史利宁 作品数:139 被引量:468 H指数:12 供职机构: 南京军区南京总医院 更多>> 发文基金: 江苏省科技支撑计划项目 国家自然科学基金 军队医药卫生科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 理学 更多>>
蜕膜与妊娠的免疫调节 被引量:1 1997年 史利宁 王艾丽 武建国关键词:蜕膜 妊娠 免疫调节 侵袭性真菌感染的血清学诊断 被引量:9 2010年 史利宁 邵海枫 李芳秋关键词:侵袭性真菌感染 血清学诊断 半乳甘露聚糖试验对侵袭性曲霉病诊断价值的回顾性分析 被引量:8 2010年 目的回顾性分析Platelia Aspergillus EIA法检测血清半乳甘露聚糖(GM)对侵袭性曲霉病(IA)的诊断价值。方法根据诊断标准回顾性地将诊断分为确诊、临床诊断、拟诊及排除IA,并根据患者的基础疾病及是否接受影响免疫功能的药物分为:恶性血液病及造血干细胞移植术后(HSCT)组(A组),使用了影响免疫功能药物但非恶性血液病及HSCT患者组(B组),非恶性血液病及HSCT且未使用影响免疫功能药物的患者组(C组),分析GM实验在各组患者中的以及总的敏感性、特异性、阳性预测值(PPV)和阴性预测值(NPV)。结果781例患者,最终确诊8例,临床诊断33例,拟诊189例,排除IA551例。230例不能排除真菌感染的患者中160例GM阳性,阳性率69.6%,其中确诊6例,临床诊断24例,拟诊130例。GM实验总的敏感性、特异性、NPV分别为73.2%、81.7%、97.6%。在不同类型的患者中敏感性和特异性存在差异,A组的敏感性、特异性分别为85.7%、88.4%,B组为81.2%、81.4%,C组为45.5%、78.7%;不同类型的患者GM试验结果吸光率指数(AI)的中位数分别为A组2.78,B组1.82,C组0.585;A组、B组与C组的敏感性、特异性和AI值分布上有显著差异(P〈0.05)。至少68.0%真菌培养阳性患者GM阳性时间早于培养阳性2~11d。结论Platelia Aspergillus EIA法检测GM对IA高危患者尤其是恶性血液病及HSCT患者、使用了影响免疫功能药物的其他患者有早期诊断价值,连续监测患者的GM水平,有助于了解疾病的进展程度、对治疗的反应性及预后;但在非血液病且未使用影响免疫功能药物的患者中其诊断价值有限。 史利宁 李芳秋 邵海枫 王立魁 王卫萍 黄梅关键词:半乳甘露聚糖 侵袭性曲霉病 检测抗烟曲霉分泌蛋白抗体的ELISA法及其诊断价值 被引量:8 2010年 目的建立检测人血清中抗烟曲霉特异性抗体的ELISA法,评估该法在侵袭性烟曲霉病(IA)诊断中的价值。方法用沙氏液体培养基震荡培养烟曲霉,TCA/丙酮沉淀法分离菌体蛋白和培养上清中的分泌蛋白。用烟曲霉播散感染的家兔血清及确诊IA患者血清,分别与菌体蛋白和分泌蛋白进行免疫印迹分析,选择反应强的分泌蛋白作为包被抗原,建立测定抗烟曲霉特异抗体的ELISA,并对方法的精密度和特异性进行考察、确定cut off值。对实验动物模型血清以及5例确诊、24例临床诊断为IA的患者血清样本进行测定,并与血清半乳甘露聚糖(GM)测定结果进行比较。结果免疫印迹结果显示培养获得的烟曲霉分泌蛋白与感染动物和病人血清均呈现强反应,以其作为包被抗原建立的ELISA法精密度良好,批内CV=12.0%,批间CV=8.1%;阻断试验证实此法对烟曲霉抗体具特异性。依据200份健康人血清测定结果,取吸光度(A)值1.03作为cut-off值。健康人抗体阳性率为2.0%(4/200),IA患者阳性率41.4%(12/29),二者差异显著(P<0.01)。2例临床诊断病人血清GM试验阴性,但抗体阳性,占8.3%(2/24)。实验感染的家兔均在感染后1周内测出抗体,且抗体滴度快速上升。结论建立了检测抗烟曲霉分泌蛋白抗体的ELISA法,在IA早期诊断中具有潜在应用价值。 李芳秋 周万青 史利宁 吴丹 沙士甫关键词:烟曲霉 分泌蛋白 抗体 酶联免疫吸附测定法 侵袭性念珠菌感染病人血清抗烯醇化酶抗体水平变化及影响因素 <正>目的我们建立了检测念珠菌烯醇化酶(enolase,Eno)抗体(抗Eno)的ELISA。并且通过回顾性研究,证实检测抗Eno的方法诊断侵袭性念珠菌病(invasive candidiasis,IC)的特异性能高达8... 李芳秋 廖红 张国勇 李伟 史利宁 胡毓安 刘倩文献传递 一种PCR‑LF技术检测碳青霉烯类耐药基因KPC和NDM的引物组合物及其应用 本发明公开了一种PCR‑LF技术检测碳青霉烯类耐药基因KPC和NDM的引物组合物及其应用。