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海南苦楝丛枝病植原体的分子鉴定被引量：2: 2008年; 利用植原体16S rDNA通用引物对Rl6mF2/Rl6mR1,通过PCR技术从表现典型丛枝症状的苦楝植株总DNA扩增到约1.4 kb的特异片段,将此片段克隆后进行序列测定、分析及系统关系树构建。结果表明,该片段与16Sr I组中的各植原体同源率均达到99%以上,其中与16Sr I中的白蜡树丛枝(Ash witches'-broom,AWB,AY566302),柳叶菜变叶(Epilobium phyllody,EP,AY101386)和苦楝丛枝江西株系(Chinaberry witches'-broom,CWB-JX,AY859543)的同源率最高,达到100%,而与其它组的植原体16S rDNA序列的同源率均低于97%。引起我国海南苦楝丛枝病的植原体应归属于16SrⅠ组,将其暂命名苦楝丛枝植原体海南株系。; 罗大全车海彦刘先宝符瑞益叶莎冰; 关键词：植原体 RDNA

苦楝丛枝病植原体海南株系SecY基因序列分析及亚组分类被引量：4: 2008年; 利用植原体16S rⅠ组通用引物对secYF1/secYR1,应用PCR技术从采自海南省儋州地区的表现典型丛枝症状的苦楝植株总DNA中扩增到约1.4 kb的特异片段,将此片段克隆后进行序列测定,序列分析及系统关系树构建的结果表明,该片段长1 358 bp,苦楝丛枝病海南株系(Chinaberry witches'-broom phytoplasma strain Hainan,CWB-Hn)与玉米丛矮(Maize bushy stunt,MBS)植原体聚类在同一条进化枝上;AluⅠ,MseⅠ和Tsp509Ⅰ这3种酶的电子酶切图谱表明,CWB-Hn与MBS的酶切图谱一致,故初步判定苦楝丛枝病植原体海南株系属于secY-L亚组,在亚组水平上进一步明确了苦楝丛枝病植原体海南株系的分类地位。; 罗大全车海彦刘先宝符瑞益叶莎冰; 关键词：植原体 SECY

海南长春花黄化病植原体的16S rDNA序列分析研究被引量：8: 2009年; Periwinkle(Catharanthus roseus) yellows is a common disease in Hainan. Periwinkle′s leaf tissue with symptoms was assayed for phytoplasma infection by using PCR assay employing phytoplasma universal 16S rRNA gene primers (Rl6mF2/Rl6mR1). A PCR product (about 1.4 kb) was amplified from periwinkle showed yellows. Nucleotide sequencing and phylogenetic tree analysis showed that the amplified 16S rDNA contained 1 432 nucleotides, the most homology was 98.1% with the members of elm yellows group (16S r Ⅴ) and clustered in the same clade, while it was under 96.1% with other phytoplasma groups. Our results suggested that the phytoplasma sample belonged to 16S rⅤgroup and was tentatively named as Hainan periwinkle yellows phytoplasma (PY-Hn). This is the first report of existence of 16S r Ⅴ group phytoplasma in naturally infected periwinkle.; 车海彦罗大全符瑞益叶莎冰吴云锋; 关键词：RDNA序列分析植原体黄化病多年生草本植物 ASTER

海南槟榔黄化病病原鉴定及分子检测技术研究: 车海彦罗大全刘先宝李增平符瑞益陈慕容叶莎冰; 槟榔黄化病是一种毁灭性病害，在海南正处于快速蔓延阶段。该成果通过电子显微镜观察、四环素族抗菌素注射诊断、多聚酶链式反应(PCR)技术检测等方法研究，首次确定了引起海南槟榔黄化病的病原是植原体(Phytoplasma)，在...; 关键词：; 关键词：病原鉴定病害防治

海南槟榔黄化病病原物的分子鉴定被引量：29: 2010年; 槟榔黄化病是槟榔上的一种重要病害,如何快速检测该病原菌是防治该病的重要基础。利用植原体16SrDNA通用引物对海南感染黄化病的槟榔花苞总DNA进行巢式PCR扩增,获得约1.2kb的特异片段,并对扩增产物进行核苷酸序列测定。通过BLAST程序比较、系统进化树构建及iPhyClassifier分析表明,引起海南槟榔黄化病病原植原体属于翠菊黄化植原体组(16SrⅠ组),且为该组中一个新的亚组,即G亚组,现将其暂命名槟榔黄化植原体(Arecanut yellow leaf phytoplasma,AYL)。; 车海彦吴翠婷符瑞益温衍生叶莎冰罗大全; 关键词：植原体分子鉴定

