范围的流产,为此本试验展开对该病诊断和防控方法的研究。随机抽取流产和未流产母猪血清,应用ELISA检测PRV gE和gB抗体;同时采集发病仔猪脑组织PCR检测PRV gH片段。对全场母猪紧急接种PRV变异株灭活苗,分别应用ELISA和中和试验检测免疫前后的血清抗体。结果显示,已发生流产母猪血清PR gE抗体均为阳性,而未流产母猪血清抗体见弱阳性;流产母猪PRV gB抗体的S/P值高达4.0,未流产母猪也达3.3。PCR检测3头病仔的脑组织均为阳性,测序表明其gB基因与2012年流行毒株BJ-YT-2012序列相似性为100%。ELISA检测免疫灭活疫苗前母猪血清PRV gB抗体S/P值为1.603,免疫4周后升高到2.88;特别是中和抗体从1∶24升高到1∶213。这与免疫疫苗1周后母猪流产开始减少,2周后母猪少见流产的结果吻合。研究结果提示,PRV经典株疫苗产生的PRV gB抗体对变异株的保护作用不佳,而变异株疫苗的保护效果显著。; 黄元陈晶赵翠玲陈锦良向蓉王晓虎向华黄忠; 关键词：伪狂犬病病毒变异株免疫

A型口蹄疫VP1基因的原核表达及纯化: 2016年; 为了研究A型口蹄疫病毒(FMDV)VP1蛋白的免疫原性,试验采用PCR方法从口蹄疫阳性质粒p MD-18-P1中扩增得到目的基因VP1,与原核表达载体p ET-28a连接,构建重组质粒p ET-28a-VP1,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞,筛选的阳性菌落用IPTG诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE电泳,通过Western-blot分析蛋白的免疫原性,并用镍亲和树脂纯化鉴定后的重组蛋白。结果表明:重组质粒p ET-28a-VP1经PCR及酶切鉴定证明构建正确;重组质粒能够在大肠杆菌中大量表达,表达产物的分子质量大小约为26 ku,且能被口蹄疫阳性血清识别;镍亲和树脂纯化的蛋白条带单一。说明该蛋白具有免疫学活性,且纯度较高。; 刘清源向华黄元陈晶向蓉郑海学刘宇; 关键词：VP1基因克隆表达

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向蓉