向云龙
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
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- 一种卵巢特异性新基因的鉴定
- 2010年
- 目的 筛选新的卵巢特异性蛋白质,探讨其可能在卵细胞成熟及胚胎发育过程中作用.方法 收集小鼠成熟卵细胞,经二维电泳、蛋白印迹、质谱鉴定,获得新的多肽序列;应用RT、RACE-PCR等技术,获得该段多肽对应的新蛋白的全长cDNA序列,并行Northernblot分析其组织特异性.结果 所获得的多肽序列来自一种未知新蛋白,其对应的cDNA全长有1510 bp,前32 bp为5＇非编码区,第33～1433 bp为ORF区,第1434～1510 bp为3＇非编码区;该基因定位于9号染色体上,预测表达466个氨基酸,理论相对分子质量和pI分别为53 400和8.05,具有稳定WD40,F-box保守性功能域,并特异性表达于卵巢组织.结论 一种具有卵巢组织特异性的新蛋白被发现,其生物信息学特征表明其可能参与卵细胞内分子信号通道,可能在卵成熟及早期胚胎发育中具有作用.
- 何畏杨利华孙黎黎向云龙龙玲吴玉章
- 关键词：卵巢卵泡发育胚胎
- 人Eppin基因的原核表达及抗原性鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的构建人附睾蛋白酶抑制蛋白(epididymal protease inhibitor,eppin)基因原核表达质粒,表达并纯化重组蛋白,并探讨其抗原性及应用价值。方法以健康人睾丸组织cDNA为模板进行PCR扩增,将其克隆到原核表达载体pET-32a,并转化大肠埃希菌BL21(DE3),异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,经Ni^(2+)-NTA亲和层析柱纯化,并对纯化产物进行Western印迹鉴定。结果重组质粒经双酶切分析和测序鉴定后证实构建成功;SDS-PAGE结果显示表达产物为相对分子质量36KD的融合蛋白,Western印迹检测纯化后蛋白显示特异性条带。结论成功构建了pET-32a-Eppin重组质粒,并获得了具有抗原特异性的可溶性Eppin蛋白,为进一步研究其生物学活性及免疫性避孕效应奠定了基础。
- 孙黎黎易维京吴玉章龙玲向云龙胡川闽梁志清何畏
- 关键词：避孕免疫学质粒原核表达