海南苦楝丛枝病植原体核糖体蛋白基因片段序列分析被引量：1: 2008年; 【目的】利用分子生物学方法分析采自海南儋州的苦楝丛枝病植原体核糖体蛋白(rp)基因,从亚组水平上确定苦楝丛枝病植原体的分类地位。【方法】利用植原体核糖体蛋白基因通用引物对rpF1/rpR1,应用PCR技术对苦楝丛枝病植原体的核糖体蛋白基因进行扩增,对其核苷酸序列进行测定并分析。【结果】通过PCR扩增得到约1.2 kb的特异片段,测序结果表明该片段长1 240 bp,包括rps19基因的3′区域,rpl22和rps3基因的全部区域。进一步分析发现,该片段与苦楝丛枝病贵州株系(Chinaberry witches'-broom,CWB-GZh)的亲缘关系最近,核苷酸同源性达99.9%。基于核糖体蛋白基因核苷酸序列,构建了海南苦楝丛枝病植原体与其他18个已知分类地位植原体的系统分类树状图,结果表明,引起海南苦楝丛枝病的植原体与16SrⅠ-B亚组植原体越南苦楝黄化、苦楝丛枝贵州株系和苦楝丛枝云南株系在同一条进化枝上。【结论】报道了海南苦楝丛枝病植原体的核糖体蛋白基因序列,海南苦楝丛枝病植原体属于16SrⅠ-B。; 车海彦刘先宝符瑞益叶莎冰罗大全; 关键词：植原体核糖体蛋白基因

海南长春花小叶病植原体16S rDNA基因片段的比较分析被引量：2: 2008年; 从海南儋州地区的长春花上采集了表现小叶症状,疑似植原体感染的病样,利用植原体16S rDNA通用引物对Rl6mF2/Rl6mR1,应用PCR技术从该样品的总DNA提取物中扩增到预期大小的特异片段(约1.4kb),该片段的序列分析及系统关系树构建的结果表明,该片段与16Sr I组中的植原体同源率均达到99%以上,而与其它组的植原体16S rDNA序列的同源率均低于96%,与16SrⅠ组植原体缬草黄化、翠菊黄化、桑萎缩和玉米丛矮等在同一条进化枝上。故初步认为引起海南长春花小叶病的植原体应归属于16Sr I组,将其暂命名为长春花小叶植原体海南株系(Periwinkle little leaf phytopla smastrain Hainan,PLL-Hn)。; 车海彦刘先宝符瑞益叶莎冰罗大全; 关键词：植原体 RDNA

海南岛长蒴母草和金腰箭上存在粉虱传双生病毒的侵染被引量：9: 2005年; 从海南儋州的长蒴母草(Linderniaanagallis)上采集了呈现叶脉黄化、叶背叶脉突起的3个病样,从金腰箭(Synedrellanodiflora)上采集到叶片不均匀褪绿、叶背叶脉突起的3个病样。利用根据粉虱传双生病毒基因组DNA基因间隔区及外壳蛋白基因保守序列设计的简并引物,对这6个样品进行了PCR检测,结果发现所有样品均能扩增到预期大小的DNA片段。PCR产物经克隆后进行序列测定,BLAST结果表明,该序列为双生病毒基因组DNA序列,该2种杂草上均存在双生病毒的侵染。; 车海彦罗大全杨旭光叶莎冰; 关键词：粉虱传双生病毒 PCR

海南省槟榔黄化病病原鉴定及分子检测技术研究: 车海彦罗大全刘先宝李增平符瑞益陈慕容叶莎冰; 1.课题来源与背景：该课题属计划外项目。2.技术原理及性能指标：技术原理：植物病理学、植物保护学和分子生物学的有关原理，具体涉及到病害症状、病害流行规律调查、电子显微镜观察、四环素族抗菌素注射诊断、多聚酶链式反应(PCR...; 关键词：; 关键词：槟榔病原鉴定

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叶莎冰