所述引物组合物包含:用于检测KPC基因的上游引物如SEQ ID No.1所示,下游引物序列如SEQ ID No.2;用于检测NDM... 李晓军 顾芸芸 孙宁 史利宁 姚新月 王卫萍 陈芳芳 黄梅 王颖 杨阳白色念珠菌H3K4甲基转移酶N端肽段抗体的ELISA检测方法建立 2013年 目的建立检测人血清中抗白色念珠菌H3K4甲基转移酶N末端肽段(N—terminal region of histone 3 lysine 4 methyhransferase,Setl-208p)IgG类抗体的ELISA方法,评估其在侵袭性念珠菌病(invasive candidiasis,IC)患者中的早期诊断价值。方法收集IC患者(105例)、定植患者(37例)、细菌感染患者(25例)、其他真菌感染患者(10例)以及健康体检者(200例)血清,用Setl-208p作为包被抗原,血清1:500稀释,以羊抗人IgG-HRP为二抗,测定人血清中相应的抗Setl-208p抗体水平,确定cut-off值并考查方法的敏感度、特异度和准确度。结果以重组Setl-208p抗原建立的ELISA法精密度良好,批内变异系数(coefficient of variation,CV)为5.5%,批间CV为10.4%。重组抗原对血清中相应抗体的阻断率为91.8%,根据ROC曲线,选择吸光度(absorbance,A)值0.40作为cut off值,对IC的诊断敏感度为79.2%,特异度为90%,且与细菌感染及其他真菌感染病人(如曲霉)无非特异交叉反应。此外,IC患者中抗Setl-208p抗体阳性率(76.1%,80/105)显著高于念珠菌定植者抗Setl-208p抗体阳性率(32.4%,12/37)(χ^2=22.9,P〈0.01)。结论建立了检测抗白念珠菌抗Setl-208p抗体的ELISA法,在IC早期诊断中具有潜在应用价值。 孔倩倩 马春芳 蔡迁 廖红 韩丹丹 史利宁 李芳秋关键词:念珠菌 ELISA 血清学诊断 铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药机制的研究 被引量:10 2006年 目的:研究铜绿假单胞菌(PA)对亚胺培南的耐药机制,为临床合理选择抗生素提供确切的依据。方法:用2-巯基丙酸和头孢他啶双纸片协同法,检测临床分离的48株耐亚胺培南PA金属β-内酰胺酶(MBL)产生率,并提取各菌株的外膜蛋白,进行SDS-PAGE电泳分析,比较各耐药菌株外膜蛋白与标准菌株的差异。结果:48株耐亚胺培南PA中8株产MBL;在外膜蛋白SDS-PAGE图上发现32株缺少外膜蛋白OprD2,其中8株还伴随其他外膜蛋白的改变。结论:PA对亚胺培南耐药的主要原因是外膜蛋白OprD2缺失或含量减少以及MBL的产生,或由两者共同作用所致。 王卫萍 邵海枫 韩丽丽 王锦娜 史利宁 张小卫关键词:铜绿假单胞菌 亚胺培南 耐药性 金属Β-内酰胺酶 烟曲霉果胶裂解酶A重组蛋白的原核表达及抗原性分析 被引量:3 2015年 目的制备烟曲霉果胶裂解酶A(pectate lyase A,Ply A)重组蛋白质并鉴定其抗原性。方法对编码烟曲霉ply A基因的DNA序列进行优化和人工合成,序列分析验证,然后连接至表达载体p ET-28a(+),并转化大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3)。用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白质表达,SDS-PAGE电泳分析重组蛋白质,并用Talon亲和层析柱纯化,western blot分析重组蛋白质与抗组氨酸标签蛋白(His-tag)单克隆抗体和侵袭性曲霉病患者血清中相应抗体的反应性。结果克隆出经过修饰改良的、适用于原核细胞表达的烟曲霉ply A基因的DNA序列;获得相对分子量约35 300的Ply A重组蛋白质;western blot结果显示该蛋白质可被抗His-tag抗体识别,并与曲霉病患者血清中抗体发生特异性免疫反应。结论成功表达烟曲霉Ply A重组蛋白质,初步证明该蛋白质的抗原性良好。 张国勇 刘倩 李芳秋 史利宁 胡毓安 李伟 商秀娟关键词:烟曲霉 原核表达 ELISA法检测曲霉半乳甘露聚糖的影响因素 被引量:5 2010年 史利宁 李芳秋关键词:半乳甘露聚糖 ELISA法 影响因素 曲霉 鼠单克隆抗体 免疫反应性